SARS-CoV-2 S蛋白或RBD蛋白的核酸适配体及其应用

    公开(公告)号:CN111849994B

    公开(公告)日:2021-11-16

    申请号:CN202010246548.X

    申请日:2020-03-31

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种SARS‑CoV‑2 S蛋白或RBD蛋白的核酸适配体,所述的核酸适配体包括如SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列。本发明的核酸适体能够提供SARS‑CoV‑2 S蛋白或RBD蛋白的快速、精准检测,同时适配体与血管紧张素转换酶(ACE2)有竞争作用,高效阻断SARS‑CoV‑2 S蛋白或RBD蛋白和ACE2结合,从而抑制病毒感染细胞,可作为药物用于防御和治疗SARS‑CoV‑2相关疾病,成为抗病毒的潜在药物。满足家庭、社区等多种应用场景的筛查需求,减少非必要的患者聚集,补充现有诊断和治疗体系。

    一种在人血浆中筛选的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110004147B

    公开(公告)日:2021-01-08

    申请号:CN201910164327.5

    申请日:2019-03-05

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种在人血浆中筛选的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法和应用,提供在人血浆复杂生理环境中能够高特异性识别、高亲和力结合上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体,发展了以人血浆模拟复杂生理环境的核酸适体筛选方法,可获得直接应用于外周血中捕获CTCs的核酸适体;最终获得的核酸适体具有易获得、成本低、不易失活、非免疫原性和无毒性等特点,并且利用该些序列实现了EpCAM蛋白、表达EpCAM蛋白的肿瘤细胞系的特异性识别及CTCs的捕获;另外,该些核酸适体在人血浆中具有高亲和力,确保其在生物分析和临床医学中的应用,并有望作为CTCs检测的分子识别工具而应用于液体活检。

    一种从孕妇外周血中分离游离胎儿细胞的方法

    公开(公告)号:CN108535228A

    公开(公告)日:2018-09-14

    申请号:CN201810289478.9

    申请日:2018-04-03

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明涉及一种从孕妇外周血中分离游离胎儿细胞的方法。该方法利用微流控芯片的细胞分离作用以及特异性亲和识别原理,实现了孕妇外周血中游离胎儿细胞(胎儿有核红细胞、滋养层细胞等)的高效率、高纯度捕获分离。在微流控芯片内,设计了具有特定几何排布方式的微阵列结构,以及修饰上具有亲和识别作用的分子基团如核酸适体、抗体、多肽等。调节微阵列结构的参数,可以调控不同尺寸的胎儿细胞与微阵列的碰撞效率,进而实现不同尺寸胎儿细胞的捕获富集。

    一种采用免疫试纸条对抗原进行定量检测的方法

    公开(公告)号:CN108318694A

    公开(公告)日:2018-07-24

    申请号:CN201810084575.4

    申请日:2018-01-29

    Applicant: 厦门大学

    CPC classification number: G01N33/6854

    Abstract: 本发明公开了一种采用免疫试纸条对抗原进行定量检测的方法。所述方法包括如下步骤:(1)在铂纳米颗粒表面修饰抗体;(2)在硝酸纤维素膜上划上待测抗原的包被抗体作为检测线,划上二抗作为质控线,并干燥处理;(3)铂标抗体喷涂到聚酯纤维膜上,真空干燥;(4)将吸水纸、硝酸纤维素膜、聚酯纤维膜和玻璃纤维膜顺序贴在PVC胶板上组装成试纸条;(5)将试纸条插入待测液中或者将待测液滴加到结合垫上,进行移液反应,剪下相应的含有检测线的试纸条片段,与H2O2反应产气并测量气压,所得气压差值与抗原浓度呈正相关关系。该方法具有灵敏、便携、廉价和易于操作等优点。

