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公开(公告)号:CN116751264A
公开(公告)日:2023-09-15
申请号:CN202310647268.3
申请日:2023-05-30
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/065 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种重组蛋白,其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,本发明还公开了该重组蛋白的制备方法及其在制备牛结节性皮肤病病毒(LSDV)鉴别诊断试剂盒中的应用,属于分子生物学领域。本发明用5个柔性肽串联6个LSDV的特异性片段,克隆融合基因并表达得到该重组蛋白,分子量为18kDa。经验证,该蛋白与LSDV自然感染的阳性血清抗体有很强的反应原性,能用于鉴别诊断山羊痘弱毒疫苗免疫和自然感染LSDV的血清,并且还具有敏感性强、特异性好等优点。本发明为LSDV的血清学检测和防控提供了高价值工具,弥补了国内外鉴别诊断LSDV的空白。
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公开(公告)号:CN115960184A
公开(公告)日:2023-04-14
申请号:CN202211187275.1
申请日:2022-09-28
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/285 , C07K16/12 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , A61K39/40 , A61P31/04 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica)A6血清型白细胞毒素抗原蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还公开了一种溶血性曼氏杆菌A6血清型白细胞毒素单克隆抗体,它是由保藏编号为CCTCC NO:C2022206的杂交瘤细胞株5D12产生的。该单克隆抗体能与牛溶血性曼氏杆菌A1和A6血清型LKT蛋白发生特异性反应,而且具有中和作用。因此不仅可用于制备LKT毒素蛋白的检测试剂盒,还可用于制备抗溶血性曼氏杆菌的药物,进而在溶血性曼氏杆菌感染疾病的防控中发挥重要作用。
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公开(公告)号:CN115404194A
公开(公告)日:2022-11-29
申请号:CN202210416931.4
申请日:2022-04-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一株牛支原体基因突变株,命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T8.66,保藏在中国典型培养物保藏中心保藏,保藏编号为CCTCC NO:M 2022259,发生突变的基因是核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的Mbov_0725基因。T8.66突变株相比野生株和回补株对EBL和MAC‑T细胞的黏附能力下降,由于上皮细胞黏附是牛支原体毒力因素的重要表型之一,因此该毒力致弱菌株在牛支原体疫苗的制备中发挥重要作用,在牛支原体致病机制研究中也具有潜在应用价值。
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公开(公告)号:CN113308577B
公开(公告)日:2022-10-18
申请号:CN202110650339.6
申请日:2021-06-10
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的可视化快速核酸检测方法,该方法针对牛结节性皮肤病病毒的orf068基因设计RPA引物并进行扩增,然后向扩增产物中加入Cas12a蛋白并进行酶切反应,反应体系包括Cas12a蛋白、sgRNA和核酸探针,即可对核酸探针发出的信号进行检测。本发明检测orf068质粒的灵敏度是5copies/μL,检测LSDV和山羊痘病毒(GTPV)的灵敏度均为0.1TCID50/μL,检测临床样本的诊断敏感性为96.3%(95%CI:81.0%,99.9%),且特异性高,眼观颜色变化判断结果,具有简便、快速和适合现场检测等优点。
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公开(公告)号:CN114752594A
公开(公告)日:2022-07-15
申请号:CN202210549786.7
申请日:2022-05-20
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/11 , C12Q1/689 , C12Q1/6893 , C12Q1/6851 , C12R1/42 , C12R1/90
Abstract: 本发明公开一种多重实时荧光定量PCR引物和探针组合,它由两组分别针对沙门氏菌InvA基因、隐孢子虫18SrRNA基因设计的引物和探针组成,本发明还公开了含有该引物和探针组合的试剂盒以及检测方法。本发明实现了沙门氏菌和隐孢子虫的双重实时荧光定量PCR检测,此方法快速、准确、特异性和灵敏性高,可以同时实现对沙门氏菌和隐孢子虫的定性和准确定量检测。
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公开(公告)号:CN113249503B
公开(公告)日:2022-06-28
申请号:CN202110562325.9
申请日:2021-05-21
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了用于检测溶血性曼氏杆菌的LAMP引物组,该引物组能够特异性扩增溶血性曼氏杆菌的lktC基因,所述引物组包括2条内引物、2条外引物和1条环引物,各引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1‑5所示。本发明还公开了基于所述LAMP引物组建立的溶血性曼氏杆菌非诊断目的检测方法,该方法可根据颜色变化进行结果判定,不依赖于复杂的仪器,具有反应时间短,操作简单,检测敏感性、特异性高等优点。
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公开(公告)号:CN114657273A
公开(公告)日:2022-06-24
申请号:CN202210484565.6
申请日:2022-05-06
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测多种牛乳腺炎病原的引物对和探针组合,所述引物对和探针分别针对金黄色葡萄球菌rpoB基因、链球菌tuf基因、牛支原体oppD/F基因、产色葡萄球菌sodA基因、大肠杆菌79号基因,序列如SEQ ID NO:1‑15所示。本发明公开的引物对和探针组合能够对临床奶样或其它样本中的金黄色葡萄球菌、链球菌(无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌)、牛支原体、产色葡萄球菌、大肠杆菌同时进行检测,不仅能提高检测效率,而且还具有较高的灵敏度和特异性。
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公开(公告)号:CN112301041B
公开(公告)日:2022-05-24
申请号:CN202011073306.1
申请日:2020-10-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/31 , C12N15/10 , C07K14/30 , C07K16/12 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了牛支原体Mbov_0461基因及其编码的蛋白,属于动物传染病防治与生物技术领域。申请人以牛支原体(M.bovis)HB0801株为模板,设计引物,克隆和表达了Mbov_0461基因编码的蛋白P21,验证其具有免疫原性和反应原性,此外,该蛋白还可黏附胚胎牛肺上皮细胞(EBL)以及与纤连蛋白(Fn)结合,确定该蛋白是一种黏附蛋白,并且抗重组蛋白P21(rP21)的多克隆抗体能明显抑制M.bovis黏附EBL细胞,黏附功能与细菌毒力相关,因此M.bovis P21蛋白也是一种毒力相关蛋白。鉴于以上特性,P21蛋白有望成为M.bovis疫苗、诊断和治疗制剂研发的重要候选靶标。
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公开(公告)号:CN111635880B
公开(公告)日:2021-12-07
申请号:CN202010372788.4
申请日:2020-05-06
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体VspX基因突变株,命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T8.101,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 20191038,所述VspX基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明还公开了该突变株的构建方法及其在牛支原体致病机制和免疫防控领域中的应用。该突变株不表达突变基因编码的蛋白,生长曲线、菌落形态和大小与野生菌株无明显差异。但对牛肺上皮细胞系和纤连蛋白的结合能力却显著下降,有作为毒力致弱菌株在牛支原体致病机制研究和防制药物研发领域应用的潜力。
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公开(公告)号:CN111705026B
公开(公告)日:2021-11-26
申请号:CN202010491009.2
申请日:2020-06-02
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体Mbov_0280基因突变株,属于动物传染病防治技术领域,所述突变株命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T9.297,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2020085,所述Mbov_0280基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。该菌株相比野生菌株HB0801诱导宿主巨噬细胞凋亡的能力减弱,鉴于牛巨噬细胞作为宿主抵抗病原感染的重要免疫细胞,该突变株具有更低的毒力,同时有助于机体抵抗牛支原体感染,从而可望在牛支原体免疫防治领域发挥重要作用。
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