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公开(公告)号：CN111454933A
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN202010382460.0
申请日：2020-05-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种D-氨甲酰水解酶突变体及其在D-芳香族氨基酸合成中的应用，属于基因工程技术领域。本发明的D-氨甲酰水解酶突变对多种N-氨甲酰氨基酸具有较高的活力，可以催化多种脂肪族或芳基取代的氨基酸底物，尤其是空间位阻较大的D-N-氨甲酰氨基酸底物。将这些突变体用于海因酶过程级联反应进行催化500mM L-吲哚甲基海因的验证，其中五突变体A200N/R211G/D187N/S207A/E138W在反应12h时产物得率已经达到81.7％，相比WT(40.1％)，产物得率提升2倍，且反应时间大大缩短，仅需12h。本发明所获得的D-氨甲酰水解酶突变体特别适用于海因酶过程级联反应制备光学纯的D-氨基酸，具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN110982799A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911175255.0
申请日：2019-11-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种醇脱氢酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的醇脱氢酶突变体热稳定性高且不对称还原潜手性双芳基酮生产手性双芳基醇的催化效率和转化效率(即时空产率)高，因此，本发明的醇脱氢酶突变体在生产如(S)-(4-氯苯基)-(吡啶-2-基)-甲醇、(R)-(4-氯苯基)-(吡啶-2-基)-甲醇等的手性双芳基醇中具有极高的应用前景。
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公开(公告)号：CN110804597A
公开(公告)日：2020-02-18
申请号：CN201911084700.2
申请日：2019-11-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明CGTase突变体对长链糖基化染料木素的产物特异性高；利用本发明的CGTase突变体A156V/L174P、A156V/L174P/A166Y、A156V/L174P/A166V、A156V/L174P/A166G和A156V/L174P/A166K分别以麦芽糊精作为糖基供体，以染料木素作为糖基受体生产长链糖基化染料木素的产量较利用野生型环糊精葡萄糖基转移酶以麦芽糊精作为糖基供体，以染料木素作为糖基受体生产长链糖基化染料木素的产量分别提高了62.5％、165％、112.5％、112.5％和59.4％。
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公开(公告)号：CN110777125A
公开(公告)日：2020-02-11
申请号：CN201911120248.0
申请日：2019-11-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种杂环类药物中间体的高效制备方法。本发明以醇脱氢酶突变体和葡萄糖脱氢酶偶联催化杂环类底物生成杂环类药物中间体，所述的醇脱氢酶突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的醇脱氢酶母本的127位的酪氨酸突变为色氨酸。本发明的突变体Y127W在不加任何助溶剂的单水相体系可以减轻产物抑制效应使转化率在12h内达到99％以上。将突变体Y127W与葡萄糖脱氢酶(BmGDH)偶联，在不添加任何外源辅酶和有机助溶剂的单水相体系，实现了50mL规模，底物浓度高达600g·L-1的克级制备，催化剂载量为3.3％。终产物(S)-NBHP的e.e.值高达到99.4％，时空产率约为1400g·L-1·d-1，产品纯度为99.58％。
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公开(公告)号：CN110747181A
公开(公告)日：2020-02-04
申请号：CN201911184112.6
申请日：2019-11-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种ω-转氨酶突变体及其在生产手性芳香胺中的应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的ω-转氨酶突变体催化前手性芳香酮的酶活高且本发明的ω-转氨酶突变体不对称还原前手性芳香酮生成手性芳香胺的最大反应速度、催化效率和转化率高，因此，本发明的ω-转氨酶突变体在生产手性芳香胺中具有极高的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106086106A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610411994.5
申请日：2016-06-14
Applicant: 江南大学