    聚甲基丙烯酸缩水甘油微球的合成及表面改性方法

    公开(公告)号:CN105294899B

    公开(公告)日:2017-07-18

    申请号:CN201510831446.3

    申请日:2015-11-25

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 聚甲基丙烯酸缩水甘油微球的合成及表面改性方法,涉及一种固相载体表面改性方法。1)将聚乙烯吡咯烷酮、偶氮二异丁腈、单体GMA加入装有乙醇和水混合溶剂的容器中,抽真空,充氮气,回流反应后,得乳白色液体;2)将步骤1)所得乳白色液体离心洗涤,干燥后,得呈白色固体粉末的PGMA微球;3)将步骤2)所得PGMA微球加入乙二胺和去离子水中回流反应,离心洗涤,干燥,得呈白色固体粉末的PGMA‑NH2微球;4)将步骤3)所得PGMA‑NH2微球加入两性离子羧基甜菜碱的甲醇溶剂中反应,离心洗涤,干燥,即得呈固体粉末的聚甲基丙烯酸缩水甘油微球。分散性好,反应条件温和,对微球的形貌影响较小,操作简便,反应成本低廉。

    一种单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法

    公开(公告)号:CN103911432B

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201410076295.0

    申请日:2014-03-04

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法。涉及一种核酸适体筛选技术,建立快速、高效的单克隆表面展示核酸适体筛选新方法。所述方法包括如下步骤:(1)将氨基修饰的正向引物通过NHS-氨基反应偶联到NHS修饰的微球表面;(2)将寡核苷酸文库通过液滴单分子微乳PCR以单克隆的形式扩增到偶联有正向引物的微球表面,每个微球上仅展示一种核酸序列;(3)通过单克隆微球库与靶标相关作用,可视化地考察表面展示序列与靶标的结合程度;(4)直接挑选获得能和靶标分子结合的单克隆微球,获取微球上的DNA序列,即可获得高质量核酸适体。该方法快速、高效、经济,实现了分子识别可视化监测,并可在无需克隆、测序、合成的条件下实现了富集库中核酸适体的快速筛选,获得选择性好、亲和力强的核酸适体。

    聚甲基丙烯酸缩水甘油微球的合成及表面改性方法

    公开(公告)号:CN105294899A

    公开(公告)日:2016-02-03

    申请号:CN201510831446.3

    申请日:2015-11-25

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 聚甲基丙烯酸缩水甘油微球的合成及表面改性方法,涉及一种固相载体表面改性方法。1)将聚乙烯吡咯烷酮、偶氮二异丁腈、单体GMA加入装有乙醇和水混合溶剂的容器中,抽真空,充氮气,回流反应后,得乳白色液体;2)将步骤1)所得乳白色液体离心洗涤,干燥后,得呈白色固体粉末的PGMA微球;3)将步骤2)所得PGMA微球加入乙二胺和去离子水中回流反应,离心洗涤,干燥,得呈白色固体粉末的PGMA-NH2微球;4)将步骤3)所得PGMA-NH2微球加入两性离子羧基甜菜碱的甲醇溶剂中反应,离心洗涤,干燥,即得呈固体粉末的聚甲基丙烯酸缩水甘油微球。分散性好,反应条件温和,对微球的形貌影响较小,操作简便,反应成本低廉。

    上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAMB及其制备方法

    公开(公告)号:CN103387990B

    公开(公告)日:2016-01-06

    申请号:CN201310328301.2

    申请日:2012-09-24

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAM B及其制备方法,涉及一种核酸。提供具有高特异性和高亲和力的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法与应用。所述上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体具有G四聚体结构或者茎环结构,制备方法包括:设计并合成单链DNA随机寡核苷酸库,筛选目的寡核苷酸序列,并通过流式分析法鉴定其与靶蛋白结合的特异性和亲和力。筛选获得的核酸适体无毒性,分子量小,渗透性好,易于合成与标记,只特异性识别EpCAM蛋白,并且特异性识别表达EpCAM蛋白的细胞系,对不表达此蛋白的细胞系不具有识别功能。

    上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAMCcut及其制备方法

    公开(公告)号:CN103387988B

    公开(公告)日:2016-01-06

    申请号:CN201310328256.0

    申请日:2012-09-24

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAM Ccut及其制备方法,涉及一种核酸。提供具有高特异性和高亲和力的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法与应用。所述上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体具有G四聚体结构或者茎环结构,制备方法包括:设计并合成单链DNA随机寡核苷酸库,筛选目的寡核苷酸序列,并通过流式分析法鉴定其与靶蛋白结合的特异性和亲和力。筛选获得的核酸适体无毒性,分子量小,渗透性好,易于合成与标记,只特异性识别EpCAM蛋白,并且特异性识别表达EpCAM蛋白的细胞系,对不表达此蛋白的细胞系不具有识别功能。

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