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公开(公告)号:CN112661817B
公开(公告)日:2022-05-17
申请号:CN202011556967.X
申请日:2020-12-25
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/01 , C07K16/08 , C07K16/06 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一株针对ASFV p54蛋白单克隆抗体的制备方法、表位鉴定以及应用。通过将分析p54蛋白的优势抗原表位,选取合适的区域克隆到pET‑30a载体中,构建出原核表达载体pET‑30a‑p54‑JD,将表达的p54蛋白纯化后免疫Balb/c小鼠,经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞,然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗p54蛋白的单克隆抗体,并鉴定了该抗体所对应的p54蛋白抗原表位。
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公开(公告)号:CN108753739B
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN201810627238.5
申请日:2018-06-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N7/01 , A61K39/245 , A61P31/22 , A61K39/187 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病毒弱毒株,其插入的外源序列包括:CMV启动子、猪瘟病毒E2蛋白的信号肽及编码E2蛋白第1‑342位氨基酸和SV40 polyA的核苷酸序列。本发明还公开了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病毒弱毒株的制备方法和应用。本发明的重组伪狂犬病毒弱毒株,对伪狂犬病毒及猪瘟病毒均有较好的免疫保护效果,适于作为防治伪狂犬病及猪瘟的疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN112661817A
公开(公告)日:2021-04-16
申请号:CN202011556967.X
申请日:2020-12-25
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/01 , C07K16/08 , C07K16/06 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一株针对ASFV p54蛋白单克隆抗体的制备方法、表位鉴定以及应用。通过将分析p54蛋白的优势抗原表位,选取合适的区域克隆到pET‑30a载体中,构建出原核表达载体pET‑30a‑p54‑JD,将表达的p54蛋白纯化后免疫Balb/c小鼠,经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞,然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗p54蛋白的单克隆抗体,并鉴定了该抗体所对应的p54蛋白抗原表位。
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公开(公告)号:CN110735006A
公开(公告)日:2020-01-31
申请号:CN201911216202.9
申请日:2019-12-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种非洲猪瘟TaqMan实时荧光定量PCR检测试剂,本发明建立基于ASFV p17蛋白的编码基因D177L的TaqMan实时荧光定量PCR检测体系,通过条件优化得到较为理想的扩增曲线和检测效果,与传统PCR检测方法相比,具有特异性更强、灵敏度更高、重复性更好、自动化程度更高反应更快等优点,且不需要电泳及紫外检测耗时更短、结果更加直观。
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公开(公告)号:CN110408622A
公开(公告)日:2019-11-05
申请号:CN201910467239.2
申请日:2019-05-31
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种猪IRAV基因,该基因序列包含编码SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,本发明还公开了猪IRAV蛋白质,该蛋白质具有SEQ ID NO.2所示氨基酸序列,本发明还公开了抗猪IRAV蛋白的单克隆抗体。本发明的猪IRAV基因、蛋白质,具有抗病毒活性,适于研制抗病毒药物,应用前景广阔;本发明的单克隆抗体,与猪IRAV蛋白具有很好的特异性反应,为进一步研究猪IRAV蛋白的生物学功能奠定基础。
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公开(公告)号:CN118005778A
公开(公告)日:2024-05-10
申请号:CN202410208793.X
申请日:2024-02-26
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明提供一株阻断性非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备与应用。所述杂交瘤细胞株分泌的抗体,能识别真核细胞中的p30蛋白和用于western blotting检测p30蛋白,ASFV阳性猪血清对该单克隆抗体与p30抗原结合具有抑制作用,能用于建立ASFV抗体竞争ELISA检测方法。本发明涉及的p30单克隆抗体细胞株及应用,为我国ASFV检测技术开发提供坚实的物质和技术支撑。
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公开(公告)号:CN116589565A
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202310760995.0
申请日:2023-06-26
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供一株非洲猪瘟病毒p72单克隆抗体的制备及其在检测p72蛋白和建立非洲猪瘟病毒乳胶层析试纸条检测方法中的应用。本发明制备了一株ASFV p72蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株R3E9,确定了该株单抗的可变区序列。该株单抗,可用于IFA,识别杆状病毒表达的p72蛋白和ASFV感染细胞中的p72蛋白;也可用于western blotting,识别变性的p72蛋白。以该株单抗制备的非洲猪瘟病毒乳胶层析试纸条,具有良好的特异性和灵敏性,无需辅助设备即可实现ASFV现场快速检测,为我国猪场快速诊断ASFV提供重要技术支撑,将增强我国防控ASFV能力。
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公开(公告)号:CN112062831B
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202010629062.4
申请日:2020-07-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/705 , C07K16/28 , C07K16/06 , A61K39/395 , A61P31/14 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一株CD163蛋白单克隆抗体MAb的制备方法、表位鉴定以及应用。通过将CD163对于PRRSV复制具有重要作用的功能结构域SRCR5‑6克隆到pColdI载体中,构建出原核表达载体中携带His标签的CD163 SRCR5‑6的蛋白,纯化SRCR5‑6蛋白免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞同和制备杂交瘤细胞获得抗猪CD163蛋白的单克隆抗体,且对抗体进行了表位鉴定。
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公开(公告)号:CN113444837A
公开(公告)日:2021-09-28
申请号:CN202110607667.8
申请日:2021-06-01
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种非洲猪瘟病毒TaqMan荧光定量PCR检测试剂盒及其应用,该方法仅特异性扩增ASFV,不与CSFV、PRRSV、PEDV、PRV等发生交叉反应,特异性较高。该方法的最低检测数为10个拷贝,本研究建立基于ASFV E248R基因的TaqMan实时荧光定量检测方法是一种特异、灵敏、高效的可应用于临床的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。
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公开(公告)号:CN110904152A
公开(公告)日:2020-03-24
申请号:CN201911159887.8
申请日:2019-11-23
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus,ASFV)p54蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组质粒的构建方法,以及根据该重组质粒构建的基因工程疫苗及构建方法。对rPRRSV-p54感染孔进行间接免疫荧光,发现视野下出现了抗PRRSV N蛋白的特异性荧光及抗ASFV p54蛋白的特异性荧光。说明该表达非洲猪瘟病毒p54蛋白的重组PRRSV可以保证外源蛋白ASFV的p54蛋白得到良好的高效的稳定的表达。而有研究表明p54是重要的抗原蛋白,能够用于ASF的疫苗研制。
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