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公开(公告)号：CN111218528B
公开(公告)日：2022-05-24
申请号：CN202010167385.6
申请日：2020-03-11
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒检测技术领域，具体涉及基于双基因检测非洲猪瘟病毒的PCR引物组、试剂盒及应用。本发明中的引物组及方法的检测特异性高、重复性好、灵敏度高，同时具有操作简便，检测时间短等优势，可有效地降低假阳性结果的出现，降低阳性对照对检测环境的影响，在非洲猪瘟病毒的快速检测中具有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN106834538A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710018128.4
申请日：2017-01-11
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2521/107 , C12Q2565/125
Abstract: 本发明提供一种鉴别猪流行性腹泻病毒疫苗弱毒株和/或流行毒株一步法RT‑PCR诊断试剂盒，包括20μL RT‑PCR一步法酶、250μL酶缓冲液、300μL RNase Free dH2O、40μL混合引物、20μL阳性对照、20μL阴性对照、80μL DL2000及25μL 6×Loading Buffer；该试剂盒，与现有技术相比，具有操作简单，反转录与PCR扩增一步完成，减少了反应时间，避免了模板RNA的降解，提高了检测的敏感性等优点。该引物对猪传染性胃肠炎病毒、猪A群轮状病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒和猪捷申病毒的扩增结果均为阴性，该方法最低能检出1pg的猪流行性腹泻病毒疫苗弱毒株和1pg的流行毒株模板，本试剂盒能广泛应用于基层检测机构，对猪场流行性腹泻病毒病的早期鉴别诊断、防控及净化有重要意义。
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公开(公告)号：CN110438264B
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN201910733836.5
申请日：2019-08-09
Applicant: 深圳市康百得生物科技有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒检测技术领域，具体涉及利用二重实时荧光定量RT‑PCR检测猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的方法。本发明提供用于猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的二重实时荧光定量RT‑PCR检测的引物和探针组，以及包含该引物和探针组的检测试剂盒和检测方法。该方法的检测特异性高、重复性好、灵敏度高，同时具有操作简便，检测时间短等优势，可实现对猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的鉴别诊断和排除检测，在猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的快速检测中具有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN113444842B
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202110970292.1
申请日：2021-08-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供了一种用于狐狸逆转录病毒检测的特异引物组及PCR检测试剂盒的应用，引物组包括两对引物，其中：第一对引物：上游引物1如SEQ ID No.1‑F所示、下游引物1如SEQ ID No.1‑R所示；第二对引物：上游引物2如SEQ ID No.2‑F所示；下游引物2如SEQ ID No.2‑R所示。该特异性引物组在PCR检测中的应用，具体为将该特异性引物组在PCR检测试剂盒中进行应用。使用该特异性引物组，可提高PCR的敏感性和特异性，进而提高对狐狸逆转录病毒检测的准确性，将该特异性引物应用于PCR检测试剂盒中，可实现对该狐狸逆转录病毒进行快速、准确的检测，且样品处理过程和检测过程简单。
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公开(公告)号：CN114574632A
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202210237973.1
申请日：2022-03-10
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明公开了一种用于同时检测PEV和PTV的直接扩增荧光RT‑PCR引物探针组和试剂盒及方法，所述引物探针组包括4条不同的引物和2条不同的探针，其中，2条扩增PEV的引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1～2所示；1条扩增PEV的探针序列，其核酸序列如SEQ ID NO.5所示；2条扩增PTV的引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3～4所示；1条扩增PTV的探针序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示，可用于直接扩增荧光RT‑PCR同时检测PEV和PTV，具有操作简单、灵敏度高、特异性好、检测速度快，成本低等显著优势，适宜临床大规模推广应用，具有良好的推广价值和应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114574605A
