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公开(公告)号：CN119592546A
公开(公告)日：2025-03-11
申请号：CN202411583167.5
申请日：2024-11-07
Applicant: 北京大学宁波海洋药物研究院 , 江南大学 , 安徽泰格生物科技有限公司
IPC: C12N9/78 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N5/10 , C12P17/18 , C12P17/12 , C12P7/40 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种活性和热稳定性提高的腈水解酶突变体，属于酶工程领域。本发明通过PROSS设计工具，得到可以提高催化活性的腈水解酶突变体，酶活分别达到野生型Nit6803的300％、230％、115％、165％。此外，可以提高热稳定性的腈水解酶突变体，在50℃孵育8h后，相比于野生型Nit6803 40％的相对活性，突变体的相对酶活分别为76％、61％。因此，本发明利用此酶催化腈类物质产生羧酸类物质在工业上的应用。
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公开(公告)号：CN112680393B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202110053059.7
申请日：2021-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种能提高生产效率的无菌毛大肠杆菌的构建及应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上菌毛基因簇的64个基因得到突变菌WQM026，该菌株在营养缺乏的培养基中生长变快，菌体总量增多。将PHB和L‑苏氨酸合成的相关基因分别转化到菌株WQM026中，得到的重组菌WQM026/pBHR68和WQM026/pFW01‑thrA*BC‑rhtC可以分别高效合成PHB和L‑苏氨酸。合成的PHB占细胞干重的87.87％，是野生型对照菌的3.44倍。L‑苏氨酸产量为2.49g/L，是野生型对照菌的3.66倍。
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公开(公告)号：CN114908031A
公开(公告)日：2022-08-16
申请号：CN202210724913.2
申请日：2022-06-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株高效生产克拉酸的脂多糖结构截短的大肠杆菌菌株的构建，属于基因工程和发酵工程领域。本发明通过在脂多糖截短的大肠杆菌WQM001菌株基础之上继续删除ackA，rfbB，rfbD，rfbA，rfbC，rfbX，glf，wbbH，wbbI，wbbJ，wbbK以及wbbL基因构建得到WZM008菌株。随后通过构建pTrcS质粒过表达uppS基因，并将该质粒导入WZM008成功构建WZM008/pTrcS重组菌株。WZM008/pTrcS重组菌上罐水平达到11.68g·L‑1，是出发菌株克拉酸产量的3.54倍。且根据本发明制备得到的克拉酸，分子量可达11.4×103kDa，具备三螺旋结构。本发明首次探究了代谢途径改造对克拉酸生产的影响，为后续代谢工程改造大肠杆菌构建克拉酸高产菌株提供了新思路，同时对克拉酸的工业化生产起到了一定的促进作用。
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公开(公告)号：CN113755515B
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202111151501.6
申请日：2021-09-29
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/04 , C12N15/31 , C12N15/54 , A23L33/125 , A61K31/715 , A61P39/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种高效生产克拉酸的重组大肠杆菌及其应用，属于基因工程、发酵工程和材料科学领域。本发明通过编辑CA合成的关键基因，构建了过量生产CA的突变体；然后通过单因素和响应面法获得最优培养基，并对发酵罐中的发酵条件进行优化。采用本发明的方法制备得到的CA的产量达到19.79g/L，高于已知的最大产量(10.39g/L)，提高了90.47％。此外，对利用本发明的方法制备得到的CA进行了性质的表征，证明其具有优良的性质，如固体形态、分子量、空间结构、链构象、热学和流变学性质等。本发明中CA的高产为规模化生产和CA性质研究提供了夯实的基础，CA性质的揭示为CA的开发利用提供了坚实的理论基础。
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公开(公告)号：CN113755515A
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN202111151501.6
申请日：2021-09-29
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/04 , C12N15/31 , C12N15/54 , A23L33/125 , A61K31/715 , A61P39/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种高效生产克拉酸的重组大肠杆菌及其应用，属于基因工程、发酵工程和材料科学领域。本发明通过编辑CA合成的关键基因，构建了过量生产CA的突变体；然后通过单因素和响应面法获得最优培养基，并对发酵罐中的发酵条件进行优化。采用本发明的方法制备得到的CA的产量达到19.79g/L，高于已知的最大产量(10.39g/L)，提高了90.47％。此外，对利用本发明的方法制备得到的CA进行了性质的表征，证明其具有优良的性质，如固体形态、分子量、空间结构、链构象、热学和流变学性质等。本发明中CA的高产为规模化生产和CA性质研究提供了夯实的基础，CA性质的揭示为CA的开发利用提供了坚实的理论基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116536233A
