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公开(公告)号：CN101955974A
公开(公告)日：2011-01-26
申请号：CN200910070830.0
申请日：2009-10-16
Applicant: 中国医学科学院生物医学工程研究所
Abstract: 本发明公开了含人组织因子途径抑制因子和GFP的真核双表达载体及构建方法，载体是用下述方法制成：以序列表SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所述序列为PCR引物，以pIRES-TFPI为模板，扩增出人组织因子途径抑制因子基因阅读框架，回收得SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列，与pIRES2-AcGFP1-Nuc加入T4连接酶进行反应制成。本发明的载体，使得TFPI和GFP的基因从同一个双顺反子mRNA互不干扰地同时表达，实现了通过观察GFP即可确定TFPI基因表达的目的，同时经检测证明了该载体不但能够在细胞内互不干扰的同时表达TFPI和GFP基因而且能够分泌TFPI蛋白到细胞外。
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