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公开(公告)号：CN113308577A
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202110650339.6
申请日：2021-06-10
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的可视化快速核酸检测方法，该方法针对牛结节性皮肤病病毒的orf068基因设计RPA引物并进行扩增，然后向扩增产物中加入Cas12a蛋白并进行酶切反应，反应体系包括Cas12a蛋白、sgRNA和核酸探针，即可对核酸探针发出的信号进行检测。本发明检测orf068质粒的灵敏度是5copies/μL,检测LSDV和山羊痘病毒(GTPV)的灵敏度均为0.1TCID50/μL，检测临床样本的诊断敏感性为96.3％(95％CI：81.0％，99.9％)，且特异性高，眼观颜色变化判断结果，具有简便、快速和适合现场检测等优点。
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公开(公告)号：CN111856005B
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN202010571847.0
申请日：2020-06-22
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/30 , C12N15/31 , G01N33/569 , A61K39/02 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开了牛支原体分泌蛋白MbovP280在制备牛支原体诊断试剂、药物或疫苗中的应用，属于动物传染病防治技术领域。所述牛支原体分泌蛋白MbovP280具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，试验证明，牛支原体分泌蛋白MbovP280具有诱导宿主巨噬细胞活力下降和凋亡的能力，在研发新药和疫苗方面具有重要潜力。
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公开(公告)号：CN112481184A
公开(公告)日：2021-03-12
申请号：CN202011434431.0
申请日：2020-12-10
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一株基因缺失重组卡介苗，该菌株缺失的基因是核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的BCG_0349基因，属于人兽共患病防治技术领域。本发明通过温敏型噬菌体转导介导的同源重组方式将包含BCG_0349基因上下游同源臂的同源交换底物转导进卡介苗基因组中进行BCG_0349基因敲除，成功构建该菌株并首次确认了缺失株能促进机体炎性细胞因子的表达和分泌，同时毒力致弱，具体体现在索状结构形成能力降低和小菌落表型，胞内存活能力降低更易于被机体所清除，本发明具有在人及动物结核病诊断、疫苗和药物开发等相关领域良好的应用潜能。
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公开(公告)号：CN110746504B
公开(公告)日：2021-01-15
申请号：CN201911075944.4
申请日：2019-11-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/12 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种抗牛支原体MbovP579蛋白的单克隆抗体，它是由杂交瘤细胞株1A2分泌的，所述杂交瘤细胞株1A2保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2018219。该单克隆抗体能与牛支原体发生反应，不与无乳支原体、鸡毒支原体、精氨酸支原体、绵羊肺炎支原体等反应，具有很高的特异性，可用于鉴别牛支原体与无乳支原体。而且能与更多的牛支原体包括临床分离株和标准参考株反应，在牛支原体的检测方面具有一定的广谱性。
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公开(公告)号：CN109652357B
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN201910128368.9
申请日：2019-02-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防制技术领域，具体涉及细胞共培养下生长缺陷的牛支原体突变株及应用,从牛支原体基因突变体库中筛选得到一株牛支原体Mbov_0328基因缺失突变菌株T9.386，该基因编码环二核苷酸磷酸二酯酶。突变菌株与牛胚胎肺细胞共培养时，表现出显著生长缺陷表型；在PPLO固体培养基上表现为小菌落形态。所述的突变株与野生菌株间的蛋白组学呈现显著的差异表达谱。突变菌株间具有38个差异表达蛋白，其中30个蛋白呈上调表达，8个蛋白呈下调表达。该突变株可在牛支原体代谢生理、致病和免疫防制领域应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111856005A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010571847.0
申请日：2020-06-22
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了牛支原体分泌蛋白MbovP280在制备牛支原体诊断试剂、药物或疫苗中的应用，属于动物传染病防治技术领域。所述牛支原体分泌蛋白MbovP280具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，试验证明，牛支原体分泌蛋白MbovP280具有诱导宿主巨噬细胞活力下降和凋亡的能力，在研发新药和疫苗方面具有重要潜力。
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公开(公告)号：CN110763843B
公开(公告)日：2020-09-15
申请号：CN201911075572.5
申请日：2019-11-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/58 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体双抗夹心ELISA检测试剂盒，该试剂盒包括包被有牛支原体多克隆抗体的酶标板、辣根过氧化物酶标记的抗牛支原体MbovP579蛋白的单克隆抗体，所述单克隆抗体是由杂交瘤细胞株1A2分泌的，所述杂交瘤细胞株1A2保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2018219。本发明实现了针对牛支原体抗原的特异性检测，且能够检出牛支原体的敏感度为108CFU/mL。通过对样本进行预增菌处理，含低至1CFU/mL的牛支原体样本均可以达到检测敏感度标准。与现有技术相比，本发明具有操作简便、人员技术水平要求低、主观因素误差小、设备简单等优点，可以快速实现大批量样品的检测分析。
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公开(公告)号：CN110746504A
公开(公告)日：2020-02-04
申请号：CN201911075944.4
申请日：2019-11-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/12 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种抗牛支原体MbovP579蛋白的单克隆抗体，它是由杂交瘤细胞株1A2分泌的，所述杂交瘤细胞株1A2保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2018219。该单克隆抗体能与牛支原体发生反应，不与无乳支原体、鸡毒支原体、精氨酸支原体、绵羊肺炎支原体等反应，具有很高的特异性，可用于鉴别牛支原体与无乳支原体。而且能与更多的牛支原体包括临床分离株和标准参考株反应，在牛支原体的检测方面具有一定的广谱性。
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公开(公告)号：CN110240637A
公开(公告)日：2019-09-17
申请号：CN201910480093.5
申请日：2019-06-04
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛分枝杆菌分子伴侣蛋白GroEL2及其编码基因，属于生物和疫苗技术领域。申请人从牛分枝杆菌卡介苗的基因组中克隆获得GroEL2基因，将该基因重组至耻垢分枝杆菌中表达，在确定了其高黏附及侵袭能力后，再将该基因在大肠杆菌中表达，最终获得重组蛋白GroEL2。该蛋白能提高机体的IgG、IgA抗体水平以及机体的Th1型及Th2型细胞免疫水平，具有一定的抗牛分枝杆菌感染能力，在牛分枝杆菌致病机制研究、疫苗和诊断试剂研发中具有应用前景。
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公开(公告)号：CN109385423A
公开(公告)日：2019-02-26
申请号：CN201811163720.4
申请日：2018-10-02
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113
Abstract: 本发明属于动物生化免疫技术领域，具体涉及调控结核分枝杆菌诱导巨噬细胞炎症应答的小分子。所述的小分子命名为miR-18b-5p。本发明通过一系列研究，证实miR-18b-5p在结核分枝杆菌感染的巨噬细胞中显著低表达。miR-18b-5p模拟物和抑制物可抑制和促进感染结核分枝杆菌的巨噬细胞相关炎性因子例如IL-α、IL-6和IL-1β等的表达，miR-18b-5p通过其靶标分子低氧诱导因子(Hif-1α)调节结核分枝杆菌与巨噬细胞间的相互作用。
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