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公开(公告)号:CN110184229A
公开(公告)日:2019-08-30
申请号:CN201910172021.4
申请日:2019-03-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高重组枯草芽孢杆菌合成N-乙酰氨基葡萄糖效率的方法,属于遗传工程技术领域。本发明以枯草芽孢杆菌自身功能膜微域FMMs为空间支架,以双质粒系统形式将FMMs定位功能结构域SPFH domain分别与氨基葡萄糖-6-磷酸合成酶GlmS和氨基葡萄糖-6-磷酸乙酰化酶GNA1进行融合表达,并通过一对工具小肽CC-Di-A和CC-Di-B调控GlmS与GNA1之间的化学计量比。在摇瓶发酵过程中,对照菌株的乙酰氨基葡萄糖的产量仅为1.97g/L,而G1:N2的乙酰氨基葡萄糖产量增加至6.15g/L,是对照菌株的3.12倍。本发明的重组枯草芽孢杆菌构建方法简单,便于使用,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN117417407B
公开(公告)日:2024-07-19
申请号:CN202311365367.9
申请日:2023-10-20
Applicant: 江苏集萃未来食品技术研究所有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种在微生物中形成可逆无膜细胞器的方法。本发明为了在宿主细胞中形成无膜细胞器,在固有无需蛋白RGG的基础上融合了人工短肽序列WRG‑1,融合1个或2个WGR‑1串联序列都可以有效促进RGG的相分离,在酿酒酵母中形成无膜细胞器,其中无膜细胞器RGG‑(WGR‑1)2具有更好的液体流动性。本发明进一步通过在RGG‑(WGR‑1)2系统中引入酶切位点x,构建RGG‑x‑(WGR‑1)2,在诱导蛋白酶表达后,实现了无膜细胞器的可逆形成。本发明的方法在定制和控制细胞功能等方面具有重要价值。
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公开(公告)号:CN116179385A
公开(公告)日:2023-05-30
申请号:CN202310107825.2
申请日:2023-02-14
Applicant: 江南大学 , 好想你健康食品股份有限公司
IPC: C12N1/19 , C12N9/90 , C12N9/02 , C12N9/10 , C12N9/04 , C12N9/00 , C12N15/113 , C12N15/61 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/52 , C12P33/00 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种提高酿酒酵母合成熊果酸和齐墩果酸产量的方法,具体涉及采用重组酿酒酵母进行发酵生产,该重组酿酒酵母至少表达了香树脂醇合酶CrMAS、香树脂醇C‑28位氧化酶CrAO和细胞色素‑NADPH‑还原酶AtCPR1,敲除了苹果酸合酶MLS1,并强化表达了醇脱氢酶ADH2、乙酸盐‑辅酶A连接酶1ACS1、醛脱氢酶ALD6、鲨烯环氧酶ERG1以及香树酯醇合酶CrMAS。
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公开(公告)号:CN110184229B
公开(公告)日:2021-03-26
申请号:CN201910172021.4
申请日:2019-03-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高重组枯草芽孢杆菌合成N‑乙酰氨基葡萄糖效率的方法,属于遗传工程技术领域。本发明以枯草芽孢杆菌自身功能膜微域FMMs为空间支架,以双质粒系统形式将FMMs定位功能结构域SPFH domain分别与氨基葡萄糖‑6‑磷酸合成酶GlmS和氨基葡萄糖‑6‑磷酸乙酰化酶GNA1进行融合表达,并通过一对工具小肽CC‑Di‑A和CC‑Di‑B调控GlmS与GNA1之间的化学计量比。在摇瓶发酵过程中,对照菌株的乙酰氨基葡萄糖的产量仅为1.97g/L,而G1:N2的乙酰氨基葡萄糖产量增加至6.15g/L,是对照菌株的3.12倍。本发明的重组枯草芽孢杆菌构建方法简单,便于使用,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN114561311A
公开(公告)日:2022-05-31
申请号:CN202210313654.4
申请日:2022-03-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种胞外转运视黄醛和视黄醇的酿酒酵母菌株构建及其应用,属于发酵工程技术领域。本发明构建了一株强化视黄醛和视黄醇分泌能力的重组酿酒酵母菌株,所述重组酿酒酵母强化表达了3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶、异戊烯基焦磷酸异构酶、法尼基焦磷酸合酶、内质网大小调节因子INO2和ABC转运蛋白Pdr10;异源表达香叶基香叶基二磷酸合酶、八氢番茄红素脱氢酶、15‑顺式八氢番茄红素合酶、双功能番茄红素环化酶/八氢番茄红素合酶、15、15’‑加双氧酶;敲除酿酒酵母中的ROX1和GAL80基因;并且下调角鲨烯合酶ERG9的表达;对其进行摇瓶发酵时,该菌株胞外视黄醛、视黄醇含量分别达到43.50mg/L和16.84mg/L,视黄醛和视黄醇总含量为73.40mg/L,因此具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN113736815A
