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公开(公告)号：CN101367870A
公开(公告)日：2009-02-18
申请号：CN200810137277.3
申请日：2008-10-09
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 牛轮状病毒重组VP6蛋白抗原及其制备方法，它涉及一种牛轮状病毒重组蛋白抗原及其制备方法。它解决了目前对犊牛轮状病毒腹泻的诊断方法存在着费时、费力又不能快速诊断的弊端，以及过程繁琐、又需要昂贵的分子生物学试剂及相应的仪器设备的问题。牛轮状病毒重组VP6蛋白抗原由重组载体质粒转化的大肠杆菌表达。制备方法：一、VP6基因的PCR扩增；二、获得重组质粒；三、获得重组菌；四、重组VP6蛋白抗原的诱导表达；五、纯化。本发明为血清学方法诊断犊牛轮状病毒腹泻提供了诊断抗原，具有极强的特异性和准确性。使用本发明牛轮状病毒重组VP6蛋白抗原、采用荧光抗体试验和酶联免疫吸附等血清学试验具有诊断方法省时、省力、快速的优点，且不需要昂贵的试剂及设备。
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公开(公告)号：CN104774782B
公开(公告)日：2017-12-19
申请号：CN201410817717.5
申请日：2014-12-25
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了鸡源粪肠球菌分离株及其应用。本发明从20周龄健康鸡盲肠中分离得到一株性能优异的粪肠球菌分离株B10，其微生物保藏编号为：CCTCC No：M 2014488，分类命名为MDXEF‑1。该分离株有优异的耐酸性能和耐胆盐性能，抑菌谱广，对常见致病菌均有明显的抑制作用；分离株MDXEF‑1对多种抗生素敏感，将该菌饲喂给肉仔鸡后可以显著增加鸡的体重，促进鸡的生长，能够作为促进禽类生长的饲料添加剂。本发明分离株MDXEF‑1可以作为宿主菌而且在不外加nisin诱导物的情况下高效表达异源蛋白，适宜于生产中大规模发酵应用，能作为饲用乳酸菌疫苗运送载体。
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公开(公告)号：CN104774782A
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201410817717.5
申请日：2014-12-25
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了鸡源粪肠球菌分离株及其应用。本发明从20周龄健康鸡盲肠中分离得到一株性能优异的粪肠球菌分离株B10，其微生物保藏编号为：CCTCC No：M2014488，分类命名为MDXEF-1。该分离株有优异的耐酸性能和耐胆盐性能，抑菌谱广，对常见致病菌均有明显的抑制作用；分离株MDXEF-1对多种抗生素敏感，将该菌饲喂给肉仔鸡后可以显著增加鸡的体重，促进鸡的生长，能够作为促进禽类生长的饲料添加剂。本发明分离株MDXEF-1可以作为宿主菌而且在不外加nisin诱导物的情况下高效表达异源蛋白，适宜于生产中大规模发酵应用，能作为饲用乳酸菌疫苗运送载体。
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公开(公告)号：CN104543404A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201510030943.3
申请日：2015-01-17
Applicant: 东北农业大学
IPC: A23K1/16
Abstract: 本发明公开了一种去除兽药残留的天然化合物饲料添加剂，按重量份配比如下：原花青素、虾青素、白藜芦醇、姜黄素、大蒜素、紫菜多糖、紫菜多酚、藻胆蛋白、茶多酚、槲皮素、壳聚糖和橘皮素各取1份，使用时，饲料添加剂与饲料的比例为1∶100-1∶500。本发明可有效的降低畜或禽体内的替米考星、氟苯尼考、头孢噻呋钠、苯丙咪唑、恩诺沙星、硫酸庆大霉素、土霉素、磺胺二甲氧嘧啶和氢溴酸常山酮的残留，且具有无污染、无公害的特点，可用于经兽药使用和环境污染等因素所致兽药残留超标的食品动物去除兽药残留，进而保障动物性食品卫生安全。
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公开(公告)号：CN102732502A
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201210180721.6
申请日：2012-06-04
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种无选择标记残留的乳酸菌基因组修饰操作系统及其应用，属于生物技术领域。具体地，本发明提供的载体系统包括：一个温度敏感型、大肠杆菌-革兰氏阳性细菌宽宿主范围穿梭型辅助质粒；一个用于构建温度敏感型、大肠杆菌-革兰氏阳性细菌宽宿主范围穿梭型基因打靶主质粒的中间质粒；一个经过以上二者所构建的用于任意位点基因修饰操作的基础乳酸菌菌株。本发明所提供的无选择标记残留的快速双质粒基因打靶载体系统可以获取任意位点基因缺失或插入的转基因重组乳酸菌，所产生的转基因乳酸菌或重组基因工程乳酸菌在益生菌开发和基因工程益生菌制剂的研究和应用中具有广泛的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN100567477C
公开(公告)日：2009-12-09
申请号：CN200710089251.1
申请日：2007-03-16
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供的是一种表达猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteristisvirus，TGEV)纤突S蛋白的重组乳酸乳球菌的方法。根据猪传染性胃肠炎病毒S蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点，设计一对引物，进行PCR，获得含有TGEV S基因4个主要抗原位点的2007bp目的片段，将其与分泌表达的载体质粒pNZ8112进行连接，通过电转化进入宿主菌乳酸乳球菌NZ9000细胞内，在乳链菌肽的诱导下进行表达。本发明中构建了冠状病毒TGEV S蛋白乳酸乳球菌表达载体系统，表达了含有TGEV S蛋白A、B、C、D四个主要抗原位点的约66KDa的目的蛋白，免疫印迹实验和间接免疫荧光试验均表明，所表达的外源蛋白能够与TGEV免疫血清发生反应，表明重组S蛋白与TGEV天然抗原一样具有相同的抗原性。
