公开(公告)号：CN115184604B

公开(公告)日：2025-05-13

申请号：CN202210858142.6

申请日：2022-07-20

Applicant: 扬州大学

Inventor： 王赪胤 ,  张亚文 ,  崇辉 ,  石凤 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  王天奕

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明涉及检测技术领域内一种自驱动自传感悬臂梁传感器检测禽流感病毒H9的方法，本发明包括带有氨基官能团的纳米材料修饰的微悬臂传感器、电信号放大器、模数转化器，带有氨基官能团的纳米材料为UiO‑66‑NH2的金属有机框架，UiO‑66‑NH2的金属有机框架为UiO‑66‑NH2/AuNPs纳米材料，其制备方法为：将微悬臂传感器用UiO‑66‑NH2/AuNPs纳米材料修饰；将修饰过的微悬臂传感器与自制电路板、模数转换器、开发板连接，构成检测装置。并将装置与电脑进行连接进行信号处理；在悬臂传感器检测端滴加H9标准溶液，通过收集电信号进行分析结果，本发明快速检测、操作方便。

公开(公告)号：CN117384865A

公开(公告)日：2024-01-12

申请号：CN202311341861.1

申请日：2023-10-17

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  谢泉 ,  袁雅琴 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  万志敏 ,  李拓凡

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/34 ,  C12N15/861 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas9技术的表达血清8a型禽腺病毒的Fiber蛋白的重组血清4型禽腺病毒及其制备方法，其主体为野生型血清4型禽腺病毒SD株；所述血清8a型禽腺病毒的Fiber蛋白，其序列如SEQ ID NO.1所示；所述重组血清4型禽腺病毒，其中使用血清8a型禽腺病毒Fiber基因替换血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因，替换的是血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因的19位核苷酸到1440位核苷酸，FAdV‑4的Fiber‑2序列如SEQ ID NO.2所示。通过本发明，利用当下流行的FAdV‑4毒株作为载体，将FAdV‑4的毒力基因Fiber‑2替换为FAdV‑8a的保护性抗原Fiber基因，获得高度致弱的表达FAdV‑8a的Fiber蛋白的重组FAdV‑4，为防控FAdV‑4和FAdV‑8a提供生物材料和技术支撑。

公开(公告)号：CN116970575A

公开(公告)日：2023-10-31

申请号：CN202310903552.2

申请日：2023-07-22

Applicant: 扬州大学

Inventor： 万志敏 ,  李亚锋 ,  龚简汐 ,  赵喆泓 ,  姜文杰 ,  汤婷 ,  叶建强 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  李拓凡 ,  谢泉

IPC: C12N7/01 ,  C12N7/02 ,  C12N15/861 ,  C12N15/34 ,  C12N15/44 ,  C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  A61K39/145 ,  A61K39/235 ,  A61K39/295 ,  A61P31/16 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas9技术表达H7N9禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒及其的制备方法，H7N9禽流感病毒HA蛋白序列如SEQ ID NO.1所示；所述重组血清4型禽腺病毒，其中使用H7N9禽流感病毒HA基因替换血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因，替换的是血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因的253位核苷酸到1440位核苷酸。本发明的关键技术是利用CRISPR‑Cas9技术在血清4型禽腺病毒中插入H7N9禽流感病毒HA基因以及带有LoxP位点的RFP表达盒，利用RFP蛋白进行病毒的纯化，纯化完成后使用Cre重组酶敲除RFP表达盒，最后获得可以稳定表达H7N9禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒。本发明构建的表达H7N9禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒，为制备血清4型禽腺病毒和H7N9禽流感病毒二联疫苗奠定了基础。

公开(公告)号：CN116855459A

公开(公告)日：2023-10-10

申请号：CN202310309128.5

申请日：2023-03-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 巢逸飞 ,  叶建强 ,  汤也 ,  谢泉 ,  刘时 ,  郭艺文 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  万志敏 ,  李拓凡

