一株解淀粉芽孢杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN113512513A

    公开(公告)日:2021-10-19

    申请号:CN202110737301.2

    申请日:2021-06-30

    Abstract: 本发明公开了一株解淀粉芽孢杆菌及其应用,属于生物技术领域。本发明提供了一株产胞外蛋白能力和淀粉能力强的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)BA‑HS;将此菌株接种至发酵培养基中发酵,即可使发酵上清淀粉酶的表达量高达60U/mL;以此菌株为宿主表达编码1,4‑α‑葡聚糖分支酶的基因构建得到的重组菌接种至发酵培养基中发酵,可得发酵上清中1,4‑α‑葡聚糖分支酶的酶活最高达300U/mL。本发明方法在自然界筛选出解淀粉芽孢杆菌,根据特性分析找到淀粉酶和蛋白酶较高的菌株,针对性地探索野生解淀粉芽孢杆菌的电转条件,并对其进行优化,从而提高转化效率并成功表达异源蛋白。

    蛋白质谷氨酰胺酶酶原在枯草芽孢杆菌中的表达和自加工

    公开(公告)号:CN111434770A

    公开(公告)日:2020-07-21

    申请号:CN201910025466.X

    申请日:2019-01-11

    Abstract: 本发明公开了一种利用枯草芽孢杆菌生产蛋白质谷氨酰胺酶的方法,属于生物工程技术领域。本发明方法针对枯草芽孢杆菌进行密码子优化,得到适于在枯草芽胞杆菌表达系统表达的蛋白质谷氨酰胺酶前体物(pro-PG)基因片段,将该基因片段与表达载体pHT43连接,构建重组载体pHT43-pp,并将其转化入枯草芽孢杆菌中形成重组枯草芽孢杆菌,经乳糖等诱导剂诱导发酵,在自身发酵体系中,不需要添加任何外源蛋白酶的条件下,生成具有活性的成熟蛋白质谷氨酰胺酶即mPG。本发明包括以下优点:开发了利用枯草芽孢杆菌表达pro-PG的方法;开发了利用枯草芽孢杆菌表达体系对pro-PG进行自加工的方法,而不需要外源蛋白酶的添加,可以高效快速且定向地产生mPG,且酶活性较高,适宜工业化生产。

    一种提高可得然胶高产菌株筛选效率的方法

    公开(公告)号:CN110004140A

    公开(公告)日:2019-07-12

    申请号:CN201910139421.5

    申请日:2019-02-25

    Abstract: 本发明涉及一种提高可得然胶高产菌株筛选效率的方法,属于微生物育种技术领域,主要包括以下步骤:(1)产可得然胶出发菌株的培养;(2)出发菌株的NTG诱变;(3)配制苯胺蓝平板筛选培养基;(4)在苯胺蓝筛选培养基中加入NaI和NaIO3;(5)诱变菌液在苯胺蓝和NaI和NaIO3双筛选平板培养基上的初筛;(6)50mL/250mL摇瓶发酵复筛,根据测定粗产量筛选高产菌株;(7)75mL/500mL摇瓶发酵二次复筛,根据测定可得然胶产量筛选高产菌株。本发明方法在平板筛选培养基中添加化学药物NaI和NaIO3,利用其在酸性环境下产生碘单质杀死产酸细菌的原理,增大了筛选得到高产可得然胶菌株的几率,提高了平板筛菌效率,缩短了筛菌周期。

    一种重组枯草芽孢杆菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN103421725A

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201210157729.0

    申请日:2012-05-21

    Abstract: 一种重组枯草芽孢杆菌及其构建方法与应用。本发明公开一种含有透明颤菌血红蛋白基因vgb的枯草芽孢杆菌,能够产生γ-聚谷氨酸。本发明还公开了通过电转化方法将含有所述血红蛋白基因vgb片段的重组质粒转入枯草芽孢杆菌中,得到含有血红蛋白基因vgb及能够表达γ-聚谷氨酸的重组枯草芽孢杆菌。本发明重组枯草芽孢杆菌可实现在培养基粘度大、溶氧低条件下进行高产量生产γ-聚谷氨酸,解决γ-聚谷氨酸在大规模生产过程中要求高溶氧的问题,有效降低生产成本。

    一种Exendin-4衍生物及其固相化学合成

    公开(公告)号:CN101463078B

    公开(公告)日:2011-07-27

    申请号:CN200910045187.6

    申请日:2009-01-12

    Abstract: 一种具有Exendin-4活性的Exendin-4衍生物及其制备和应用,属于生物工程技术领域。该衍生物的分子结构式为以下任何一种结构:Exendin-4(1-39)-Xaa40(Seq ID No.2),Exendin-4(1-39)-Xaa40-Xaa41(Seq ID No.3),Exendin-4(1-39)-Xaa40-Xaa41-Xaa42(Seq ID No.4),Exendin-4(1-30)-Xaa31(SeqID No.6),Exendin-4(1-30)-Xaa31-Xaa32(Seq ID No.7),和/或Exendin-4(1-30)-Xaa31-Xaa32-Xaa33(Seq ID No.8),其中Xaa40,Xaa41,Xaa42,Xaa31,Xaa32和Xaa33分别是Cys,Ala,Gly,His,Ser和Thr中的任何一个氨基酸。本发明Exendin-4衍生物具有长于Exendin-4体内药效时间的优点。本发明采用固相化学合成制备Exendin-4衍生物,生产步骤少,生产成本低。本发明Exendin-4衍生物特别适合于作为制备治疗糖尿病的药物中的活性成分。

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