公开(公告)号：CN116970503B

公开(公告)日：2024-08-02

申请号：CN202310918227.3

申请日：2023-07-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 吕雪芹 ,  刘龙 ,  陈坚 ,  堵国成 ,  李江华 ,  刘延峰 ,  王凌锐 ,  安学瑞 ,  陶孟瑞

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/12 ,  C12N15/31 ,  C12N15/81 ,  C07K14/79 ,  A01N63/50 ,  A01N63/32 ,  A01P1/00 ,  A01P3/00 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种强化囊泡转运的产乳铁蛋白毕赤酵母及促进胞外分泌的方法，属于生物技术领域。本发明发现乳铁蛋白在胞内的累积不外排，限制了胞外乳铁蛋白的产量，同时大量的乳铁蛋白聚集在胞内也会影响酵母细胞的生长，因此期望寻找一种能够有效促进其分泌表达的方法。通过筛选，发现过表达BMH2、Sec12或Sly1后胞外上清中的乳铁蛋白含量明显增加，而且沉淀破碎上清中的乳铁蛋白含量有效减少，能够强化乳铁蛋白在毕赤酵母中的囊泡转运，使其快速的分泌到细胞外，实现增强乳铁蛋白的高效表达，解决了目前乳铁蛋白聚集在胞内不分泌的问题。

公开(公告)号：CN116970503A

公开(公告)日：2023-10-31

申请号：CN202310918227.3

申请日：2023-07-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 吕雪芹 ,  刘龙 ,  陈坚 ,  堵国成 ,  李江华 ,  刘延峰 ,  王凌锐 ,  安学瑞 ,  陶孟瑞

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/12 ,  C12N15/31 ,  C12N15/81 ,  C07K14/79 ,  A01N63/50 ,  A01N63/32 ,  A01P1/00 ,  A01P3/00 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种强化囊泡转运的产乳铁蛋白毕赤酵母及促进胞外分泌的方法，属于生物技术领域。本发明发现乳铁蛋白在胞内的累积不外排，限制了胞外乳铁蛋白的产量，同时大量的乳铁蛋白聚集在胞内也会影响酵母细胞的生长，因此期望寻找一种能够有效促进其分泌表达的方法。通过筛选，发现过表达BMH2、Sec12或Sly1后胞外上清中的乳铁蛋白含量明显增加，而且沉淀破碎上清中的乳铁蛋白含量有效减少，能够强化乳铁蛋白在毕赤酵母中的囊泡转运，使其快速的分泌到细胞外，实现增强乳铁蛋白的高效表达，解决了目前乳铁蛋白聚集在胞内不分泌的问题。

公开(公告)号：CN113736815B

公开(公告)日：2022-05-24

申请号：CN202111035771.0

申请日：2021-09-06

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘龙 ,  陈坚 ,  吕雪芹 ,  堵国成 ,  李江华 ,  刘延峰 ,  董雅君 ,  金柯 ,  张智航 ,  王凌锐

IPC: C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12N15/31 ,  C12P7/66 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种通过强化枯草芽孢杆菌功能膜微域提高七烯甲萘醌产量的方法，本发明的方法是通过强化表达产七烯甲萘醌的枯草芽孢杆菌功能膜微域中的脚手架蛋白FloA。本发明通过对已高产MK‑7的重组枯草芽孢杆菌BS20中的脚手架蛋白使用强启动子P43进行强化，增加FMMs在细胞质膜上的占比后，进一步提高了MK‑7的产量，与对照菌株BS20相比，强化FloA的重组枯草芽孢杆菌BSQ1产量最高，发酵6天后，BSQ1菌株产量达到417.08mg/L，较BS20菌株提升了16.57％。

公开(公告)号：CN116064261A

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202210820757.X

申请日：2022-07-13

Applicant: 江南大学 ,  鄂尔多斯市中轩生化股份有限公司

Inventor： 刘龙 ,  陈坚 ,  孙正艳 ,  吕雪芹 ,  崔佳 ,  堵国成 ,  方杰 ,  李江华 ,  董金儒 ,  刘延峰 ,  王凌锐

IPC: C12N1/19 ,  C12P7/02 ,  C12N15/60 ,  C12N15/61 ,  C12N15/53 ,  C12N15/31 ,  C12N15/81 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一种L‑薄荷醇产量提高的酿酒酵母菌株，通过在tLimS和IDI、tLimS和L3H的C端添加RIDD‑RIAD短肽进行酶组装，拉近两个酶之间的距离，提高薄荷醇的产量。本发明tLimS‑IDI系列菌株中，添加完整RIDD‑RIAD互作短肽后，菌株yLDIA产量相比菌株yLI提高了32.73％，达40.01mg/L；tLimS‑L3H系列菌株中，同时添加RIDD‑RIAD互作短肽后，菌株薄荷醇产量提高了46.84％，达到44.26mg/L。

公开(公告)号：CN118272244A

公开(公告)日：2024-07-02

申请号：CN202410378559.1

申请日：2024-03-29

Applicant: 内蒙古蒙牛乳业(集团)股份有限公司 ,  江南大学

Inventor： 刘龙 ,  徐泓 ,  陈坚 ,  刘雨柔 ,  吕雪芹 ,  徐宇博 ,  王凌锐

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/12 ,  C12N15/31 ,  C12N15/81 ,  C12P21/02 ,  C12R1/84 ,  C12R1/645 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明涉及微生物基因工程技术领域，具体涉及一种重组酵母菌株及其在乳铁蛋白生产中的应用。本发明提供一种重组酵母菌株，其基因组中整合有乳铁蛋白基因，且其中内质网相关蛋白以及囊泡转运相关蛋白的表达被增强；其中，所述内质网相关蛋白为选自BFR2、ORM1、PDI、KAR2中的至少一种；所述囊泡转运相关蛋白为选自KIN2、SEC4、SEC12、SEC31中的至少一种。本发明的重组酵母菌株的乳铁蛋白分泌表达量显著提高，对提高乳铁蛋白生产菌的生产性能、降低乳铁蛋白的生产成本具有重要意义。

公开(公告)号：CN113736815A

公开(公告)日：2021-12-03

申请号：CN202111035771.0

申请日：2021-09-06

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘龙 ,  陈坚 ,  吕雪芹 ,  堵国成 ,  李江华 ,  刘延峰 ,  董雅君 ,  金柯 ,  张智航 ,  王凌锐

IPC: C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12N15/31 ,  C12P7/66 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种通过强化枯草芽孢杆菌功能膜微域提高七烯甲萘醌产量的方法，本发明的方法是通过强化表达产七烯甲萘醌的枯草芽孢杆菌功能膜微域中的脚手架蛋白FloA。本发明通过对已高产MK‑7的重组枯草芽孢杆菌BS20中的脚手架蛋白使用强启动子P43进行强化，增加FMMs在细胞质膜上的占比后，进一步提高了MK‑7的产量，与对照菌株BS20相比，强化FloA的重组枯草芽孢杆菌BSQ1产量最高，发酵6天后，BSQ1菌株产量达到417.08mg/L，较BS20菌株提升了16.57％。