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公开(公告)号：CN108218979A
公开(公告)日：2018-06-29
申请号：CN201810000545.0
申请日：2018-01-02
Applicant: 辽宁大学
Abstract: 本发明涉及一种小鼠IL‑38的生产方法。采用基因工程方法生产，该方法包括以下步骤：1)小鼠IL‑38基因密码子优化与合成；2)PCR引物合成；3)PCR扩增获得小鼠IL‑38片段；4)构建pET28a‑mIL‑38重组载体；5)将pET‑28a‑mIL‑38转化大肠杆菌BL21，构建小鼠IL‑38基因工程菌；6)培养小鼠IL‑38基因工程菌，诱导小鼠IL‑38蛋白表达，该工程菌表达的重组IL‑38主要为可溶蛋白；7)用Ni‑NAT对表达的小鼠IL‑38蛋白进行纯化即可得到较高纯度的小鼠IL‑38蛋白。小鼠IL‑38蛋白的成功制备，为探究IL‑38在各种小鼠炎症疾病模型中的作用及其分子机制奠定了基础。
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公开(公告)号：CN108066812A
公开(公告)日：2018-05-25
申请号：CN201810000396.8
申请日：2018-01-02
Applicant: 辽宁大学
Abstract: 一种活性益生菌明胶海绵及其制造方法，本海绵可直接用于个人卫生护理，方便随时取用。本发明的制备方法工艺流程简洁，易于操作，生产效率高。通过本发明阐述的方法将活性益生菌明胶海绵制成相适应的大小，包装设计成长方格铝箔，易于根据使用大小切割，使用方便，不易污染。同时可以减少浪费，降低使用成本，本方法还使得活性益生菌明胶海绵产品化，在规模化生产加工上达到较好效果。
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公开(公告)号：CN105969671A
公开(公告)日：2016-09-28
申请号：CN201610412117.X
申请日：2016-06-13
Applicant: 辽宁大学
Abstract: 本发明公开一种桦褐孔菌原生质体的制备和转化方法。所述制备方法，包括如下步骤：采用溶壁酶和崩溃酶组成的混合酶液对桦褐孔菌菌丝膜进行酶解，对酶解液用8层擦镜纸过滤，收集滤液、离心，所得沉淀即为桦褐孔菌原生质体。所述转化步骤：将质粒pAN7‑1通过PEG/CaCl2介导，转化至桦褐孔菌原生质体中，得到含有质粒pAN7‑1的桦褐孔菌。采用本方法制得的桦褐孔菌原生质体产率高达5×107个/mL，再生率为7％。本发明的制备和转化方法为后期对该菌进行遗传操作改造，提高三萜化合物及其前体的产量，进而提高桦褐孔菌的药用价值，满足市场的需求奠定了基础。
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公开(公告)号：CN101933460B
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN200910248615.5
申请日：2009-12-22
Applicant: 辽宁大学
IPC: C12N1/14
Abstract: 本发明涉及一种桦褐孔菌及从桦褐孔菌中提取三萜类物质的方法。采用的技术方案是：桦褐孔菌(Inonqqus obliquus LNUF008)，CCTCC M209280。利用此桦褐孔菌提取三萜类物质的方法如下：经活化，制备种子液；以发酵液体积2％的接种量接到发酵罐液体综合培养基中，发酵，将发酵液抽滤，45℃干燥，抽滤出菌丝体，将菌丝体倒入研钵研磨成粉末状，加入10倍体积的有机溶剂，浸泡24小时；于50℃，77KHz下超声破碎60分钟；于5000转/分钟条件下离心10分钟，弃去沉淀，收集上清液，减压浓缩，得目标产物。本发明提取的三萜类物质含量高，回收率高，为大规模生产提供了可行性。
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公开(公告)号：CN109576277B
公开(公告)日：2022-06-14
申请号：CN201910043737.4
申请日：2019-01-17
Applicant: 辽宁大学
IPC: C12N15/25 , C12N15/70 , C07K14/545
Abstract: 本发明涉及一种小鼠截短IL‑36α蛋白的生产方法。包括以下步骤：小鼠截短IL‑36α蛋白基因密码子优化与合成；PCR扩增获得小鼠截短IL‑36α片段；构建pET28a‑mIL‑36α重组载体；将pET28a‑mIL‑36α转化大肠杆菌BL21，构建重组工程菌；诱导小鼠截短IL‑36α蛋白表达，该工程菌表达的重组小鼠截短IL‑36α主要为可溶蛋白；用Ni‑NAT对表达的小鼠截短IL‑36α蛋白进行纯化即可得到较高纯度的小鼠截短IL‑36α蛋白。本发明小鼠截短IL‑36α蛋白的成功制备，为探究IL‑36α在各种小鼠炎症疾病模型中的作用及其分子机制奠定了基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104962481A
