公开(公告)号：CN111602527B

公开(公告)日：2022-06-03

申请号：CN202010670919.7

申请日：2020-07-13

Applicant: 西南大学

Inventor： 杨方云 ,  周常勇 ,  李中安

IPC: A01G2/10 ,  A01G31/00 ,  A01G24/15 ,  A01G24/10 ,  A01G24/23 ,  A01G24/28

Abstract: 本发明公开了一种柑橘陶粒扦插方法，采用陶粒和土壤作为基质用于扦插柑橘，陶粒的成本较低，具有很高的孔隙度而透气性非常好；内部多孔，可给予扦插柑橘枝梢一定的湿润小环境，同时下部的土壤也可以为柑橘提供营养。本申请为柑橘的扦插培养提供了新方案。

公开(公告)号：CN105861747B

公开(公告)日：2019-03-22

申请号：CN201610246323.8

申请日：2016-04-20

Applicant: 西南大学

Inventor： 宋震 ,  王艳娇 ,  崔甜甜 ,  陈洪明 ,  李中安 ,  周常勇

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明提供一种快速鉴定柑橘脉突病毒侵染植株的方法，包括如下步骤：（1）取待测植株根部，提取总RNA；（2）以提取的总RNA为模板，利用柑橘脉突病毒的特异性下游引物EVqR4进行逆转录反应，获得cDNA；（3）以步骤（2）制得的cDNA为模板，利用特异性引物EVqF4、EVqR4进行实时荧光定量RT‑PCR检测，并制作标准曲线；（4）根据上述步骤（3）的检测结果判断植株的带病情况，对带病植株的病毒进行定量计算。本发明对柑橘脉突病毒侵染植株的鉴定具有速度快、准确度高及重复性强的特点，并可对植株内的CEVE病毒进行定量分析。

公开(公告)号：CN108588113A

公开(公告)日：2018-09-28

申请号：CN201810368251.3

申请日：2018-04-23

Applicant: 西南大学

Inventor： 宋震 ,  崔甜甜 ,  宾羽 ,  晏建红 ,  李中安 ,  周常勇

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了一种三元穿梭载体pTY，其序列如SEQ ID NO:11所示。还公开了一种利用pTY构建柑桔黄化脉明病毒(CYVCV)侵染性克隆的方法，包括如下步骤：(1)制备CYVCV全长cDNA；(2)采用限制性内切酶Stu I、Sma I酶切如SEQ ID NO:11所示三元穿梭载体pTY，得到pTY线性化的载体；(3)酵母转化伴随的同源重组：采用醋酸锂法将线性化载体pTY与CYVCV全长cDNA共转化酵母菌YPH501；(4)侵染性克隆鉴定：同源重组质粒转化农杆菌C58C1，筛选获得CYVCV侵染性克隆。本发明有效克服了病毒全长cDNA片段在大肠杆菌中产生毒性或不稳定导致克隆失败的现象。

公开(公告)号：CN104719129B

公开(公告)日：2018-03-02

申请号：CN201510140236.X

申请日：2015-03-27

Applicant: 西南大学

Inventor： 阮仁武 ,  李中安 ,  易泽林 ,  张建奎

IPC: A01H1/02 ,  A01H1/04

Abstract: 一种小麦新品种的选育方法，本发明利用含有mslb‑Rht3基因的连锁的矮秆不育小麦品系与其他优良品种进行杂交、回交，连续3‑5代回交建立优良品种矮秆不育的近等基因系，选育出稳定的含有mslb‑Rht3的矮秆优良小麦品系，然后用中秆可育品系自交，让染色体重组交换，解除mslb‑Rht3的连锁，获得含有Rht3矮秆基因的小麦优良品系，再利用建立的小麦不育近等基因系与含有育种所需目标性状的小麦品种(系)进行杂交、回交，连续3‑5代用含有育种所需目标性状株系与同品种(系)进行回交、自交，在回交、自交后代中选择具有所需目标性状的优良中秆植株或高秆植株进行育种选育。本发明提供的育种方法不仅育种效率高，而且省时省工。

