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公开(公告)号：CN110295135B
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN201910664977.6
申请日：2019-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种改造枯草芽孢杆菌FMMs的方法及其应用，属于遗传工程技术领域。本发明通过强化固醇类似物前体合成酶——角鲨烯合酶和脚手架蛋白显著增加质膜上FMMs占比。本发明构建的重组枯草芽孢杆菌BSGFMM1‑AY与对照菌株BSGN6‑AY相比，可以更多地将N‑乙酰氨基葡萄糖合成所需的途径酶固定在FMMs中，形成底物通道，显著提高酶的催化效率。在复合培养基摇瓶发酵过程中，对照菌株BSGN6‑AY的GlcNAc滴定量仅为2.84g/L，而BSGFMM1‑AY的GlcNAc滴定量增加至8.86g/L。本发明的重组枯草芽孢杆菌构建方法简单，普适性高，便于使用，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN110295135A
公开(公告)日：2019-10-01
申请号：CN201910664977.6
申请日：2019-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种改造枯草芽孢杆菌FMMs的方法及其应用，属于遗传工程技术领域。本发明通过强化固醇类似物前体合成酶——角鲨烯合酶和脚手架蛋白显著增加质膜上FMMs占比。本发明构建的重组枯草芽孢杆菌BSGFMM1-AY与对照菌株BSGN6-AY相比，可以更多地将N-乙酰氨基葡萄糖合成所需的途径酶固定在FMMs中，形成底物通道，显著提高酶的催化效率。在复合培养基摇瓶发酵过程中，对照菌株BSGN6-AY的GlcNAc滴定量仅为2.84g/L，而BSGFMM1-AY的GlcNAc滴定量增加至8.86g/L。本发明的重组枯草芽孢杆菌构建方法简单，普适性高，便于使用，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN118186042A
公开(公告)日：2024-06-14
申请号：CN202410364729.0
申请日：2024-03-28
Applicant: 江苏集萃未来食品技术研究所有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种具有空间调控系统的酿酒酵母及促进熊果酸合成的方法。其中，首先在S.cerevisiae中利用RIAD‑RIDD和SZ1‑SZ2互作短肽，将GFP和mCherry招募定位至胞内凝聚体RGG‑(WGR‑1)2中，明确了该无膜细胞器可以实现蛋白的有效招募。进一步该将脱氧紫色杆菌素代谢途径中关键酶靶向招募定位至RGG‑(WGR‑1)2中，基于脱氧紫色杆菌素代谢途径的可视化证明了小分子能够自由扩展渗透至无膜细胞器中，验证了该无膜细胞器可以在S.cerevisiae中实现有效的代谢调控。最后，通过RIAD‑RIDD和SZ1‑SZ2互作短肽，将UA合成代谢途径中关键酶靶向招募定位至无膜细胞器RGG‑(WGR‑1)2中，对UA的代谢合成途径进行调控，为工业化应用提供了基础。
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公开(公告)号：CN114561311B
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202210313654.4
申请日：2022-03-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种胞外转运视黄醛和视黄醇的酿酒酵母菌株构建及其应用，属于发酵工程技术领域。本发明构建了一株强化视黄醛和视黄醇分泌能力的重组酿酒酵母菌株，所述重组酿酒酵母强化表达了3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶、异戊烯基焦磷酸异构酶、法尼基焦磷酸合酶、内质网大小调节因子INO2和ABC转运蛋白Pdr10；异源表达香叶基香叶基二磷酸合酶、八氢番茄红素脱氢酶、15‑顺式八氢番茄红素合酶、双功能番茄红素环化酶/八氢番茄红素合酶、15、15’‑加双氧酶；敲除酿酒酵母中的ROX1和GAL80基因；并且下调角鲨烯合酶ERG9的表达；对其进行摇瓶发酵时，该菌株胞外视黄醛、视黄醇含量分别达到43.50mg/L和16.84mg/L，视黄醛和视黄醇总含量为73.40mg/L，因此具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN113684141B
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202110926222.6
申请日：2021-08-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种胞外转运维生素D3前体角鲨烯的酿酒酵母菌株构建及其应用，属于发酵工程技术领域。本发明首先构建了一株高产角鲨烯的重组酿酒酵母菌株Z1O3，所述重组酿酒酵母强化表达了3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶、异戊烯基焦磷酸异构酶、法尼基焦磷酸合酶、内质网大小调节因子的相关基因INO2、Pdr5蛋白和Osh3蛋白；并且敲除了ROX1基因；对其进行摇瓶发酵时，该菌株胞外十二烷中角鲨烯含量达到893.58mg/L；而在发酵罐中培养，该菌株胞外十二烷中角鲨烯含量可达到6995.81mg/L，由本发明构建的重组菌株不仅具有角鲨烯胞外转运能力，且具有更强的角鲨烯生产性能，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN113502235B
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202110757496.7
申请日：2021-07-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种强化表达内质网大小调节因子的酿酒酵母菌株的构建和应用，属于代谢工程技术领域。本发明以酿酒酵母BY4741为出发菌株，强化MVA代谢途径中的关键基因tHMG1(3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶)、IDI(异戊烯基焦磷酸异构酶)以及ERG20(法尼基焦磷酸合酶)以提高角鲨烯前体代谢物产量，敲除ROX1基因以促进菌体生长，发酵生产角鲨烯产量为1.44g/L。进一步强化内质网大小调节因子相关基因INO2、SCS22、TCB2和IST2以扩大内质网表面积增强细胞蛋白质合成能力，发酵产量达到2.06g/L，提高了43.1％。
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公开(公告)号：CN113736815B
公开(公告)日：2022-05-24
申请号：CN202111035771.0
申请日：2021-09-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种通过强化枯草芽孢杆菌功能膜微域提高七烯甲萘醌产量的方法，本发明的方法是通过强化表达产七烯甲萘醌的枯草芽孢杆菌功能膜微域中的脚手架蛋白FloA。本发明通过对已高产MK‑7的重组枯草芽孢杆菌BS20中的脚手架蛋白使用强启动子P43进行强化，增加FMMs在细胞质膜上的占比后，进一步提高了MK‑7的产量，与对照菌株BS20相比，强化FloA的重组枯草芽孢杆菌BSQ1产量最高，发酵6天后，BSQ1菌株产量达到417.08mg/L，较BS20菌株提升了16.57％。
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