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公开(公告)号：CN113106051A
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202110469213.9
申请日：2021-04-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了缺失组合物基因簇在降低大肠杆菌对抗生素的耐药性中的应用，属于基因工程和生物医药领域。本发明敲除大肠杆菌W3110的核心糖基因簇gmhD‑waaQ，O‑抗原基因簇wbbL‑rmlB，胞外多糖基因簇galF‑wza，4型荚膜多糖合成基因簇yccC‑ymcD，三个鞭毛基因簇flhE‑motA、fliY‑fliR、flgN‑flgL，最终得到菌株WJW07，该菌株在LB培养基中对克林霉素和新生霉素的MIC分别为20mg/L和3mg/L，较野生对照菌W3110降低65倍和250倍，并且对一系列膜壁结构相关合成和转运基因簇的删除，使得重组菌株WJW07的生物量增加，有利于工业生产应用。
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公开(公告)号：CN110387347B
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN201910703084.8
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株大肠杆菌膜壁精简底盘菌株及其高产PHB的应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除野生型大肠杆菌W3110基因组上脂多糖的核心糖基因簇gmhD‑waaQ和O‑抗原基因簇wbbL‑rmlB，胞外多糖基因簇galF‑wza，4型荚膜多糖合成基因簇yccC‑ymcD，三个鞭毛基因簇flhE‑motA、fliY‑fliR、flgN‑flgL，和一个菌毛基因簇fimB‑fimH得到菌株WJW08，然后将PHB合成相关的基因转化到菌株中得到重组菌WJW08/pBHR68，在正常的发酵条件下该重组菌可以合成细胞干重81.9％的PHB，是野生对照菌W3110/pBHR68(1.5％)的54.6倍。
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公开(公告)号：CN110387346B
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN201910701830.X
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了缺失21个编码胞外多糖合成基因的基因工程菌及其应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明采用CRISPR/Cas9敲除系统敲除大肠杆菌W3110基因组上负责胞外多糖合成和转运的21个基因得到突变菌WJW09，采用WJW09菌株为宿主菌，利用pBHR68异源表达PHB合成基因簇phaCAB，WJW09/pBHR68合成PHB可以达到细胞干重的57.2％，而W3110/pBHR68合成的PHB仅占细胞干重的1.5％。重组菌WJW09/pBHR68的PHB体积产量高达对照菌W3110/pBHR68(1.5％)的38倍。
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公开(公告)号：CN110387347A
公开(公告)日：2019-10-29
申请号：CN201910703084.8
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株大肠杆菌膜壁精简底盘菌株及其高产PHB的应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除野生型大肠杆菌W3110基因组上脂多糖的核心糖基因簇gmhD-waaQ和O-抗原基因簇wbbL-rmlB，胞外多糖基因簇galF-wza，4型荚膜多糖合成基因簇yccC-ymcD，三个鞭毛基因簇flhE-motA、fliY-fliR、flgN-flgL，和一个菌毛基因簇fimB-fimH得到菌株WJW08，然后将PHB合成相关的基因转化到菌株中得到重组菌WJW08/pBHR68，在正常的发酵条件下该重组菌可以合成细胞干重81.9％的PHB，是野生对照菌W3110/pBHR68(1.5％)的54.6倍。
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公开(公告)号：CN110373435A
公开(公告)日：2019-10-25
申请号：CN201910701822.5
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种通过敲除rfaD基因高效合成PHB的方法，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上rfaD基因后将合成PHB的酶的编码基因转化到菌株中发酵生产PHB。发现rfaD基因的敲除可以显著改善大肠杆菌W3110、DH5α和JM109合成PHB的能力，WJW00/pDXW-8-phaCAB的PHB体积产量较对照菌W3110/pDXW-8-phaCAB提高3.95和3.66倍；WJD00/pDXW-8-phaCAB细胞合成PHB占细胞干重比例较对照菌提高约80％，转化率提高约1.9倍；WJJ00/pDXW-8-phaCAB细胞合成PHB占细胞干重比例较对照菌提高约75％，转化率提高约1.8倍。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105950517A
