公开(公告)号：CN110777125A

公开(公告)日：2020-02-11

申请号：CN201911120248.0

申请日：2019-11-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 倪晔 ,  吴彦霏 ,  周婕妤 ,  许国超 ,  韩瑞枝

IPC: C12N9/04 ,  C12P17/12

Abstract: 本发明公开了一种杂环类药物中间体的高效制备方法。本发明以醇脱氢酶突变体和葡萄糖脱氢酶偶联催化杂环类底物生成杂环类药物中间体，所述的醇脱氢酶突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的醇脱氢酶母本的127位的酪氨酸突变为色氨酸。本发明的突变体Y127W在不加任何助溶剂的单水相体系可以减轻产物抑制效应使转化率在12h内达到99％以上。将突变体Y127W与葡萄糖脱氢酶(BmGDH)偶联，在不添加任何外源辅酶和有机助溶剂的单水相体系，实现了50mL规模，底物浓度高达600g·L-1的克级制备，催化剂载量为3.3％。终产物(S)-NBHP的e.e.值高达到99.4％，时空产率约为1400g·L-1·d-1，产品纯度为99.58％。

公开(公告)号：CN110777125B

公开(公告)日：2021-08-31

申请号：CN201911120248.0

申请日：2019-11-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 倪晔 ,  吴彦霏 ,  周婕妤 ,  许国超 ,  韩瑞枝

IPC: C12N9/04 ,  C12P17/12

Abstract: 本发明公开了一种杂环类药物中间体的高效制备方法。本发明以醇脱氢酶突变体和葡萄糖脱氢酶偶联催化杂环类底物生成杂环类药物中间体，所述的醇脱氢酶突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的醇脱氢酶母本的127位的酪氨酸突变为色氨酸。本发明的突变体Y127W在不加任何助溶剂的单水相体系可以减轻产物抑制效应使转化率在12h内达到99％以上。将突变体Y127W与葡萄糖脱氢酶(BmGDH)偶联，在不添加任何外源辅酶和有机助溶剂的单水相体系，实现了50mL规模，底物浓度高达600g·L‑1的克级制备，催化剂载量为3.3％。终产物(S)‑NBHP的e.e.值高达到99.4％，时空产率约为1400g·L‑1·d‑1，产品纯度为99.58％。

公开(公告)号：CN110777127A

公开(公告)日：2020-02-11

申请号：CN201911188612.7

申请日：2019-11-28

Applicant: 江南大学

Inventor： 倪晔 ,  曹旭东 ,  韩瑞枝 ,  方红辉 ,  许国超 ,  吴彦霏

IPC: C12N9/10 ,  C12P7/22

Abstract: 本发明公开了一种支链氨基酸转氨酶作为还原酶的应用，属于酶工程技术领域。本发明提供了一种可用于不对称还原前手性芳香酮生成手性芳香醇的支链氨基酸转氨酶，利用此支链氨基酸转氨酶不对称还原前手性芳香酮生成手性芳香醇的立体选择性高，其中，利用此支链氨基酸转氨酶不对称还原1-萘乙酮生成(S)-1-(1-萘基)-乙醇的ee值高达99％以上，不对称还原4-氯苯基-2-吡啶基甲酮生成(R)-4-氯苯基-2-吡啶基甲醇的ee值高达99％以上，不对称还原N-3-Boc-哌啶酮生成(S)-N-3-Boc-哌啶醇的ee值高达99％以上。