对微量蛋白或多肽溶液同步富集、脱盐并进行鉴定的方法

    公开(公告)号:CN100374858C

    公开(公告)日:2008-03-12

    申请号:CN200610025276.0

    申请日:2006-03-30

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属生化分析鉴定技术领域,具体为一种对微量蛋白或多肽溶液同步富集、脱盐并直接进行鉴定的方法。该方法以氧化硅纳米粒子作为吸附剂,对蛋白质以及蛋白质酶解多肽进行高效吸附,并能克服高浓度盐的干扰。由于氧化硅纳米粒子与MALDI-MS有很好的相容性,被吸附的样品无需洗脱步骤可直接进行MALDI-TOF/MS分析,操作简单,避免了洗脱过程带来的样品损失。本发明可克服4M氯化钠或8M尿素对质谱的干扰,对蛋白的富集效率可达100倍。

    一种可换芯式微流控芯片蛋白酶解反应器

    公开(公告)号:CN101096636A

    公开(公告)日:2008-01-02

    申请号:CN200710044001.6

    申请日:2007-07-19

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于微流控芯片技术领域,具体为一种可换芯式微流控芯片蛋白酶解反应器及其制备方法。该反应器由具有双尖端单通道的微流控芯片和固定有蛋白酶的玻璃纤维(即酶芯)组成,其中,酶芯贯穿芯片的微流通道并从两尖端穿出。酶芯由玻璃纤维通过浸涂方式在表面修饰壳聚糖膜等,然后通过吸附、包埋或共价键合等技术将蛋白酶固定在玻璃纤维表面而获得。使用前,将该玻璃纤维酶芯插入微流控芯片的微通道中,即得可换芯式微流控芯片酶反应器。本发明中,玻璃纤维酶芯价格低廉,可以根据需要更换,从而提高了芯片和酶试剂的使用效率,降低了酶法测定的成本。本发明制作的反应器在临床诊断、环境监测、生命科学研究和食品分析等领域有良好的应用前景。

    热休克蛋白27在制备血清学判别、诊断肝癌药物中的用途

    公开(公告)号:CN1851461A

    公开(公告)日:2006-10-25

    申请号:CN200510025340.0

    申请日:2005-04-22

    Abstract: 本发明属生物技术领域,涉及一种热休克蛋白27的医用用途,本发明应用蛋白质组学的方法,对动物模型实验,结果表明HSP27高表达;免疫组织化学检测结果显示HSP27定位于肝细胞胞浆内,验证了其表达水平的高低与肝癌转移潜能相关;血清蛋白质组学研究发现,在差异性蛋白质中,HSP27为肝癌特有;血清的Western Blot鉴定结果显示HCC病人血清有较强的HSP27(100%,20/20);血清双盲法验证,正常人血清不显示HSP27(0/10),HCC患者阳性率为100%(30/30)。结果证实,血清HSP27蛋白可成为有应用价值的测定肝癌及其转移的标志物蛋白。可用于制备包括AFP阴性HCC及其转移的预测和诊断药物。

    一种线性离子阱-飞行时间质谱分析仪器

    公开(公告)号:CN1832101A

    公开(公告)日:2006-09-13

    申请号:CN200610025006.X

    申请日:2006-03-23

    Applicant: 复旦大学

    Inventor: 杨芃原 清江

    Abstract: 本发明属于质谱仪器技术领域,涉及一种多级质谱分析仪器。具体而言,本发明提供了一种无接口径向引入垂直串联式的线性离子阱-飞行时间质谱分析仪器,包括离子源及传输部分、轴向引入式线性离子阱和径向串联飞行时间质谱仪。线性离子阱原有的径向引出技术被同时作为飞行时间分析器垂直引入技术,这种径向引出垂直串联的方式同时保留了线性离子阱和飞行时间分析器各自的杰出优点。径向离子推斥的设计使得线性离子阱部分不仅可做多级质谱分析,更作为离子飞行时间阶段的前极加速,补偿了离子束的空间分散和能量分散。本发明的线性离子阱-飞行时间质谱较目前市售产品而言,灵敏度和精确度都大大改善,尤其适用于生物分析、蛋白质鉴定等高精尖领域。

    一种低丰度蛋白靶上一步除盐与富集的方法

    公开(公告)号:CN1811407A

    公开(公告)日:2006-08-02

    申请号:CN200610023671.5

    申请日:2006-01-26

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明是一种通过疏水性聚合物微印迹技术与基质辅助激光解析离子化质谱联用,进行痕量蛋白或多肽的靶上一步除盐与富集的方法。微印迹的疏水性聚合物对蛋白质和多肽有很好的吸附富集效果,但是对无机盐和其他污染物吸附很少,利用固体表面液珠蒸发过程中的外流作用,被疏水性聚合物吸附的样品无需额外的洗脱除盐步骤就可实现除盐并直接进行MALDI-TOF-MS分析。本发明不仅成功实现了样品一步除盐与富集,而且具有灵敏度高、重现性好、通量高、耐盐能力强、经济和省时等特点,可广泛用于蛋白质组学领域。