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202210345627.5
申请日：2022-04-02
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明公开了一种检测鸡肠炎沙门氏菌和滑液囊支原体的双重荧光PCR引物组和试剂盒及方法，本发明提供的引物组包括针对鸡肠炎沙门氏菌和滑液支原体的特异性引物，所有引物长度均20个碱基左右，GC含量在40％～60％，引物间无互补序列，熔解温度相差小于5℃，引物内无互补序列及二级结构。本发明提供的试剂盒同时含有鸡肠炎沙门氏菌和滑液支原体的引物组，扩增时4条引物之间不互相干扰，使用本发明试剂盒一次扩增反应，可完成两种病原筛查，有效克服了现有试剂盒不能同时检测鸡肠炎沙门氏菌和滑液支原体的弊端，为鸡场鸡肠炎沙门氏菌病和滑液支原体病两种疾病的净化提供了强有力的技术支撑，具有较高的实用价值和广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN113444841A
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN202110970275.8
申请日：2021-08-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q1/6806 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种狐狸逆转录病毒SYBR GreenⅠ荧光RT‑PCR试剂盒及使用方法，试剂盒包括核酸释放剂、2×One step TB Green RT‑PCR BufferⅢ、酶混合液、阴性对照、阳性对照和引物组；该引物组核苷酸序列为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的特定碱基序列；使用方法包括准备待测样本模板、荧光RT‑PCR扩增和结果分析。将该检测引物用于SYBR GreenⅠ荧光RT‑PCR试剂盒中，使该试剂盒既具有适用性广、适用性强的优点，又具有检测的准确度高、特异性强的优点；另外，使用该试剂盒，一次加样可完成狐狸逆转录病毒检测，检测过程简单、易于操作。
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公开(公告)号：CN113265358A
公开(公告)日：2021-08-17
申请号：CN202110574203.1
申请日：2021-05-25
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12N1/20 , G01N33/531 , G01N33/569 , G01N33/68 , C12R1/42 , C12R1/35
Abstract: 本发明公开了一种鸡白痢沙门氏菌和鸡滑液囊支原体双重平板凝集抗原及其制备方法和应用，制备方法为分别将鸡白痢沙门氏菌C79‑1和鸡滑液囊支原体GX11‑T复苏传代后制成种子菌液，再接种相应培养基扩大培养，收获，分别经甲醛溶液灭活，浓缩，两种菌液按一定体积配比，加入终浓度为质量分数为3％的结晶紫溶液染色和体积分数为10％的甘油，混匀分装即得。本发明工艺方法简单合理，成本低，稳定性好，制备的双重平板凝集抗原经一次反应同时可检测两种疫病抗体，具有敏感性高，诊断快速，特异性强，凝集效果易于观察等优点，显著节约检测时间和检测费用，临床可用于鸡白痢和鸡滑液支原体两种抗体快速检测，淘汰病鸡，实现疾病净化。
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公开(公告)号：CN112481416A
公开(公告)日：2021-03-12
申请号：CN202011453158.6
申请日：2020-12-11
Applicant: 山东绿都生物科技有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供了非洲猪瘟病毒和猪传染性胸膜放线杆菌双重荧光PCR检测试剂盒及使用方法，试剂盒包含核酸释放剂、反应预混液Premix Taq、荧光染料LyGreen、阴性对照、阳性对照以及引物混合液，引物混合液中，引物的核苷酸序列为SEQIDNO.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示；在使用方法中，控制荧光PCR扩增条件为：95℃预变性3min；94℃变性20s；55℃退火20s；72℃延伸20s；40个循环。使该试剂盒具有敏感性和特异性高的优点；可一次性完成对非洲猪瘟病毒和猪传染性胸膜放线杆菌检测，使检测过程更加简单、易于操作。
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公开(公告)号：CN110699328A
公开(公告)日：2020-01-17
申请号：CN201910772848.9
申请日：2019-08-21
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及微生物病毒领域，具体的说是一种B型猪肠道病毒及其应用，所述B型猪肠道病毒Porcine enterovirus B,PEV-B，保藏号为：CGMCC No.10405，命名为Ch-SDbz-W2Y以及B型猪肠道病毒在卵黄抗体中的应用，B型猪肠道病毒Porcine enterovirus B,PEV-B基因组全长序列7382bp，其中包含5'端的非编码区为812bp、3'端的非编码区为72bp；本发明提供的一种B型猪肠道病毒，经过筛选、分离的一株新猪源肠道病毒，该分离株的分离筛选为猪源肠道病毒的全基因组变异、重组监测提供生物信息，利用该毒株制备动物免疫血清，为蛋白变异提供新的生物信息，为后续猪源肠道病毒的研究提供依据，对后续的PEV-B的遗传进化信息研究奠定基础，对掌握猪肠道病毒的重组、溯源，丰富病毒库具有重大意义。
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