公开(公告)号：CN106350510B

公开(公告)日：2019-05-10

申请号：CN201610907589.2

申请日：2016-10-17

Applicant: 哈尔滨市食品药品检验检测中心 ,  中国医学科学院药用植物研究所

Inventor： 唐先明 ,  石林春 ,  刘景波 ,  刘建辉 ,  宋经元 ,  刘金欣 ,  王洋 ,  顾佳 ,  王福宾 ,  孙志国

IPC: C12N15/10 ,  C12Q1/6806

Abstract: 本发明公开了一种快速提取哈蟆油基因组DNA的方法，包括1)取哈蟆油样品，加入Chelex‑100和蛋白酶K，先水浴保温，后高温终止，进行细胞裂解，离心后获得第一上清液；其中，Chelex‑100用于螯合所述哈蟆油样品中的非核酸有机物和使蛋白变性便于蛋白酶K进行酶解，蛋白酶K用于消化所述哈蟆油样品中的蛋白质；2)在所述第一上清液中加入酚/氯仿/异戊醇，去除残留的脂类和蛋白质；3)利用异丙醇或无水乙醇沉淀DNA。还提供了快速提取哈蟆油基因组DNA的试剂盒，以及在使用DNA条形码技术鉴定哈蟆油中的应用。本发明的提取方法能实现对干燥哈蟆油药材中基因组DNA的快速有效抽提，为DNA条形码技术得到更为广泛的应用提供基础。

公开(公告)号：CN106350510A

公开(公告)日：2017-01-25

申请号：CN201610907589.2

申请日：2016-10-17

Applicant: 哈尔滨市食品药品检验检测中心 ,  中国医学科学院药用植物研究所

Inventor： 唐先明 ,  石林春 ,  刘景波 ,  刘建辉 ,  宋经元 ,  刘金欣 ,  王洋 ,  顾佳 ,  王福宾 ,  孙志国

IPC: C12N15/10 ,  C12Q1/68

CPC classification number: C12N15/1003 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q2521/537 ,  C12Q2523/113

Abstract: 本发明公开了一种快速提取哈蟆油基因组DNA的方法，包括1)取哈蟆油样品，加入Chelex-100和蛋白酶K，先水浴保温，后高温终止，进行细胞裂解，离心后获得第一上清液；其中，Chelex-100用于螯合所述哈蟆油样品中的非核酸有机物和使蛋白变性便于蛋白酶K进行酶解，蛋白酶K用于消化所述哈蟆油样品中的蛋白质；2)在所述第一上清液中加入酚/氯仿/异戊醇，去除残留的脂类和蛋白质；3)利用异丙醇或无水乙醇沉淀DNA。还提供了快速提取哈蟆油基因组DNA的试剂盒，以及在使用DNA条形码技术鉴定哈蟆油中的应用。本发明的提取方法能实现对干燥哈蟆油药材中基因组DNA的快速有效抽提，为DNA条形码技术得到更为广泛的应用提供基础。