    聚甲基丙烯酸甲酯微流控芯片溶剂辅助热压封装方法

    公开(公告)号:CN1645137A

    公开(公告)日:2005-07-27

    申请号:CN200510023645.8

    申请日:2005-01-27

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及一种聚甲基丙烯酸甲酯微流控芯片溶剂辅助热压封装方法。选择对聚甲基丙烯酸甲酯溶解度较小且沸点较高的有机溶剂如环戊酮和冰乙酸等为粘合剂,使用硅阳模原位聚合制作的含微流通道的聚甲基丙烯酸甲酯微流控芯片基片,将上述有机溶剂均匀滴涂在聚甲基丙烯酸甲酯盖膜上并与基片合上,置于75-85℃的烘箱中,通过两块玻璃板施加1-2牛顿/平方厘米的压力10-15分钟,冷却到室温,即得聚甲基丙烯酸甲酯微流控芯片成品。本发明方法封装成功率和封装强度均大幅提高,而且操作简便,成本较低,可用于聚甲基丙烯酸甲酯微流控芯片的大规模生产。

    痕量多肽或蛋白质富集及其直接分析方法

    公开(公告)号:CN1560625A

    公开(公告)日:2005-01-05

    申请号:CN200410016889.9

    申请日:2004-03-11

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明是一种以沸石纳米粒子作为纳米微吸附剂,进行痕量肽及蛋白样品的富集—基质辅助激光解析离子化质谱直接分析的方法。沸石纳米粒子对蛋白质和多肽有很好的吸附效果,与基质辅助激光解析离子化质谱有很好的相容性,被沸石纳米粒子吸附的样品无需样品洗脱步骤可直接进行基质辅助激光解析离子化质谱分析,操作简单,避免了洗脱过程带来的样品损失。本发明对多肽的富集效率最高可达1250倍以上,50×10-12g/μL的蛋白质酶解样品也可以通过本发明阐述的方法获得鉴定。

    纳米沸石分子筛组装材料作为亲和色谱填料分离功能蛋白质分子的方法

    公开(公告)号:CN1181341C

    公开(公告)日:2004-12-22

    申请号:CN03115232.5

    申请日:2003-01-28

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明是一种以纳米沸石分子筛组装体为新型的亲和色谱填充物,进行特定结构的功能蛋白分子分离的方法。目前尚无满意的分离功能蛋白分子的色谱分离方法。本发明以大孔-微孔多级有序的沸石结构通过离子交换过程固定过渡金属离子后,其作为亲和活性位点可同结构中具有连续组氨酸结构的功能生物大分子发生特异结合,然后通过缓冲溶液梯度洗脱,从而达到富集分离目的。该种载体具有孔道均匀,机械化学稳定性好,表面易改性,可以有效减小分离过程中的传质阻力,容易再生等优点。其中选择以硅藻土为模板,表面修饰纳米Beta沸石的分子筛材料为亲和色谱填充物,装柱后,利用不同的淋洗体系,分离功能蛋白分子得到满意的效果。

    一种疾病蛋白质生物标志物鉴定方法

    公开(公告)号:CN115112778A

    公开(公告)日:2022-09-27

    申请号:CN202110297187.6

    申请日:2021-03-19

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及一种疾病蛋白质生物标志物鉴定方法,包括以下步骤:S1、针对单一或复杂疾病筛选候选蛋白;S2、通过确认疾病靶蛋白,进而预测靶肽段以及其保留时间和可检出性;S3、通过预测靶肽段以及其保留时间和可检出性信息构建靶向蛋白组学方法列表;S4、进行靶向蛋白组学验证。与现有技术相比,本发明的方法可用于复杂疾病相关蛋白的独特性肽段筛选、保留时间预测以及可检出性信息获取,在大规模样本集中同时有效地精确测量大量候选蛋白质标志物。采用本发明的方法,一次PRM分析(60min)可同时采集300‑400条靶肽段,极大地缩短了时间成本与经济成本,说明该方法极其适用于复杂疾病成百上千候选标志物的验证工作,具有广泛适用性。

    一种常压高温离子冷却聚焦装置

    公开(公告)号:CN112185797B

    公开(公告)日:2022-04-01

    申请号:CN202011017450.3

    申请日:2020-09-24

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及一种常压高温离子冷却聚焦装置,包括:垂直于离子传输方向上由一系列环金属构成的电极阵列,为电极阵列单元提供直流、交流电压的供电装置及连接装置,用于固定电极阵列的耐高温绝缘支架,用于固定电极阵列及供电装置的金属框架。与现有技术相比,本发明结合叠环离子聚焦以及离子冷却传输的优势,能够为大气压离子源质谱提供离子引入前的高效率离子传输聚焦,降低真空接口处的离子损失,同时还可以为诸如感应耦合等离子体离子源等高温离子源气流提供降温作用。

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