IPC: C12P19/02
CPC classification number: C12P19/02 , C12P2201/00
Abstract: 本发明涉及一种多氢键供体低共熔溶剂预处理玉米秸秆及其循环利用方法，属于化学工程领域。在氯化胆碱、天冬氨酸和谷氨酸组成的多氢键供体低共熔溶剂体系中，加入玉米秸秆，90～130℃预处理0.5～3h后，将混合物离心，收集上清液，沉淀用去离子水洗涤三次。向上清液加入一定量的玉米秸秆，一定温度下预处理一定时间，重复上述步骤。将预处理后的玉米秸秆与柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液按一定固液比混合，添加纤维素酶进行酶解，最终葡萄糖产率>76％，并且多氢键供体低共熔溶剂在循环利用4次后，葡萄糖产率>65％。本发明工艺简单，具有效率高、过程经济、三废少等优点，并且预处理后的玉米秸秆水解液可以用来发酵生产丁醇。
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公开(公告)号：CN106047985A
公开(公告)日：2016-10-26
申请号：CN201610374447.4
申请日：2016-05-31
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12Q1/32 , C12Q1/02 , C12Q2304/00 , C12Q2326/00
Abstract: 本发明涉及一种醇脱氢酶的高通量筛选方法。提供了一种利用脂肪族或芳基取代的酮与2,4‑二硝基苯肼在碱性条件下进行显色反应，并在96孔板中建立了针对脂肪族或芳基取代的酮醇脱氢酶的高通量筛选方法。本发明使用深孔板进行微型化细胞培养，不需要对细胞进行破壁处理，突破了传统通过检测额外添加的昂贵辅酶NAD(P)H吸光度变化的筛选方式，具有成本低廉，操作简便，反应灵敏，检测准确，对设备要求低，通用性强的特点，能够快速对检测整细胞样品中醇脱氢酶的活性和反应转化率进行测定。
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公开(公告)号：CN105200076A
公开(公告)日：2015-12-30
申请号：CN201510612331.5
申请日：2015-09-23
Applicant: 江南大学
CPC classification number: Y02P20/588
Abstract: 本发明公开了一种应用重组枯草芽孢杆菌全细胞催化生产光学纯(-)-γ-内酰胺的方法，属于基因工程和生物工程领域。本发明通过构建含有来源于Delftia sp.CGMCC 5755的(+)-γ-内酰胺酶基因的重组枯草芽孢杆菌B.subtilis 168/pMA5-delm，并表达产酶制备全细胞催化剂，对该重组全细胞进行固定化，应用该重组枯草芽孢杆菌到对映选择性水解外消旋γ-内酰胺，最终获得光学纯度大于99％的(-)-γ-内酰胺。该微生物催化制备(-)-γ-内酰胺的方法具有高立体选择性、高反应产率和高产物浓度的特点。
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公开(公告)号：CN105200068A
公开(公告)日：2015-12-30
申请号：CN201510611215.1
申请日：2015-09-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种meso-2,3-丁二醇脱氢酶编码基因，以及含有该基因的重组表达载体和重组表达转化体，其重组酶的制备方法，以及该重组酶作为催化剂在不对称还原前手性双羰基化合物以制备光学活性手性二醇中的应用。本发明的meso-2,3-丁二醇脱氢酶来源于地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)CICIM B0109，可作为催化剂用于手性二醇的高效合成，其催化活性高、立体选择性强、适用的反应条件温和、对环境友好，具有很好的应用开发前景。
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公开(公告)号：CN104004724A
公开(公告)日：2014-08-27
申请号：CN201410271721.6
申请日：2012-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种麦芽糊精底物特异性提高的环糊精糖基转移酶及其制备方法，属于遗传工程和酶工程领域。本发明通过对P.macerans strain JFB05-01(CCTCC NO:M208063)的CGTase的195位的酪氨酸(Tyr)替换为丝氨酸(Ser)，260位的酪氨酸(Tyr)替换为精氨酸(Arg)，265位的谷氨酰胺(Gln)替换为赖氨酸(Lys)，使AA-2G产量分别提高了23％，44％和40％。对以上突变株组合突变，获得双突变体Y195S/Y260R，Y195S/Q265K和Y260R/Q265K以及三点突变体Y195S/Y260R/Q265K。它们利用麦芽糊精为糖基供体生产AA-2G产量分别提高了57％，49％，55％和59％。这些突变株比野生型CGTase更利于利用麦芽糊精为糖基供体生产AA-2G。
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