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202310404567.4
申请日：2023-04-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种能高效生产单磷酸类脂A疫苗佐剂的重组大肠杆菌，属于基因工程和合成生物学领域。本发明敲除大肠杆菌MG1655中膜壁表层分子、磷脂和葡萄糖转运、磷酸乙醇胺修饰以及enoyl‑ACP还原酶相关的132个基因，表达类脂A修饰基因FnlpxE、SepagP和SepagL，构建了菌株MW021/pTEPL。MW021/pTEPL的生长性能大幅度提高且发酵过程中不再需要抗生物和诱导剂；在2‑L发酵罐体系中，MW021/pTEPL生长的最高OD600能达到38.54，能生产13.84g/L的干细胞和约88.99mg/L的总lipid A；总lipid A中只含有两种结构，分别为MPL和D‑MPLA。
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公开(公告)号：CN114908031B
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202210724913.2
申请日：2022-06-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株高效生产克拉酸的脂多糖结构截短的大肠杆菌菌株的构建，属于基因工程和发酵工程领域。本发明通过在脂多糖截短的大肠杆菌WQM001菌株基础之上继续删除ackA，rfbB，rfbD，rfbA，rfbC，rfbX，glf，wbbH，wbbI，wbbJ，wbbK以及wbbL基因构建得到WZM008菌株。随后通过构建pTrcS质粒过表达uppS基因，并将该质粒导入WZM008成功构建WZM008/pTrcS重组菌株。WZM008/pTrcS重组菌上罐水平达到11.68g·L‑1，是出发菌株克拉酸产量的3.54倍。且根据本发明制备得到的克拉酸，分子量可达11.4×103kDa，具备三螺旋结构。本发明首次探究了代谢途径改造对克拉酸生产的影响，为后续代谢工程改造大肠杆菌构建克拉酸高产菌株提供了新思路，同时对克拉酸的工业化生产起到了一定的促进作用。
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公开(公告)号：CN116162642A
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202310286663.3
申请日：2023-03-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产L‑苏氨酸的大肠杆菌的构建及应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明在大肠杆菌TWF001基因组中敲除菌毛合成基因簇Ycb，Yad，Yde，Yeh，Yqi，Yra，Yfc，Type1，Yhc和Sfm，得到突变菌TWK021，TWK021菌株在发酵培养基中L‑苏氨酸产量为15.75g/L，比TWF001产量提高了32.4％，并在分批补料发酵中获得了62.7g/L的L‑苏氨酸产量。本发明构建了一株稳定的高产L‑苏氨酸的大肠杆菌，发酵过程中全程不需要抗生素维持质粒存在，提供了一种提高大肠杆菌中L‑苏氨酸产量的新策略。
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公开(公告)号：CN113106049A
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202110455218.6
申请日：2021-04-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种不合成肠杆菌共同抗原和鞭毛的基因工程菌及其应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明在大肠杆菌中敲除大肠杆菌基因组上ECA和鞭毛基因簇的62个基因得到突变菌WQM021，WQM022菌株在营养缺乏(M9)培养基中生长变快，菌体总量增多。采用本发明的方法，WQM022/pBHR68的DCW，PHB浓度和转化效率进一步提高，分别达到3.03g/L，78.95％，15.78％；重组菌株WQM022/pFW01‑thrA*BC‑rhtC；该菌株每小时L‑苏氨酸产量，葡萄糖转化效率和L‑苏氨酸产量分别达到1.83g/L，11.42％，0.63g/h。
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公开(公告)号：CN112680393A
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN202110053059.7
申请日：2021-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种能提高生产效率的无菌毛大肠杆菌的构建及应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上菌毛基因簇的64个基因得到突变菌WQM026，该菌株在营养缺乏的培养基中生长变快，菌体总量增多。将PHB和L‑苏氨酸合成的相关基因分别转化到菌株WQM026中，得到的重组菌WQM026/pBHR68和WQM026/pFW01‑thrA*BC‑rhtC可以分别高效合成PHB和L‑苏氨酸。合成的PHB占细胞干重的87.87％，是野生型对照菌的3.44倍。L‑苏氨酸产量为2.49g/L，是野生型对照菌的3.66倍。
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