一种舒伯特气单胞菌特异性引物及其在大菱鲆养殖过程中的应用

    公开(公告)号:CN105734165A

    公开(公告)日:2016-07-06

    申请号:CN201610308350.3

    申请日:2016-05-11

    Applicant: 辽宁大学

    CPC classification number: C12Q1/689 C12Q1/686 C12Q2565/125 C12Q2527/101

    Abstract: 本发明涉及一种舒伯特气单胞菌特异性引物及其在大菱鲆养殖过程中的应用。本发明设计的舒伯特气单胞菌特异性引物由上游引物F:GGGCCCGTTATGACCAGTTT和下游引物R:AGGAGTGATCTTGAGCTTGACC构成。本发明设计的舒伯特气单胞菌特异性引物,能有效从各常见致病菌株中区分出舒伯特气单胞菌,表现出很强的特异性和灵敏性。本发明所提供的在大菱鲆养殖过程中舒伯特气单胞菌的PCR检测方法,使得养殖过程中舒伯特气单胞菌的检测更为简便。本发明方法的确立为今后大菱鲆养殖过程中高发致病菌的检测和分析提供了必要的理论依据和完善的方法体系,同时为促进我国养殖产业的规模化健康发展奠定了基础。

    一种用于近缘物种鉴别的PCR引物设计方法

    公开(公告)号:CN103646193B

    公开(公告)日:2016-07-06

    申请号:CN201310723968.2

    申请日:2013-12-24

    Applicant: 辽宁大学

    Abstract: 本发明公开一种用于近缘物种鉴别的PCR引物设计方法。本发明方法包括:获得目标种系和非目标种系同一基因的多条DNA序列,并进行多序列比对,获得多序列比对文件;按照常规引物设计方法设计出多个上游引物和下游引物,并排除敏感性和特异性低于设定阈值的单向引物;剩余的上游引物和下游引物互相配对,产生引物对,排除不合理的及敏感性和特异性较低的引物对;计算剩余各引物对的P值,进行聚类分析,取出每类中P值最小的引物对作为设计得到的PCR引物。本发明提供的用于近缘物种鉴别的PCR引物设计方法,能快速设计出对目标种系具有高度特异性且敏感性高的PCR引物,降低了种系特异性PCR引物设计的难度。

    一种快速鉴定扇贝品种的多重PCR引物及方法

    公开(公告)号:CN103602738B

    公开(公告)日:2015-04-08

    申请号:CN201310566790.5

    申请日:2013-11-12

    Applicant: 辽宁大学

    Abstract: 本发明涉及一种快速鉴定扇贝品种的多重PCR引物及方法。属于应用生物技术领域。快速鉴定扇贝品种的多重PCR引物,由栉孔扇贝引物、华贵栉孔扇贝引物、海湾扇贝引物和虾夷扇贝引物组成。鉴定方法包括以下步骤:提取扇贝基因组总DNA,进行多重PCR扩增,根据琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物大小判定待检测扇贝种类。栉孔扇贝、海湾扇贝、虾夷扇贝和华贵栉孔扇贝的PCR产物条带大小分别为514bp、367bp、205bp和149bp。本发明的鉴定引物及多重PCR方法可以灵敏、快速地确定待检测扇贝样品的种类,较传统检测方法具有操作简单、可重复性强、成本低等优点。

    抗生素产生菌Lnu-13的发酵条件

    公开(公告)号:CN104404085A

    公开(公告)日:2015-03-11

    申请号:CN201410691651.X

    申请日:2014-11-25

    Applicant: 辽宁大学

    Abstract: 本发明涉及一种抗生素产生菌Lnu-13的发酵条件。本发明针对抗生素产生菌Lnu-13的发酵条件进行了研究,比较在不同的营养条件和培养条件下,菌株Lnu-13抗生素的产生情况。确定最佳发酵培养基配方为:玉米粉3.0%、花生饼粉2.0%、MgSO40.03%、NaCl0.01%,CaCO30.2%。最佳发酵条件为:发酵培养基的初始pH7.0,培养温度28℃,摇床速度180r/min,培养时间为5天。本发明的Lnu-13菌株,对多种植物病原菌和金黄葡萄球菌(Staphylococcus aureus)等革兰氏阳性细菌有较强的抗性,具有很好的开发应用前景。

