含人组织因子途径抑制因子和GFP的真核双表达载体及构建方法

    公开(公告)号:CN101955974A

    公开(公告)日:2011-01-26

    申请号:CN200910070830.0

    申请日:2009-10-16

    Abstract: 本发明公开了含人组织因子途径抑制因子和GFP的真核双表达载体及构建方法,载体是用下述方法制成:以序列表SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所述序列为PCR引物,以pIRES-TFPI为模板,扩增出人组织因子途径抑制因子基因阅读框架,回收得SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列,与pIRES2-AcGFP1-Nuc加入T4连接酶进行反应制成。本发明的载体,使得TFPI和GFP的基因从同一个双顺反子mRNA互不干扰地同时表达,实现了通过观察GFP即可确定TFPI基因表达的目的,同时经检测证明了该载体不但能够在细胞内互不干扰的同时表达TFPI和GFP基因而且能够分泌TFPI蛋白到细胞外。

    应用生物条码与基因芯片检测蛋白浓度的方法

    公开(公告)号:CN101852808A

    公开(公告)日:2010-10-06

    申请号:CN201010175088.2

    申请日:2010-05-18

    Abstract: 本发明公开了应用生物条码与基因芯片检测蛋白浓度的方法,步骤:(1)分别设计合成基因芯片用探针和扫描用生物条码;(2)用待测蛋白抗原的单克隆抗体修饰磁性微球;(3)用待测蛋白抗原的多克隆抗体与扫描用生物条码标记纳米金;(4)基因芯片制备;(5)将步骤(2)的产物与待测蛋白抗原混合并结合;(6)将步骤(5)的产物与步骤(3)的产物混合并结合;磁性分离,除去未与步骤(5)的产物结合的步骤(3)的产物部分;(7)将三(2-羧乙基)膦盐酸盐的水溶液加入步骤(6)的产物中,磁性分离,分离出上清液;(8)将上清液与基因芯片进行杂交并检测。实验证实其本发明方法的可行性、特异性及高通量。其灵敏度可达fM水平。

    一种多功能无载体自组装纳米佐剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN116350776A

    公开(公告)日:2023-06-30

    申请号:CN202310334420.2

    申请日:2023-03-31

    Abstract: 本发明公开了一种多功能无载体自组装纳米佐剂及其制备方法和应用,该制备方法包括将氯化亚铁四水合物水溶液、CpG水溶液和去离子水混匀后进行反应、离心、洗涤,得到沉淀物1;将沉淀物1进行重悬,再加入DOTAP水溶液进行震荡反应、离心、洗涤,得到沉淀物2;将沉淀物2进行重悬,再加入盐酸多巴胺Tris‑HCl溶液进行震荡反应、离心、洗涤,收集沉淀即得所述纳米佐剂;该纳米佐剂联合光热治疗能够增加肿瘤部位树突状细胞、辅助性T淋巴细胞、细胞毒性T淋巴细胞和NK细胞的浸润,同时减少调节性T细胞和M2/M1型肿瘤相关巨噬细胞的比例,从而改善免疫抑制性肿瘤微环境;其还可以引发系统性免疫应答以及抑制原发肿瘤、产生免疫记忆效应、阻止肿瘤转移。

    一种具有抗原双捕获功能的聚合物囊泡及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114712525A

    公开(公告)日:2022-07-08

    申请号:CN202210415563.1

    申请日:2022-04-20

    Abstract: 本发明公开了一种具有抗原双捕获功能的聚合物囊泡及其制备方法和应用,该方法为将PCL‑PEG‑PCL和疏水性IMQ溶于有机溶剂,去除有机溶剂形成薄膜;将薄膜干燥后进行水化,加入碳酸氢钠混匀,进行超声处理并透析,收集透析后溶液;将DOTAP、DSPE‑PEG2K‑Mal、DSPE‑PEG5K‑Mannose和MPLA溶于有机溶剂,形成薄膜,再将透析后溶液加入薄膜中水化;将水化后的混合物混匀,在冰浴条件下超声处理;本发明制备得到的聚合物囊泡具有抗原捕获作用,同时释放IMQ,能够促进BMDCs的活化和成熟以及溶酶体逃逸,有效激活CD4+T细胞和CD8+T细胞细胞免疫能力,产生强大的T细胞杀伤效应,同时促进细胞因子IFN‑γ和TNF‑α的产生,并产生长期免疫记忆效果。

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