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/45 ,  C12N15/861 ,  C12N15/65 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas9技术的表达新城疫病毒La Sota毒株HN蛋白的重组血清4型禽腺病毒及其制备方法，所述新城疫病毒La Sota毒株HN蛋白，序列如SEQ ID NO.1所示。所述重组血清4型禽腺病毒，其中使用新城疫病毒La Sota毒株HN基因替换FAdV‑4的Fiber‑2基因，替换的是FAdV‑4的Fiber‑2基因的253位核苷酸到1440位核苷酸，FAdV‑4的Fiber‑2基因序列如SEQ ID NO.2所示。通过本发明，利用当下流行的血清4型禽腺病毒作为载体插入新城疫病毒HN基因，成功获得新城疫病毒HN蛋白的重组血清4型禽腺病毒，为同时免疫防控血清4型禽腺病毒和新城疫病毒提供技术支撑和弱毒二联疫苗候选。

公开(公告)号：CN116593697A

公开(公告)日：2023-08-15

申请号：CN202310386227.3

申请日：2023-04-11

Applicant: 扬州大学

Inventor： 钱琨 ,  宋睿 ,  钱昊天 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  叶建强

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  G01N33/58 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测Ⅱ型鸡星状病毒抗体的ELISA试剂盒及制备方法，运用感染Ⅱ型鸡星状病毒的LMH细胞进行Cell‑ELISA实验，进行Ⅱ型鸡星状病毒抗体的检测。该方法与新城疫病毒、禽流感病毒、鸡传染性贫血病毒、禽白血病毒、马立克病毒、鸡传染性法氏囊病毒的阳性血清无交叉反应性，说明该方法具有良好的特异性。利用全病毒感染的Cell‑ELISA方法检测待检鸡血清样品，并组装成用于测定血清中鸡星状病毒抗体的试剂盒。该试剂盒可用于Ⅱ型鸡星状病毒感染血清学诊断以及抗体的水平的监测、流行病学调查等，为Ⅱ型鸡星状病毒防制提供一种新型有效的检测手段。

公开(公告)号：CN111217916B

公开(公告)日：2023-08-01

申请号：CN202010039900.2

申请日：2020-01-15

Applicant: 扬州大学

Inventor： 金文杰 ,  宁晨 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  钱琨 ,  黄晓星 ,  王加圆 ,  王倩倩 ,  郑建高 ,  王建 ,  王姣 ,  邓建中 ,  王秋生 ,  洪枫

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/866 ,  C12N7/01 ,  A61K39/295 ,  A61K39/215 ,  A61K39/225 ,  A61K39/15 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明涉及猪三种致腹泻病毒中和抗原表位融合蛋白重构体及其制备方法和应用。所述猪三种致腹泻病毒PEDV、TGEV、PoRV的中和抗原表位融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。编码该中和抗原表位融合蛋白的基因序列如SEQ ID NO.1所示。本发明分别选取PEDV、TGEV、PoRV的主要中和抗原表位基因并进行拼接，而后通过重组杆状病毒真核表达系统对串联基因进行融合蛋白表达。将表达串联基因融合蛋白的重组病毒通过腹腔注射的方式免疫小鼠，可诱导机体产生免疫应答，具有较强的免疫原性。本发明为预防PEDV、TGEV、PoRV感染提供了一种新的方法，也为猪腹泻病毒新型疫苗的开发奠定了基础。

公开(公告)号：CN115820638B

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202211207679.2

申请日：2022-09-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 金文杰 ,  钱金涵 ,  朱亭帆 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  羊扬 ,  闫彩虹 ,  叶建强 ,  钱琨 ,  王倩倩 ,  邓建中 ,  王建 ,  郑建高 ,  金松 ,  洪枫 ,  王培永 ,  张文成 ,  卞红春

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  A61K31/713 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供了一种抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制的外源性人工miRNA及其应用，涉及基因工程技术领域。本发明提供了一种抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制的外源性人工miRNA，是针对水禽源ARV的L2基因保守序列设计得到。经试验证实可知，所述外源性人工miRNA不仅能够抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制及增殖，而且能够作为一种新的基因治疗手段，应用于抗水禽源禽呼肠孤病毒新型药物的研制，同时也可以用于水禽源禽呼肠孤病毒致病机制的研究以及转基因动物的制备，从而减少水禽源禽呼肠孤病毒对养禽业造成的经济损失。