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公开(公告)号：CN101368167A
公开(公告)日：2009-02-18
申请号：CN200810137276.9
申请日：2008-10-09
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/62 , C12N15/74 , A61K39/295 , A61K39/187 , A61K39/12 , A61P31/14 , A61P31/20 , C12R1/245
Abstract: 共表达猪瘟病毒T细胞表位与猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌及其制备方法，它涉及一种共表达猪瘟病毒T细胞表位与猪细小病毒VP2蛋白的重组菌及其制备方法。共表达猪瘟病毒T细胞表位与猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌为重组载体质粒pPG－2－VP2－E290转化的干酪乳杆菌。制备方法：一、PCR扩增VP2－E290基因；二、得到重组载体质粒；三、电转化干酪乳杆菌；四、诱导。本发明共表达猪瘟病毒T细胞表位与猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌可作为多价、多联，同时防治猪细小病毒和猪瘟的口服疫苗。本发明针对病毒经黏膜感染的特点，能有效的刺激黏膜免疫系统产生局部免疫应答，进而引起全身性系统免疫反应的疫苗。
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公开(公告)号：CN101058798A
公开(公告)日：2007-10-24
申请号：CN200710089251.1
申请日：2007-03-16
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供的是一种表达猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteristisvirus，TGEV)纤突S蛋白的重组乳酸乳球菌的方法。根据猪传染性胃肠炎病毒S蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点，设计一对引物，进行PCR，获得含有TGEV S基因4个主要抗原位点的2007bp目的片段，将其与分泌表达的载体质粒pNZ8112进行连接，通过电转化进入宿主菌乳酸乳球菌NZ9000细胞内，在乳链菌肽的诱导下进行表达。本发明中构建了冠状病毒TGEV S蛋白乳酸乳球菌表达载体系统，表达了含有TGEV S蛋白A、B、C、D四个主要抗原位点的约66KDa的目的蛋白，免疫印迹实验和间接免疫荧光试验均表明，所表达的外源蛋白能够与TGEV免疫血清发生反应，表明重组S蛋白与TGEV天然抗原一样具有相同的抗原性。
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公开(公告)号：CN103555754B
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201310521441.1
申请日：2013-10-29
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种干酪乳杆菌菌影及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明选择干酪乳杆菌作为研究对象，通过分离干酪乳杆菌的噬菌体，预测并克隆其裂解基因，将含有克隆得到的裂解基因的重组载体转化干酪乳杆菌，诱导裂解基因表达后制成菌影。本发明以干酪乳杆菌菌影作为抗原传递载体使用，做到了真正意义上的安全可靠。此外，干酪乳杆菌菌影可通过发酵大量生产，冻干后在室温下可保存较长时间，为进一步应用于生产实践降低了成本，也为进一步设计新型安全有效的药物，特别是疫苗的递送系统，从而应用于预防及治疗疾病提供了一种新的思路和方法。
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公开(公告)号：CN104593397A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201510016549.4
申请日：2015-01-12
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/62 , C07K19/00 , C12N1/21 , A61K39/116 , A61K39/108 , A61K48/00 , A61P31/04 , A61P1/12 , C12R1/19 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种优化的产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)多价抗原基因序列及其在预防断奶仔猪腹泻中的应用，属于生物技术领域。本发明根据乳酸乳球菌密码子使用偏好，大片段合成了包含引起断奶仔猪腹泻的常见ETEC优势血清型的F4+的主要结构蛋白FaeG、F18+的受体结合域RBD和毒素Stx2e、STa突变体、LT B亚单位、STb 6种抗原基因以及分别靶向M细胞、肠道细胞的分子肽CO1、YadA31基因的多价抗原基因序列，各基因间由GGGGS连接而成。该基因不但可以用于构建乳酸菌活载体疫苗，显著提高目的蛋白的分泌表达量，具有良好的免疫原性和保护效应，而且也适用于在大肠杆菌中高效表达，实验证明，其包涵体具有良好免疫活性，可作为预防断奶仔猪F4+、F18+ETEC感染的疫苗。
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