公开(公告)号：CN105483284A

公开(公告)日：2016-04-13

申请号：CN201510906257.8

申请日：2015-12-08

Applicant: 西南大学

Inventor： 宋震 ,  刘科宏 ,  陈洪明 ,  李中安 ,  周常勇

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/701 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q2600/16 ,  C12Q2537/143 ,  C12Q2545/113

Abstract: 本发明公开了一种同步检测CYVCV、CTV和CTLV的实时荧光定量RT-qRT试剂盒，包括如下3对病毒特异性RT-qPCR引物：SEQ ID NO：1，SEQ ID NO：2，SEQ ID NO：3，SEQ ID NO：4，SEQ ID NO：5，SEQ ID NO：6。本发明通过一步RT-qPCR反应可以实现CYVCV、CTV、CTLV的同步检测及病毒定量。本发明方法与常规RT-PCR检测方法相比，提升了CYVCV、CTLV和CTV检测灵敏度100倍以上，检测时间节省3倍以上，污染几率降低30％以上，在诊断病害发生和监控病害流行及维护柑橘产业安全等方面具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN104152588A

公开(公告)日：2014-11-19

申请号：CN201410451332.1

申请日：2014-09-05

Applicant: 西南大学柑桔研究所

Inventor： 周彦 ,  陈洪明 ,  王雪峰 ,  李中安 ,  周常勇

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12R1/94

CPC classification number: C12Q1/70 ,  C12Q1/6848 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2549/119

Abstract: 本发明涉及一种柑桔黄脉病毒的巢式RT-PCR引物组、检测方法及试剂盒,属于分子生物学技术领域。本发明提供了柑桔黄脉病毒的巢式RT-PCR外巢引物对CYVCV-1f、CYVCV-1r和内巢引物对CYVCV-2f、CYVCV-2r，利用外巢引物对进行第一轮RT-PCR扩增，再以第一轮RT-PCR扩增产物为模板用内巢引物对进行第二轮PCR扩增，检测第二轮PCR产物，获得469bp的PCR产物的待测样品即为受到柑桔黄脉病毒侵染的样品。本发明操作简便、重复性好、准确性高，其灵敏度是常规RT-PCR的100倍，对处于潜伏期的病毒也能及时检测到。

公开(公告)号：CN104073572A

公开(公告)日：2014-10-01

申请号：CN201410322816.6

申请日：2014-07-08

Applicant: 西南大学柑桔研究所

Inventor： 刘科宏 ,  周常勇 ,  李中安 ,  周彦

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/94

CPC classification number: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2561/113 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2531/113

Abstract: 本发明提供了一种同时检测CiMV和SDV的实时荧光RT-PCR检测试剂盒，主要包括特异性引物以及PCR反应试剂，所述特异性引物序列为：上游引物：5’-CCGCTTAAGAGTGGCATTAGGT-3’；下游引物：5’-TCCTGGATCGGAAAGGGAAGAG-3’。本发明还提供了同时检测CiMV和SDV的实时荧光RT-PCR检测方法，所述方法包括：(1)提取柑桔待测样品总RNA；(2)样品总RNA经反转录获得其cDNA；(3)以样品cDNA为模板，加入特异性引物和PCR反应试剂，进行实时荧光RT-PCR检测。该方法检测特异性强，灵敏度高，稳定性好。

公开(公告)号：CN101560577A

公开(公告)日：2009-10-21

申请号：CN200910103937.0

申请日：2009-05-25

Applicant: 西南大学 ,  中国农业科学院柑桔研究所

Inventor： 宋震 ,  周常勇 ,  李中安

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/94

Abstract: 本发明涉及一种用于诊断柑桔碎叶病毒(CTLV)分子变异的快速检测方法。它包括设计特异性引物对CTLV基因组特定区域的核酸序列进行逆转录聚合酶链式反应扩增(RT－PCR)，并用Taq I、Mse I、Hinf I或其它限制性内切酶对其RT－PCR产物进行消化，然后依据电泳图谱诊断CTLV的分子变异。本发明的方法具有速度快、成本低、重复性好、稳定性高、操作性强等特点，适合大规模、高通量的样品分析，适用于田间样品检测、CTLV流行监控、脱毒苗木鉴定等多种用途。