一种实现染色体定点遗传重组的方法

    公开(公告)号:CN112226456B

    公开(公告)日:2022-08-05

    申请号:CN201910572754.7

    申请日:2019-06-28

    Abstract: 本发明公开了一种在染色体上定点产生遗传重组的方法。该方法通过敲除/RNAi等方法使得生物体减数分裂过程中DSB产生相关蛋白的功能受到阻碍,同时以减数分裂时期特异表达基因的启动子驱动产生DSB的外源蛋白表达,在染色体上特异位点产生DSB,通过生物体自身修复机制发展成CO,实现定点遗传重组。本发明尤其能够在重组冷点、盲点等引入遗传重组,打破基因之间的强连锁,加速优良性状聚合,剔除不利性状,使得育种过程更加高效,对于生物新品种培育有重大的应用价值。

    一种实现染色体定点遗传重组的方法

    公开(公告)号:CN112226456A

    公开(公告)日:2021-01-15

    申请号:CN201910572754.7

    申请日:2019-06-28

    Abstract: 本发明公开了一种在染色体上定点产生遗传重组的方法。该方法通过敲除/RNAi等方法使得生物体减数分裂过程中DSB产生相关蛋白的功能受到阻碍,同时以减数分裂时期特异表达基因的启动子驱动产生DSB的外源蛋白表达,在染色体上特异位点产生DSB,通过生物体自身修复机制发展成CO,实现定点遗传重组。本发明尤其能够在重组冷点、盲点等引入遗传重组,打破基因之间的强连锁,加速优良性状聚合,剔除不利性状,使得育种过程更加高效,对于生物新品种培育有重大的应用价值。

    群体遗传进化图谱及其构建方法

    公开(公告)号:CN110910959A

    公开(公告)日:2020-03-24

    申请号:CN201911068002.3

    申请日:2019-11-04

    Abstract: 本发明提供了一种群体遗传进化图谱及其构建方法。该构建方法包括选择重组冷点区域;利用重组冷点区域的SNP位点构建系统进化树;对系统进化树进行聚类分析,确定物种之间的演化关系,从而获得群体遗传进化图谱。通过选取重组冷点区域(如着丝粒区域)的SNP位点进行系统进化树的构建,一方面由于重组发生率低,在亲本与子代之间稳定遗传,因而遗传进化关系明确,使得构建的系统进化树更准确,另一方面所选用的序列中SNP位点的数量相比全基因组序列的少,又较单倍型分析法中的SNP位点多和全面。因而,能够实现快速准确地构建系统进化树。

    筛选基因编辑产物的方法
    34.
    发明授权

    公开(公告)号:CN106319045B

    公开(公告)日:2020-01-31

    申请号:CN201610695151.2

    申请日:2016-08-19

    Abstract: 本发明公开了一种ACT‑PCR筛选基因编辑产物的方法,包括如下步骤:1)、提取野生型及待测样品的基因组DNA;2)、设计引物:使正向引物FA的3’末端跨过基因编辑拟切割位点;反向引物RA是以目标基因的基因组序列为参照,位于互补链的下游,反向引物RA的Tm值不低于正向引物FA;3)、获得最大临界退火温度Tam和最小临界退火温度Tlm;4)、利用引物对FA/RA以基因组DNA为模板、设定退火温为Tlm

    一种利用植物杂种优势的方法

    公开(公告)号:CN109943585A

    公开(公告)日:2019-06-28

    申请号:CN201811205889.1

    申请日:2018-10-16

    Inventor: 王克剑 王春

    Abstract: 本发明公开了一种利用植物杂种优势的方法。该方法包括以下步骤:S1,利用基因突变或基因工程技术将杂交种的生殖细胞的减数分裂转变为类似有丝分裂从而得到与杂交种基因型和染色体倍性一致的配子;以及S2,诱导配子发育成种子或植株。应用本发明的技术方案,杂交种可产生与自身基因型和染色体倍性完全一致的克隆种子或植株,使杂种优势可以被长期利用,解决之前在利用杂种优势中由于花期不一致等原因导致亲本间杂交困难、制种产量低、杂交种成本高等问题。