公开(公告)日：2015-10-07
申请号：CN201510358097.8
申请日：2015-06-25
Applicant: 辽宁大学
Abstract: 本发明涉及一种桦褐孔菌菌核培养基及其制备方法，属于微生物工程技术领域。本发明的培养基由以下原料组成：桦木屑85-95％、蛋白胨0-5％、葡萄糖2-8％、硫酸镁0.05-1.5％、石膏1-3％、每100克桦木屑添加0.5-5ml的鸡蛋清和一定量的水。本发明的培养基能解决桦褐孔菌菌核培养过程中步骤繁琐、培养条件苛刻以及培养时间长的问题，大大缩短了桦褐孔菌菌丝生长和菌核生成的时间。
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公开(公告)号：CN101933460A
公开(公告)日：2011-01-05
申请号：CN200910248615.5
申请日：2009-12-22
Applicant: 辽宁大学
Abstract: 本发明涉及一种桦褐孔菌及从桦褐孔菌中提取三萜类物质的方法。采用的技术方案是：桦褐孔菌(Inonqqus obliquus LNUF008)，CCTCC M209280。利用此桦褐孔菌提取三萜类物质的方法如下：经活化，制备种子液；以发酵液体积2％的接种量接到发酵罐液体综合培养基中，发酵，将发酵液抽滤，45℃干燥，抽滤出菌丝体，将菌丝体倒入研钵研磨成粉末状，加入10倍体积的有机溶剂，浸泡24小时；于50℃，77KHz下超声破碎60分钟；于5000转/分钟条件下离心10分钟，弃去沉淀，收集上清液，减压浓缩，得目标产物。本发明提取的三萜类物质含量高，回收率高，为大规模生产提供了可行性。
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公开(公告)号：CN113005045A
公开(公告)日：2021-06-22
申请号：CN202110269600.8
申请日：2021-03-12
Applicant: 辽宁大学
Abstract: 本发明涉及一株含突变纳豆激酶重组基因的工程菌及其构建方法和应用。以枯草芽孢杆菌基因为模板，PCR扩增得纳豆激酶前导肽‑成熟肽基因片段NKt；以NKt基因片段为模板，扩增NKt194突变片段；将NKt194突变片段按毕赤酵母X33密码子偏好性进行优化和合成得NKt2；构建PGAPZα‑A‑NKt2，将PGAPZα‑A‑NKt2转化毕赤酵母X33构建真核表达系统的纳豆激酶重组基因工程菌株；培养纳豆激酶重组基因工程菌株，诱导纳豆激酶表达。本发明成功构建一株突变纳豆激酶重组基因工程菌LNF012及在真核系统中表达，使原核生物的纳豆激酶基因在真核生物体系中成功表达，为今后纳豆激酶大规模的应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN104962481B
公开(公告)日：2018-02-09
申请号：CN201510358097.8
申请日：2015-06-25
Applicant: 辽宁大学
Abstract: 本发明涉及一种桦褐孔菌菌核培养基及其制备方法，属于微生物工程技术领域。本发明的培养基由以下原料组成：桦木屑85‑95％、蛋白胨0‑5％、葡萄糖2‑8％、硫酸镁0.05‑1.5％、石膏1‑3％、每100克桦木屑添加0.5‑5ml的鸡蛋清和一定量的水。本发明的培养基能解决桦褐孔菌菌核培养过程中步骤繁琐、培养条件苛刻以及培养时间长的问题，大大缩短了桦褐孔菌菌丝生长和菌核生成的时间。
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公开(公告)号：CN107190024A
公开(公告)日：2017-09-22
申请号：CN201710421832.4
申请日：2017-06-07
Applicant: 辽宁大学
IPC: C12N15/867 , C12N5/10
CPC classification number: C12N15/86 , C07K14/005 , C12N2740/15043 , C12N2760/16122
Abstract: 本发明涉及一种稳定表达NS1蛋白细胞株的构建方法。在pLenti‑CMV‑EGFP‑3Flag‑PGK‑Puro载体的EcoR I多克隆位点处插入NS1基因，用构建好的pLenti‑CMV‑NS1‑EGFP‑3Flag‑PGK‑Puro重组质粒与病毒包装质粒共转染293T细胞，培养、出毒、收取病毒上清、过滤得重组慢病毒液。将包装好的重组慢病毒感染A549细胞，通过嘌呤霉素筛选，免疫荧光及Western blot鉴定，得稳定表达NS1蛋白细胞株。本发明利用重组慢病毒系统制备一种融合标签蛋白并能稳定表达NS1蛋白的细胞株，该细胞株为研究NS1蛋白的生物学功能提供一个很好的工具。
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