    一种用于近缘物种鉴别的PCR引物设计方法

    公开(公告)号:CN103646193A

    公开(公告)日:2014-03-19

    申请号:CN201310723968.2

    申请日:2013-12-24

    Applicant: 辽宁大学

    Abstract: 本发明公开一种用于近缘物种鉴别的PCR引物设计方法。本发明方法包括:获得目标种系和非目标种系同一基因的多条DNA序列,并进行多序列比对,获得多序列比对文件;按照常规引物设计方法设计出多个上游引物和下游引物,并排除敏感性和特异性低于设定阈值的单向引物;剩余的上游引物和下游引物互相配对,产生引物对,排除不合理的及敏感性和特异性较低的引物对;计算剩余各引物对的P值,进行聚类分析,取出每类中P值最小的引物对作为设计得到的PCR引物。本发明提供的用于近缘物种鉴别的PCR引物设计方法,能快速设计出对目标种系具有高度特异性且敏感性高的PCR引物,降低了种系特异性PCR引物设计的难度。

    一种桦褐孔菌及从桦褐孔菌中提取三萜类物质的方法

    公开(公告)号:CN101933460B

    公开(公告)日:2012-10-10

    申请号:CN200910248615.5

    申请日:2009-12-22

    Applicant: 辽宁大学

    Abstract: 本发明涉及一种桦褐孔菌及从桦褐孔菌中提取三萜类物质的方法。采用的技术方案是:桦褐孔菌(Inonqqus obliquus LNUF008),CCTCC M209280。利用此桦褐孔菌提取三萜类物质的方法如下:经活化,制备种子液;以发酵液体积2%的接种量接到发酵罐液体综合培养基中,发酵,将发酵液抽滤,45℃干燥,抽滤出菌丝体,将菌丝体倒入研钵研磨成粉末状,加入10倍体积的有机溶剂,浸泡24小时;于50℃,77KHz下超声破碎60分钟;于5000转/分钟条件下离心10分钟,弃去沉淀,收集上清液,减压浓缩,得目标产物。本发明提取的三萜类物质含量高,回收率高,为大规模生产提供了可行性。

    一种芦根大青叶保健饮料及其制备方法

    公开(公告)号:CN102578672A

    公开(公告)日:2012-07-18

    申请号:CN201210077830.5

    申请日:2012-03-22

    Applicant: 辽宁大学

    Inventor: 刘宏生 赵健

    Abstract: 本发明提供了一种芦根大青叶保健饮料及其制备方法。该饮料是以芦根、大青叶为主要原料,配以金银花、菊花、枸杞子和蜂蜜等天然原料;将芦根大青叶浸提液20~40ml、金银花、菊花和枸杞子混合提取液5~15ml、糖液10~20ml、酸液5~15ml混合,得到芦根大青叶保健饮料;本发明芦根大青叶保健饮料为橙黄色澄清液体,具有芦根大青叶保健饮料特殊混合香味及蜂蜜的味道,酸甜适口,具有清热解毒、养肝明目等功效,是理想的保健饮品。

    一株含突变纳豆激酶重组基因的工程菌及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN113005045B

    公开(公告)日:2023-06-16

    申请号:CN202110269600.8

    申请日:2021-03-12

    Applicant: 辽宁大学

    Abstract: 本发明涉及一株含突变纳豆激酶重组基因的工程菌及其构建方法和应用。以枯草芽孢杆菌基因为模板,PCR扩增得纳豆激酶前导肽‑成熟肽基因片段NKt;以NKt基因片段为模板,扩增NKt194突变片段;将NKt194突变片段按毕赤酵母X33密码子偏好性进行优化和合成得NKt2;构建PGAPZα‑A‑NKt2,将PGAPZα‑A‑NKt2转化毕赤酵母X33构建真核表达系统的纳豆激酶重组基因工程菌株;培养纳豆激酶重组基因工程菌株,诱导纳豆激酶表达。本发明成功构建一株突变纳豆激酶重组基因工程菌LNF012及在真核系统中表达,使原核生物的纳豆激酶基因在真核生物体系中成功表达,为今后纳豆激酶大规模的应用奠定了基础。

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