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公开(公告)号：CN113604365B
公开(公告)日：2023-09-15
申请号：CN202111026526.3
申请日：2021-09-02
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 本发明公开了一种超声波控制菌丝球粒径的方法及其应用。本发明所述方法包括如下步骤：(1)种子培养基的制备；(2)将步骤(1)制备的种子培养基灭菌、冷却后，接入曲霉孢子，培养得到含曲霉菌丝球的种子液；(3)对步骤(2)含曲霉菌丝球的种子液进行超声处理，得到含不同粒径的菌丝球的种子液；将含不同粒径菌丝球的种子液加入发酵培养基中搅拌发酵得到柠檬酸发酵液。本发明方法有利于柠檬酸发酵实现高浓度、高转化率和高效率的统一，对柠檬酸产业技术提升具有重要促进作用。
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公开(公告)号：CN109055444B
公开(公告)日：2020-06-05
申请号：CN201810986196.4
申请日：2018-08-28
Applicant: 江苏国信协联能源有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公布了一种黑曲霉种子连续培养的方法，所述方法包括如下步骤：(1)启动阶段，将黑曲霉孢子接种至种子培养基，得到种子液；(2)种子连续培养阶段，对步骤(1)得到的种子液进行连续分散处理，分散得到的种子液进行连续培养，并同时补充新鲜种子补料培养基；(3)停止阶段，停止补充新鲜种子补料培养基和分散处理，继续培养得到种子液，移入发酵培养基进行发酵培养。本发明方法突破性解决了多细胞丝状菌生长缓慢，以及菌丝球在连续培养中容易流失的问题，完全实现了种子连续培养，使菌体恒定在最适的生长环境中，避免了菌种退化，使种子液处于连续稳定的高活力状态，对应发酵产柠檬酸的性能提高。
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公开(公告)号：CN102952800B
公开(公告)日：2014-09-17
申请号：CN201210452244.4
申请日：2012-11-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种GAP启动子基因及其应用，属于微生物分子生物学领域。本发明提供的启动子序列如SEQ ID NO.1所示，来源于产甘油假丝酵母WL2002-5-59。该基因及其启动子的克隆扩大了微生物抗渗透压胁迫研究的基因资源，也为产甘油假丝酵母高产甘油的分子机理研究奠定了基础。含有本发明启动子序列的应用如表达载体可构建为筛选细胞转化的标志，用于评估基因克隆的效率。作为产甘油假丝酵母基因敲除的工具，进行菌种改良，产生更安全及更具产业利用性的产甘油假丝酵母种。
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公开(公告)号：CN113604365A
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN202111026526.3
申请日：2021-09-02
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 本发明公开了一种超声波控制菌丝球粒径的方法及其应用。本发明所述方法包括如下步骤：(1)种子培养基的制备；(2)将步骤(1)制备的种子培养基灭菌、冷却后，接入曲霉孢子，培养得到含曲霉菌丝球的种子液；(3)对步骤(2)含曲霉菌丝球的种子液进行超声处理，得到含不同粒径的菌丝球的种子液；将含不同粒径菌丝球的种子液加入发酵培养基中搅拌发酵得到柠檬酸发酵液。本发明方法有利于柠檬酸发酵实现高浓度、高转化率和高效率的统一，对柠檬酸产业技术提升具有重要促进作用。
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公开(公告)号：CN110295135B
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN201910664977.6
申请日：2019-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种改造枯草芽孢杆菌FMMs的方法及其应用，属于遗传工程技术领域。本发明通过强化固醇类似物前体合成酶——角鲨烯合酶和脚手架蛋白显著增加质膜上FMMs占比。本发明构建的重组枯草芽孢杆菌BSGFMM1‑AY与对照菌株BSGN6‑AY相比，可以更多地将N‑乙酰氨基葡萄糖合成所需的途径酶固定在FMMs中，形成底物通道，显著提高酶的催化效率。在复合培养基摇瓶发酵过程中，对照菌株BSGN6‑AY的GlcNAc滴定量仅为2.84g/L，而BSGFMM1‑AY的GlcNAc滴定量增加至8.86g/L。本发明的重组枯草芽孢杆菌构建方法简单，普适性高，便于使用，具有很好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110295135A
公开(公告)日：2019-10-01
申请号：CN201910664977.6
