公开(公告)号：CN110129315A

公开(公告)日：2019-08-16

申请号：CN201910460240.2

申请日：2019-05-30

Applicant: 北华大学

Inventor： 孙丽媛 ,  陈思秀 ,  刘玟妍 ,  艾金霞 ,  李明成 ,  赵云冬 ,  王艳双 ,  高丽君 ,  王雪松 ,  段思琪 ,  李盈诺 ,  王天添

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种从阿胶中快速提取DNA的优化方法。本方法使用DNA纯化柱代替酚、氯仿等有毒的有机溶剂，并经过数次优化，确定了提取阿胶中驴源性基因组DNA的最适条件，有效去除阿胶中的蛋白质成分，最高效率的从深加工的阿胶及阿胶制品中提取出严重降解的DNA。本方法所需试剂安全无毒害，操作简单、省时，可在90min内完成阿胶基因组DNA提取，经聚合酶链式反应、2％琼脂糖凝胶电泳后在78bp处出现特异性条带，克隆测序比对后，与GenBank中已登记的驴物种相似性为100％。本方法提取的DNA纯度高、浓度大，解决了阿胶及阿胶制品DNA难以提取的问题，为分子生物学鉴定提供了关键的技术支持。

公开(公告)号：CN108977552A

公开(公告)日：2018-12-11

申请号：CN201810922068.3

申请日：2018-08-14

Applicant: 北华大学

Inventor： 艾金霞 ,  孙丽媛 ,  高丽君 ,  李明成 ,  周亭亭 ,  王艳双 ,  张丽华 ,  段思琪 ,  刘玟妍

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6806

Abstract: 本发明涉及一种食用肉类鉴别阳性对照品及其制备办法和应用，属于PCR鉴别技术领域。该对照品的制备方法包括以下步骤：S1扩增：取经确证的牛、羊、猪、鸡、鸭和驴肉中的至少一种，分别用对应的引物对进行PCR扩增，以琼脂糖凝胶电泳分析扩增结果，分别回收特异性DNA条带；S2纯化：上述特异性DNA条带以吸附柱进行纯化；S3连接：纯化DNA产物与载体进行连接；S4转化：连接产物分别转化至大肠杆菌感受态细胞，获得转化细菌；S5培养：转化细菌涂板培养后进行阳性克隆菌落的筛选，挑取阳性菌落进行扩增，即得阳性对照品。上述食用肉类鉴别阳性对照品与常规肉类鉴别时采用的经鉴定阳性对照品相比，具有DNA信息明确、稳定、便于保存的优点，可作为标准物质使用。

公开(公告)号：CN108823284A

公开(公告)日：2018-11-16

申请号：CN201810646777.3

申请日：2018-06-21

Applicant: 北华大学

Inventor： 王艳双 ,  李明成 ,  孙丽媛 ,  赵云东 ,  王雪松 ,  周亭亭 ,  苑广信

IPC: C12Q1/6806 ,  C12Q1/6888 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明涉及中药检测技术领域，是一种兔睾丸DNA指纹鉴定试剂盒及鉴定方法。试剂盒包括：兔睾丸基因组DNA提取试剂和兔睾丸PCR鉴定试剂。鉴定方法包括：兔睾丸基因组DNA的提取、设计兔睾丸mtDNA Cyt b基因的特异性引物、建立PCR反应体系和反应程序、琼脂糖凝胶电泳检测兔睾丸DNA指纹图谱和结果判定等步骤。本发明利用兔睾丸独一无二的mtDNA Cytb基因序列，设计的特异性引物，能够准确、特异的鉴定兔睾丸与其易混品种；鉴定方法简便、快速；鉴定结果准确、可靠；鉴定试剂使鉴定方法更标准化、更规范化。

公开(公告)号：CN115109854A

公开(公告)日：2022-09-27

申请号：CN202110291503.9

申请日：2021-03-18

Applicant: 北华大学

Inventor： 王艳双 ,  李明成 ,  孙丽媛 ,  艾金霞 ,  苑广信 ,  王雪松 ,  张志杰

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及中药分子鉴定领域，是一种乳鹿分子身份证快速鉴定方法及检测试剂盒。鉴定方法包括：乳鹿基因组DNA的提取、设计乳鹿mtDNA Cyt b基因的特异性引物、建立PCR反应体系和反应条件、核酸试纸条鉴定乳鹿真伪图谱和结果判定。试剂盒包括：乳鹿基因组DNA提取试剂、乳鹿PCR鉴定试剂、阳性对照DNA克隆液、空白对照液及核酸试纸条。本发明利用乳鹿独一无二的mtDNA Cytb基因序列，设计的特异性引物，利用PCR技术的特异性、灵敏性特点，利用核酸试纸条技术的简便、快速、低成本优势，所建立的鉴定方法能够特异、准确、快速地鉴定乳鹿与其易混品种；所研制的试剂盒能够使鉴定方法更标准化、更规范化。