一株高产L-甲硫氨酸的谷氨酸棒杆菌的构建及应用

    公开(公告)号:CN104099267A

    公开(公告)日:2014-10-15

    申请号:CN201410254429.3

    申请日:2014-06-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一株高产L-甲硫氨酸的谷氨酸棒杆菌的构建及应用,属于生物工程领域。本发明提供的高产甲硫氨酸的重组菌株(C.glutamicumsubspecieslactofermentum)QW102/pJYW-4-homm-lysCm-brnFE,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC M2014232。该重组菌株存在以下遗传学特征:表达转运蛋白BrnFE,表达天冬氨酸激酶片段lysC和高丝氨酸脱氢酶片段hom,同时在基因组上缺失thrB和mcbR基因。本发明通过基因工程的方法,获得一株高产甲硫氨酸的重组菌株;还提供了用该重组菌株高产L-甲硫氨酸的方法。

    一种随机突变获得的谷氨酸脱羧酶突变体基因及其编码蛋白质和应用

    公开(公告)号:CN103484489A

    公开(公告)日:2014-01-01

    申请号:CN201310438191.5

    申请日:2013-09-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了两种pH作用范围拓宽的谷氨酸脱羧酶突变体,其DNA序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3,氨基酸序列分别为SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4。本发明结合随机突变(易错PCR)技术和DNA定点突变技术,对野生型谷氨酸脱羧酶GadB1编码基因进行分子改造,得到了两种突变酶GadB1T17I/D294G/Q346H和GadB1T17I/D294G/E312S/Q346H,相对野生酶其有效pH作用范围得到一定的扩展,尤其在偏中性pH条件下仍具有较好的活性。随着有效pH作用范围的拓宽,突变酶在pH5.5~6.5条件下,仍然具有较高的催化活性,因此解决了谷氨酸脱羧酶催化GABA生物合成时,在pH5.5~6.5时,催化能力低的问题,为利用该酶及其编码基因来生物合成GABA创造好的条件。

    一种空肠弯曲菌的高灵敏快速检测试剂盒

    公开(公告)号:CN102534038A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201210045964.9

    申请日:2012-02-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供一种可用于食源性病原菌空肠弯曲菌的高灵敏快速分子检测试剂盒,其中包括针对特异性检测靶基因flhA的、可用于环介导等温扩增靶序列的4条高特异性引物(2条内引物flhA-FIP/flhA-BIP和2条外引物flhA-F3/flhA-B3),以及可进行环介导等温扩增靶序列的高效反应体系。同时,本发明还提供了一种应用所述试剂盒检测空肠弯曲菌的方法。运用本发明试剂盒和方法检测空肠弯曲菌,比PCR检测灵敏度高100倍以上,且对空肠弯曲菌检测具有高度的特异性。本发明提供的试剂盒和检测方法,不仅灵敏度高特异性强,而且操作简便、耗时短、成本低,为食品中空肠弯曲杆菌的检测提供了一种高效可靠、便捷实用的手段。

    一种提高γ-氨基丁酸产量的方法

    公开(公告)号:CN110373438B

    公开(公告)日:2021-05-04

    申请号:CN201910703126.8

    申请日:2019-07-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高γ‑氨基丁酸产量的方法,属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上ADP‑L‑甘油‑D‑甘露‑庚糖‑6‑差向异构酶RfaD基因得到重组菌WJW00后,利用WJW00进行发酵生产GABA,GABA产量达到0.6415g/L,是野生菌W3110(0.0135g/L)的47.52倍;且重组菌WJW00发酵产物中,副产物有机酸的含量均降低,如发酵24h时,丙酮酸、乙酸、乳酸的含量相对于野生菌W3110分别降低65.1%、38.9%、56.6%。本发明提供了一种新的提高GABA合成的方法,对于进一步提高GABA的合成具有十分重大的意义。

    一种能提高生产效率的无菌毛大肠杆菌的构建及应用

    公开(公告)号:CN112680393A

    公开(公告)日:2021-04-20

    申请号:CN202110053059.7

    申请日:2021-01-15

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种能提高生产效率的无菌毛大肠杆菌的构建及应用,属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上菌毛基因簇的64个基因得到突变菌WQM026,该菌株在营养缺乏的培养基中生长变快,菌体总量增多。将PHB和L‑苏氨酸合成的相关基因分别转化到菌株WQM026中,得到的重组菌WQM026/pBHR68和WQM026/pFW01‑thrA*BC‑rhtC可以分别高效合成PHB和L‑苏氨酸。合成的PHB占细胞干重的87.87%,是野生型对照菌的3.44倍。L‑苏氨酸产量为2.49g/L,是野生型对照菌的3.66倍。

    一种通过敲除鞭毛和菌毛基因高效合成PHB的方法

    公开(公告)号:CN110669709A

    公开(公告)日:2020-01-10

    申请号:CN201910701811.7

    申请日:2019-07-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种通过敲除鞭毛和菌毛基因高效合成PHB的方法,属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上三个鞭毛基因簇flhE-motA,fliY-fliR和flgN-flgL得到鞭毛精简菌株WJW010,敲除菌毛基因簇fimB-fimH得到菌毛精简菌株WJW011。随后将PHB合成的三个基因转化到菌株WJW010和WJW011中,得到重组菌WJW010/pBHR68和WJW011/pBHR68,在正常的发酵条件下即可以合成细胞干重19.2%、2.8%的PHB,PHB体积产量是野生对照菌W3110/pBHR68(2%)的9.6倍和1.4倍。

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