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公开(公告)号:CN103276104A
公开(公告)日:2013-09-04
申请号:CN201310154212.0
申请日:2013-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN116004773A
公开(公告)日:2023-04-25
申请号:CN202211206642.8
申请日:2022-09-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种线性置换等温扩增方法及其应用。本发明的线性置换等温扩增(linear displacement isothermal amplification,LDIA)方法具体为针对模板的四种常用引物启动了LDIA的初始反应,包括一对外引物(LOF和LOR)和内引物(LIF和LIR),还可以在反应中加入加速引物(LAR),形成短序列产物。本申请的方法能在大幅度降低引物设计难度的同时,保持与其他等温扩增反应如环介导等温扩增方法等相近的敏感性和特异性。在现场检测,特别是应对复杂核酸序列时具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN103627821A
公开(公告)日:2014-03-12
申请号:CN201310632188.7
申请日:2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: Y02A50/451 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开一种检测猪传染性胃肠炎病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN103588864A
公开(公告)日:2014-02-19
申请号:CN201310633567.8
申请日:2013-11-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/18 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/70 , C12N2770/24322 , G01N33/56983 , G01N2333/183 , G01N2469/20
Abstract: 本发明公开一种猪瘟病毒C株E2截短蛋白及制备方法与应用。本发明将E2基因主要抗原区进行表达外还将维持其空间结构的三对二硫键进行同时表达,在一定程度上可使得表达蛋白有一定空间结构,更加符合天然蛋白的特点,且包涵体也利于蛋白的纯化。本发明获得的E2截短蛋白,用于建立CSFV IgG抗体ELISA检测方法,结果表明该重组蛋白具有良好的抗原性;所建立的ELISA试剂盒使用后特异、准确、敏感、重复性佳。本发明使用的底物显色液可起到指示的作用,且终止反应后的几个小时直到4度过夜后,检测结果仍具有可信度;因此本发明的显色系统可减少人为因素的影响,避免出现假阳性,使得阴性结果稳定,保证猪瘟抗体得到更好地监测。
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公开(公告)号:CN116004773B
公开(公告)日:2025-04-08
申请号:CN202211206642.8
申请日:2022-09-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种线性置换等温扩增方法及其应用。本发明的线性置换等温扩增(linear displacement isothermal amplification,LDIA)方法具体为针对模板的四种常用引物启动了LDIA的初始反应,包括一对外引物(LOF和LOR)和内引物(LIF和LIR),还可以在反应中加入加速引物(LAR),形成短序列产物。本申请的方法能在大幅度降低引物设计难度的同时,保持与其他等温扩增反应如环介导等温扩增方法等相近的敏感性和特异性。在现场检测,特别是应对复杂核酸序列时具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN115992047A
公开(公告)日:2023-04-21
申请号:CN202211206733.1
申请日:2022-09-30
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12M1/38 , C12M1/34 , C12M1/42 , C12M1/02 , C12M1/00 , C12Q1/6844 , C12Q1/689 , C12N15/11 , C12R1/42
Abstract: 本申请提出一种掌式一体化磁富集等温扩增检测设备及微生物检测方法,掌式一体化磁富集等温扩增检测设备包括扩增盒、扩增架、加热元件、光源、混匀架和磁力元件,扩增盒形成有检测腔,扩增盒开设有观察口,扩增架安放在检测腔内,扩增架包括用于容纳扩增管的第一安放孔,扩增架还包括通光孔和出光孔,通光孔和出光孔分别与第一安放孔连通,出光孔的位置与观察口相对应,加热元件安装在扩增架上,加热元件与扩增管传热连接,光源布置在检测腔内,光源与通光孔光路连接,混匀架可转动地安装在扩增盒的外侧,混匀架包括第二安放孔,磁力元件安装在扩增盒的外侧。掌式一体化磁富集等温扩增检测设备便于携带和现场使用。
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公开(公告)号:CN113214974A
公开(公告)日:2021-08-06
申请号:CN202110490627.X
申请日:2021-05-06
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高通量等温扩增一站式检测装置及使用方法,一种高通量等温扩增一站式检测装置,包括检测暗盒、摄像设备、云端存储系统和计算机系统;所述检测暗盒包括盒体,所述盒体的一侧设有第一放置面,所述盒体的与所述第一放置面相对的一侧设有第二放置面,所述第一放置面与所述第二放置面倾斜设置,所述第一放置面设有第一支架。所述高通量等温扩增一站式检测装置,可以实现LAMP检测的核酸等温扩增反应过程、样品拍摄过程和检测结果分析过程的高通量一站式检测,结构简单且体积小,检测效率高,所述高通量等温扩增一站式检测装置的使用方法,可以在短时间内实现高通量的即时检测,检测过程操作方便,检测快速。
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公开(公告)号:CN103695561B
公开(公告)日:2015-05-20
申请号:CN201310628630.9
申请日:2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:配制RT-LAMP反应体系,进行恒温反应;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN103276103A
公开(公告)日:2013-09-04
申请号:CN201310153789.X
申请日:2013-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测猪流行性腹泻病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN102399909B
公开(公告)日:2013-05-01
申请号:CN201110416855.9
申请日:2011-12-13
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP可视化试剂盒及其应用。该可视化试剂盒包含引物组和显色物质;引物为如SEQ ID NO:1~4所示的序列,显色物质为钙黄绿素和氯化锰。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、钙黄绿素、氯化锰、MgSO4、FIP引物、BIP引物组、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;接着将反应体系于61~65℃恒温反应,灭活;通过自然光照下或紫外光下判读结果或是二者结合判读:在自然光下反应产物为绿色,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒;在紫外光下反应产物呈现明显的绿色荧光,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒。
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