    植物多基因敲除载体的构建及应用

    公开(公告)号:CN105112435B

    公开(公告)日:2018-11-27

    申请号:CN201510485573.2

    申请日:2015-08-09

    Abstract: 本发明公开了一种植物多基因敲除载体的构建及应用,包括如下步骤:1)、双元表达载体pC1300‑Cas9的构建;2)、中间载体SK‑gRNA的构建;3)、单个目的gRNA的构建;4)、多个gRNA的串联及最终双元表达载体的构建。本发明利用同尾酶连接的方法将多个gRNA序列连接至已有Cas9序列的双元表达载体上,进而通过农杆菌侵染的转基因技术获得植物多突变体。利用这种同尾酶连接的构建策略,可以组合多个gRNA,通过一次转基因就可获得植物多突变体,从而建立了一种高效、便捷制备植物多突变体的方法。

    获得无标记转基因植物的方法

    公开(公告)号:CN108753813A

    公开(公告)日:2018-11-06

    申请号:CN201810590142.6

    申请日:2018-06-08

    Inventor: 王克剑 王俊杰

    CPC classification number: C12N15/8213 C12N9/22

    Abstract: 本发明公开了一种获得无标记转基因植物的方法。该方法通过CRISPR/Cas9或CRISPR/Cpf1系统实现,CRISPR/Cas9或CRISPR/Cpf1系统的载体中包含基因编辑蛋白基因、靶向载体自身的sgRNA和特异时空表达基因启动子,特异时空表达基因启动子在愈伤组织时期不表达,待完成遗传转化后表达基因编辑蛋白基因。应用本发明的技术方案,操作简单,主要针对农作物或经济植物,尤其是多年生,无性繁殖的植物,通过剪切载体本身,产生大片段转基因成分的丢失,意义重大。

    一种高效选育抗病虫水稻新品种的方法

    公开(公告)号:CN118421822A

    公开(公告)日:2024-08-02

    申请号:CN202410527511.2

    申请日:2024-04-29

    Abstract: 本发明涉及水稻育种技术领域,公开了一种高效选育抗病虫水稻新品种的方法,包括:采用Hi‑TOM引物组I对待测水稻群体DNA提取物中的Pi2、Pigm、Xa23和Bph30进行第一轮PCR;采用Hi‑TOM引物组II和Hi‑TOM引物组III对第一轮PCR产物进行第二轮PCR,对第二轮PCR产物进行测序;采用Hi‑TOM工具分析测序结果,确定待测水稻群体中每株水稻内Pi2‑T/G、Pigm‑G/A、Xa23‑G/A和Bph30‑G/A基因的存在情况,筛选出潜在的抗病虫水稻品种。采用本发明的方法,能够较为准确地筛选出潜在的抗病虫水稻品种,大大缩小后续复筛的范围,并有效加快抗病虫水稻的选育。

    一种利用基因编辑技术固定水稻杂种优势的方法

    公开(公告)号:CN118360330A

    公开(公告)日:2024-07-19

    申请号:CN202410798459.4

    申请日:2024-06-20

    Inventor: 王克剑 熊杰

    Abstract: 本发明属于生物技术和植物育种领域,具体涉及一种利用基因编辑创制无融合生殖体系,从而固定水稻杂种优势的方法。本发明的技术方案主要分为载体构建、遗传转化、倍性与基因型鉴定和结果检测步骤。本发明提供的技术是通过基因编辑手段直接敲除水稻四个内源基因从而获得了高结实率的水稻无融合生殖体系,为水稻无融合生殖体系构建提供了新的思路;更为水稻无融合生殖固定杂种优势提供了新的解决方案,可较大提升农业生产的效率和质量,具有一定的经济价值和广阔的应用前景。

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