申请日：2019-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种改造枯草芽孢杆菌FMMs的方法及其应用，属于遗传工程技术领域。本发明通过强化固醇类似物前体合成酶——角鲨烯合酶和脚手架蛋白显著增加质膜上FMMs占比。本发明构建的重组枯草芽孢杆菌BSGFMM1-AY与对照菌株BSGN6-AY相比，可以更多地将N-乙酰氨基葡萄糖合成所需的途径酶固定在FMMs中，形成底物通道，显著提高酶的催化效率。在复合培养基摇瓶发酵过程中，对照菌株BSGN6-AY的GlcNAc滴定量仅为2.84g/L，而BSGFMM1-AY的GlcNAc滴定量增加至8.86g/L。本发明的重组枯草芽孢杆菌构建方法简单，普适性高，便于使用，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN102952800A
公开(公告)日：2013-03-06
申请号：CN201210452244.4
申请日：2012-11-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种GAP启动子基因及其应用，属于微生物分子生物学领域。本发明提供的启动子序列如SEQ ID NO.1所示，来源于产甘油假丝酵母WL2002-5-59。该基因及其启动子的克隆扩大了微生物抗渗透压胁迫研究的基因资源，也为产甘油假丝酵母高产甘油的分子机理研究奠定了基础。含有本发明启动子序列的应用如表达载体可构建为筛选细胞转化的标志，用于评估基因克隆的效率。作为产甘油假丝酵母基因敲除的工具，进行菌种改良，产生更安全及更具产业利用性的产甘油假丝酵母种。
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公开(公告)号：CN109055444A
公开(公告)日：2018-12-21
申请号：CN201810986196.4
申请日：2018-08-28
Applicant: 江苏国信协联能源有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公布了一种黑曲霉种子连续培养的方法，所述方法包括如下步骤：(1)启动阶段，将黑曲霉孢子接种至种子培养基，得到种子液；(2)种子连续培养阶段，对步骤(1)得到的种子液进行连续分散处理，分散得到的种子液进行连续培养，并同时补充新鲜种子补料培养基；(3)停止阶段，停止补充新鲜种子补料培养基和分散处理，继续培养得到种子液，移入发酵培养基进行发酵培养。本发明方法突破性解决了多细胞丝状菌生长缓慢，以及菌丝球在连续培养中容易流失的问题，完全实现了种子连续培养，使菌体恒定在最适的生长环境中，避免了菌种退化，使种子液处于连续稳定的高活力状态，对应发酵产柠檬酸的性能提高。
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公开(公告)号：CN103173483B
公开(公告)日：2018-07-06
申请号：CN201210578742.3
申请日：2012-12-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种能用同源重组来克隆的产甘油假丝酵母整合载体pURGAP的构建及其应用。所构建的pURGAP载体包含有酵母Candida glycerinogenes的通过构建带有5.8S rDNA序列SEQ NO.2，可整合于酵母Candida glycerinogenes特征5.8S序列SEQ NO.1位点，所构建的pURGAP载体还包含有渗透压启动子PCgGAP、zeocin抗性标记和在大肠杆菌高拷贝的所有元件。与其它整合载体相比，pURGAP以特征5.8S rDNA序列为整合位点可显著提高整合载体转化效率，并明显增强外源蛋白表达强度。所构建的pURGAP可有效地将外源基因或启动子在产甘油假丝酵母中进行整合表达，是提高表达载体的整合效率，加速工业菌株产甘油假丝酵母重组改造速度的一种重要方法。
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公开(公告)号：CN103173483A
公开(公告)日：2013-06-26
申请号：CN201210578742.3
申请日：2012-12-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种能用同源重组来克隆的产甘油假丝酵母整合载体pURGAP的构建及其应用。所构建的pURGAP载体包含有酵母Candida glycerinogenes的通过构建带有5.8S rDNA序列SEQ NO.2，可整合于酵母Candida glycerinogenes特征5.8S序列SEQ NO.1位点，所构建的pURGAP载体还包含有渗透压启动子PCgGAP、zeocin抗性标记和在大肠杆菌高拷贝的所有元件。与其它整合载体相比，pURGAP以特征5.8S rDNA序列为整合位点可显著提高整合载体转化效率，并明显增强外源蛋白表达强度。所构建的pURGAP可有效地将外源基因或启动子在产甘油假丝酵母中进行整合表达，是提高表达载体的整合效率，加速工业菌株产甘油假丝酵母重组改造速度的一种重要方法。
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