公开(公告)号：CN116426489A

公开(公告)日：2023-07-14

申请号：CN202310320468.8

申请日：2023-03-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 蒋蕙如 ,  叶建强 ,  任丹 ,  曹旭东 ,  郭艺文 ,  李涵 ,  殷楠 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  钱琨 ,  万志敏 ,  李拓凡

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/861 ,  C12N15/40 ,  C12N15/65 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas9技术的表达新型鹅星状病毒ORF2蛋白C端的重组血清4型禽腺病毒及其制备方法，所述新型鹅星状病毒GD毒株ORF2蛋白C端，其序列如SEQ ID NO.1所示。重组血清4型禽腺病毒，其中使用新型鹅星状病毒GD毒株ORF2蛋白C端替换FAdV‑4的Fiber‑2基因的253位核苷酸到1440位核苷酸，FAdV‑4的Fiber‑2基因序列如SEQ ID NO.2所示。通过本发明，利用当下流行的血清4型禽腺病毒作为载体插入新型鹅星状病毒ORF2蛋白C端，成功获得表达新型鹅星状病毒ORF2蛋白C端的重组血清4型禽腺病毒，为同时免疫防控血清4型禽腺病毒和新型鹅星状病毒提供了技术支撑与二联弱毒疫苗候选。

公开(公告)号：CN116286989A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310132143.7

申请日：2023-02-20

Applicant: 扬州大学

Inventor： 邵红霞 ,  唐浩洋 ,  吉李飞 ,  秦爱建 ,  金文杰 ,  钱琨 ,  叶建强

IPC: C12N15/866 ,  C12N15/64 ,  C12N15/35

Abstract: 本发明涉及一种表达鹅细小病毒VP3蛋白的重组杆状病毒的构建方法，属于生物技术领域；包括以下步骤：（1）构建GPV‑VP3基因重组杆状病毒表达载体。（2）表达重组GPV蛋白的杆状病毒包装和传代。（3）将带有GPV‑VP3基因的重组杆状病毒质粒转染sf9，28℃培养5‑7天，待70%细胞出现病变时收集细胞裂解上清，作为第一代重组杆状病毒种毒并保存，之后进行病毒传代，传至第三代时扩大培养。本发明所述的鹅细小病毒VP3蛋白利用杆状病毒载体表达，表达量高且带有易于纯化的His标签，可以制备成GPV亚单位疫苗，也可以建立基于VP3蛋白的鹅细小病毒间接免疫荧光方法。

公开(公告)号：CN115786282A

公开(公告)日：2023-03-14

申请号：CN202211600743.3

申请日：2022-12-12

Applicant: 扬州大学

Inventor： 郭艺文 ,  邵红霞 ,  林昀 ,  叶建强 ,  谢泉 ,  张雯苑 ,  秦爱建 ,  万志敏 ,  李拓凡

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/34 ,  C12N15/861 ,  C12N15/65 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种表达鸭3型腺病毒Fiber‑2蛋白的重组血清4型禽腺病毒的构建，构建方法包括以下步骤：设计针对血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因的sgRNA；通过PCR和同源重组的方法构建携带鸭3型腺病毒Fiber‑2基因和RFP表达盒的供体质粒，其中的RFP表达盒两端分别带有LoxP位点；将生长良好的LMH细胞经胰酶消化后接种六孔板培养，第二天转染sgRNA和供体质粒各3μg，转染6h后换成细胞生长液；转染48h后感染血清4型禽腺病毒，感染2h后换成细胞维持液；感染血清4型禽腺病毒后观察RFP红色荧光，进行红色荧光重组病毒的纯化，获得带有RFP表达盒的表达鸭3型腺病毒Fiber‑2蛋白的重组血清4型禽腺病毒。通过本发明，为构建鸭3型腺病毒和血清4型禽腺病毒的二价疫苗提供了技术支撑。