公开(公告)号：CN111206103A

公开(公告)日：2020-05-29

申请号：CN201811395719.4

申请日：2018-11-21

Applicant: 北华大学

Inventor： 李明成 ,  孙丽媛 ,  艾金霞 ,  高丽君 ,  王艳双 ,  王雪松 ,  赵云东

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明涉及中药检测技术领域，是一种牛鞭、驴鞭及马鞭多重PCR检测试剂盒，其特征是由鉴定反应、阳性对照反应和阴性对照反应三部分体系组成。总体积为100μL，含有缓冲液，dNTP，引物1、引物2和引物3，Taq DNA聚合酶，模板DNA提取液，双蒸馏水补齐至100μL。一种牛鞭、驴鞭及马鞭多重PCR检测鉴定方法是设计合成牛鞭、驴鞭及马鞭三对特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤。判断标准：琼脂糖凝胶出现扩增长度为254bp的是牛鞭，出现扩增长度为447bp的是驴鞭，出现扩增长度为595bp的是马鞭。牛鞭、驴鞭及马鞭多重PCR检测试剂盒及鉴定方法能够同时准确区别牛鞭、驴鞭及马鞭。

公开(公告)号：CN110714006A

公开(公告)日：2020-01-21

申请号：CN201910465768.9

申请日：2019-05-31

Applicant: 北华大学

Inventor： 王艳双 ,  李明成 ,  孙丽媛 ,  艾金霞 ,  赵云东 ,  周亭亭 ,  苑广信 ,  李盈诺

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明涉及中药现代化研究领域，是一种使用分子克隆及基因测序技术制备川贝母对照药材DNA克隆液的方法。该方法包括：川贝母对照药材基因组DNA的提取，目的基因PCR扩增和回收；目的基因与PGM-T载体连接组成重组DNA分子；重组DNA分子转化到DH5α感受态细胞中；“蓝-白斑”筛选出阳性菌落；提取重组质粒DNA，PCR扩增验证目的基因的正确性；目的基因序列测定与川贝母靶基因进行比对等步骤。本发明能够准确无误的制备出川贝母对照药材DNA克隆液。直接反映贝母独一无二的DNA序列，检测结果具有高度的稳定性、可靠性。并且使得川贝母对照品取之不尽用之不竭，节约更多的正品川贝母用于临床治病救人。

公开(公告)号：CN108823284A

公开(公告)日：2018-11-16

申请号：CN201810646777.3

申请日：2018-06-21

Applicant: 北华大学

Inventor： 王艳双 ,  李明成 ,  孙丽媛 ,  赵云东 ,  王雪松 ,  周亭亭 ,  苑广信

IPC: C12Q1/6806 ,  C12Q1/6888 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明涉及中药检测技术领域，是一种兔睾丸DNA指纹鉴定试剂盒及鉴定方法。试剂盒包括：兔睾丸基因组DNA提取试剂和兔睾丸PCR鉴定试剂。鉴定方法包括：兔睾丸基因组DNA的提取、设计兔睾丸mtDNA Cyt b基因的特异性引物、建立PCR反应体系和反应程序、琼脂糖凝胶电泳检测兔睾丸DNA指纹图谱和结果判定等步骤。本发明利用兔睾丸独一无二的mtDNA Cytb基因序列，设计的特异性引物，能够准确、特异的鉴定兔睾丸与其易混品种；鉴定方法简便、快速；鉴定结果准确、可靠；鉴定试剂使鉴定方法更标准化、更规范化。