一种参与金银花花色变化的类胡萝卜素裂解双加氧酶编码基因的筛选鉴定及应用

    公开(公告)号:CN112239764B

    公开(公告)日:2022-07-29

    申请号:CN201910639359.6

    申请日:2019-07-16

    Abstract: 本发明涉及了与金银花花色密切相关的类胡萝卜素裂解双加氧酶LjCCD4及其编码基因与功能。本发明属于基因工程技术领域。本发明公开了金银花类胡萝卜素裂解双加氧酶LjCCD4基因的开放阅读框序列以及其编码的氨基酸序列。本发明基于金银花基因组和转录组数据筛选获得LjCCD4基因,通过构建pET32a‑LjCCD4原核表达载体,以β‑胡萝卜素和叶黄素为底物在体外鉴定LjCCD4的催化机制。LjCCD4能够催化β‑胡萝卜素和叶黄素分别生成10’‑Apo‑β‑胡萝卜素醛、β‑紫罗兰酮和3‑羟基‑10’‑Apo‑β‑胡萝卜素醛、3‑OH‑10’‑Apo‑α‑胡萝卜素醛、3‑羟基‑β‑紫罗兰酮、3‑羟基‑α‑紫罗兰酮。本发明揭示金银花中类胡萝卜素类色素降解及其花色变化的内在分子机制,为金银花的花期调控及分子育种等奠定基础。

    一种调控丹参酮生物合成的SmAP2/ERF82转录因子的筛选、鉴定及应用

    公开(公告)号:CN107699576B

    公开(公告)日:2021-08-31

    申请号:CN201710849664.9

    申请日:2017-09-20

    Abstract: 本发明公开了一条调控丹参酮合成的AP2/ERF转录因子SmAP2/ERF82的编码基因序列;本发明所提供的SmAP2/ERF82基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明构建了SmAP2/ERF82‑RNAi载体及SmAP2/ERF82‑过表达载体,通过遗传转化方法转化丹参,获得转基因毛状根,与对照株系相比,SmAP2/ERF82‑RNAi株系中二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮II A的含量显著降低,SmAP2/ERF82‑过表达株系中二氢丹参酮I、隐丹参酮的含量显著上升。本发明提供的SmAP2/ERF82具有正调控丹参酮类化合物生物合成的功能,该类化合物具有治疗心血管疾病的显著疗效。本发明创新了丹参酮合成调控分子机制的研究思路,为丹参酮的合成生物学研究奠定基础。

    参与西红花苷合成的糖基转移酶GjUGT94E13和GjUGT74F8的筛选鉴定及应用

    公开(公告)号:CN110791512A

    公开(公告)日:2020-02-14

    申请号:CN201810867889.1

    申请日:2018-08-02

    Abstract: 本发明涉及了栀子中催化西红花酸生成西红花苷的两个糖基转移酶UGTs(GjUGT94E13和GjUGT74F8)、及其二者的编码基因与功能。属于基因工程技术领域。本发明公开了栀子糖基转移酶GjUGT94E13和GjUGT74F8基因的开放阅读框序列以及其编码的氨基酸序列。本发明基于栀子基因组和转录组数据筛选获得GjUGT94E13和GjUGT74F8基因,通过构建pET32a-UGTs原核表达载体,以西红花酸为底物在体外验证GjUGT94E13和GjUGT74F8的糖基化功能。结果证明GjUGT94E13和GjUGT74F8具有催化西红花酸生成西红花苷的功能,为具有重要药用价值的西红花苷的合成生物学研究奠定基础。

    一种参与西红花酸合成的乙醛脱氢酶编码基因的筛选鉴定及应用

    公开(公告)号:CN110791510A

    公开(公告)日:2020-02-14

    申请号:CN201810867888.7

    申请日:2018-08-02

    Abstract: 本发明涉及了参与栀子西红花苷生物合成途径中西红花酸合成的乙醛脱氢酶GjALDH2C3、其编码基因及其功能。属于基因工程技术领域。本发明公开了栀子乙醛脱氢酶GjALDH2C3基因的开放阅读框序列以及其编码的氨基酸序列。本发明基于栀子基因组、转录组数据筛选获得GjALDH2C3基因,通过构建pCold-GjALDH2C3原核表达载体并诱导表达,以西红花酸二醛为底物验证GjALDH2C3蛋白的催化功能。结果证明GjALDH2C3能够高效地催化西红花酸二醛产生西红花酸,为药用活性成分西红花酸及西红花苷的生物合成途径以及合成生物学研究奠定基础。

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