公开(公告)日：2016-09-21
申请号：CN201610515320.X
申请日：2016-06-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸棒杆菌及其应用，属于微生物领域。所述谷氨酸棒杆菌于2016年6月1日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2016303。该谷氨酸棒杆菌可在细胞内积累较多的丙酰辅酶A，较ATCC13869提高了15.8倍，可用于以丙酰辅酶A为底物的相关代谢产物的生产。当引入聚羟基脂肪酸酯合成基因后，该谷氨酸棒杆菌可以合成PHBV，但在ATCC13869中合成产物为PHB。该发明解决了外源添加丙酸盐或丙酸来生产PHBV的现状，实现了在谷氨酸棒杆菌中无外源添加丙酸或丙酸盐直接生产PHBV，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN113174393B
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202110468047.0
申请日：2021-04-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种改善大肠杆菌耐药性的方法及其应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上三个鞭毛基因簇flhE‑motA，fliY‑fliR和flgN‑flgL得到鞭毛精简菌株WJW010，敲除菌毛基因簇fimB‑fimH得到菌毛精简菌株WJW011。鞭毛或菌毛合成基因簇的敲除可以降低对头孢西丁的耐药性，WJW010和WJW011对头孢西丁的MIC分别是8mg/L、8mg/L，较野生对照菌W3110降低1倍；并且，敲除鞭毛基因簇或菌毛基因簇能够提升合成乙酰辅酶A和ATP水平；实验表明，WJW010和WJW011合成乙酰辅酶A和ATP水平较野生对照W3110提高。
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公开(公告)号：CN110373438B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN201910703126.8
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高γ‑氨基丁酸产量的方法，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上ADP‑L‑甘油‑D‑甘露‑庚糖‑6‑差向异构酶RfaD基因得到重组菌WJW00后，利用WJW00进行发酵生产GABA，GABA产量达到0.6415g/L，是野生菌W3110(0.0135g/L)的47.52倍；且重组菌WJW00发酵产物中，副产物有机酸的含量均降低，如发酵24h时，丙酮酸、乙酸、乳酸的含量相对于野生菌W3110分别降低65.1％、38.9％、56.6％。本发明提供了一种新的提高GABA合成的方法，对于进一步提高GABA的合成具有十分重大的意义。
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公开(公告)号：CN110317767B
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN201910599466.0
申请日：2019-07-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产苏氨酸的基因工程菌及其应用方法，属于基因工程和发酵工程领域。所述基因工程菌为TWF001/pFW01‑phaCAB，在三氯生表达质粒pFW01上过表达了phaCAB，可以在胞外合成苏氨酸，胞内合成PHB。本发明构建的菌株苏氨酸合成量大大提高，在摇瓶发酵水平产量为17.0g/L，在3‑L罐发酵水平，合成苏氨酸产量为96.4g/L，在10L罐发酵水平，合成苏氨酸产量为133.5g/L。所述基因工程菌为TWF001/pFW01‑phaCAB生长状况良好，未引入外源抗性基因序列，更有利于大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN110669709A
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201910701811.7
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种通过敲除鞭毛和菌毛基因高效合成PHB的方法，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上三个鞭毛基因簇flhE-motA，fliY-fliR和flgN-flgL得到鞭毛精简菌株WJW010，敲除菌毛基因簇fimB-fimH得到菌毛精简菌株WJW011。随后将PHB合成的三个基因转化到菌株WJW010和WJW011中，得到重组菌WJW010/pBHR68和WJW011/pBHR68，在正常的发酵条件下即可以合成细胞干重19.2％、2.8％的PHB，PHB体积产量是野生对照菌W3110/pBHR68(2％)的9.6倍和1.4倍。
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