公开(公告)日:2021-12-03
申请号:CN202111035771.0
申请日:2021-09-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种通过强化枯草芽孢杆菌功能膜微域提高七烯甲萘醌产量的方法,本发明的方法是通过强化表达产七烯甲萘醌的枯草芽孢杆菌功能膜微域中的脚手架蛋白FloA。本发明通过对已高产MK‑7的重组枯草芽孢杆菌BS20中的脚手架蛋白使用强启动子P43进行强化,增加FMMs在细胞质膜上的占比后,进一步提高了MK‑7的产量,与对照菌株BS20相比,强化FloA的重组枯草芽孢杆菌BSQ1产量最高,发酵6天后,BSQ1菌株产量达到417.08mg/L,较BS20菌株提升了16.57%。
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公开(公告)号:CN113502235A
公开(公告)日:2021-10-15
申请号:CN202110757496.7
申请日:2021-07-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种强化表达内质网大小调节因子的酿酒酵母菌株的构建和应用,属于代谢工程技术领域。本发明以酿酒酵母BY4741为出发菌株,强化MVA代谢途径中的关键基因tHMG1(3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶)、IDI(异戊烯基焦磷酸异构酶)以及ERG20(法尼基焦磷酸合酶)以提高角鲨烯前体代谢物产量,敲除ROX1基因以促进菌体生长,发酵生产角鲨烯产量为1.44g/L。进一步强化内质网大小调节因子相关基因INO2、SCS22、TCB2和IST2以扩大内质网表面积增强细胞蛋白质合成能力,发酵产量达到2.06g/L,提高了43.1%。
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公开(公告)号:CN117417407A
公开(公告)日:2024-01-19
申请号:CN202311365367.9
申请日:2023-10-20
Applicant: 宜兴食品与生物技术研究院有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种在微生物中形成可逆无膜细胞器的方法。本发明为了在宿主细胞中形成无膜细胞器,在固有无需蛋白RGG的基础上融合了人工短肽序列WRG‑1,融合1个或2个WGR‑1串联序列都可以有效促进RGG的相分离,在酿酒酵母中形成无膜细胞器,其中无膜细胞器RGG‑(WGR‑1)2具有更好的液体流动性。本发明进一步通过在RGG‑(WGR‑1)2系统中引入酶切位点x,构建RGG‑x‑(WGR‑1)2,在诱导蛋白酶表达后,实现了无膜细胞器的可逆形成。本发明的方法在定制和控制细胞功能等方面具有重要价值。
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公开(公告)号:CN116121091A
公开(公告)日:2023-05-16
申请号:CN202211281300.2
申请日:2022-10-19
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/19 , C12N9/90 , C12N9/10 , C12N9/04 , C12N9/02 , C12N15/61 , C12N15/54 , C12N15/53 , C12P33/00 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种高产熊果酸或齐墩果酸的酿酒酵母工程菌株,表达长春花来源的香树脂醇合酶CrMAS和香树脂醇C‑28位氧化酶CrAO以及拟南芥来源的细胞色素‑NADPH‑还原酶AtCPR1,使得重组酿酒酵母能够合成熊果酸和齐墩果酸。进一步通过增加CrMAS的拷贝数,敲除苹果酸合酶MLS1以抑制前体乙酰辅酶A的竞争途径,使得重组酿酒酵母能够高效合成熊果酸和齐墩果酸。
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公开(公告)号:CN113684141A
公开(公告)日:2021-11-23
申请号:CN202110926222.6
申请日:2021-08-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种胞外转运维生素D3前体角鲨烯的酿酒酵母菌株构建及其应用,属于发酵工程技术领域。本发明首先构建了一株高产角鲨烯的重组酿酒酵母菌株Z1O3,所述重组酿酒酵母强化表达了3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶、异戊烯基焦磷酸异构酶、法尼基焦磷酸合酶、内质网大小调节因子的相关基因INO2、Pdr5蛋白和Osh3蛋白;并且敲除了ROX1基因;对其进行摇瓶发酵时,该菌株胞外十二烷中角鲨烯含量达到893.58mg/L;而在发酵罐中培养,该菌株胞外十二烷中角鲨烯含量可达到6995.81mg/L,由本发明构建的重组菌株不仅具有角鲨烯胞外转运能力,且具有更强的角鲨烯生产性能,具有广阔的应用前景。
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