抗魏氏梭菌病转基因植物疫苗及其制作方法

    公开(公告)号:CN102008720A

    公开(公告)日:2011-04-13

    申请号:CN201010231142.0

    申请日:2010-07-20

    CPC classification number: Y02A50/472

    Abstract: 抗魏氏梭菌病转基因植物疫苗及其制作方法。目前免疫接种抗魏氏梭菌病的疫苗保护率较低。本发明包括:(1)以含编码魏氏梭菌毒素的质粒或病料为模板,利用PCR或RT-PCR扩增获得魏氏梭菌毒素基因,将获得的魏氏梭菌毒素基因和Ti或Ri质粒分别进行酶切,回收目的基因和植物表达载体片段,连接并转化大肠杆菌,对重组Ti或Ri质粒进行酶切、PCR和测序鉴定,用重组质粒转化根瘤农杆菌或发根农杆菌,筛选、鉴定阳性重组农杆菌;(2)植物种子经春化、萌发、剪接,获得外植体,用步骤(1)中重组的农杆菌分别侵染外植体,通过筛选、继代、生根、移栽,获得转化植株,筛选鉴定转基因阳性植株。

    5’-RACE接头序列添加方法及接头序列和5’端未知基因完整编码序列的扩增方法

    公开(公告)号:CN101864413A

    公开(公告)日:2010-10-20

    申请号:CN201010184510.0

    申请日:2010-05-27

    Abstract: 5’-RACE接头序列添加方法及接头序列和5’端未知基因完整编码序列的扩增方法,它涉及一种接头序列添加方法及接头序列和基因完整编码序列的扩增方法。它解决现有接头序列添加方法存在的对mRNA 5’末端信息的完整性没有选择性及模板复杂度高等缺陷。5’-RACE接头序列添加:一、根据目的基因与目的物种设计特异性逆转录引物和接头序列;二、逆转录添加接头序列。接头序列如SEQ ID NO:10所示。5’端未知基因完整编码序列扩增:一、设计引物;二、逆转录并添加接头;三、巢式PCR扩增;四、测序,分析。本发明5’-RACE接头序列添加方法具有对mRNA 5’末端信息的完整性有选择性及基因克隆效率高等优点。

    设计、合成的符合大豆密码子用法的高甲硫氨酸蛋白基因

    公开(公告)号:CN1749398A

    公开(公告)日:2006-03-22

    申请号:CN200410043869.0

    申请日:2004-09-15

    Abstract: 本发明提供的是一种设计、合成的符合大豆密码子用法的高甲硫氨酸蛋白基因。它是依据大豆密码子用法和高表达优越密码子分析结果,在保留富含甲硫氨酸玉米醇溶蛋白基因编码氨基酸序列不变的情况下,使用大豆的高表达优越密码子和偏爱密码子替换富含甲硫氨酸玉米醇溶蛋白基因密码子,得到具有大豆密码子使用特点的高甲硫氨酸蛋白基因序列,命名为SCMRP基因;采用ABI3900高通量DNA合成仪合成SCMRP基因,基因合成产物克隆到质粒pUC18上,转化到大肠杆菌DH5α中保存所得到的基因。其编码的蛋白质中含硫氨基酸含量高达26.4%,其所采用的密码子符合大豆密码子用法。因此,该基因可以在大豆种子中高水平表达,显著提高大豆含硫氨基酸含量。

    一种野生大豆抗盐蛋白激酶GsCBRLK及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN101845421A

    公开(公告)日:2010-09-29

    申请号:CN201010183129.2

    申请日:2010-05-26

    Abstract: 一种野生大豆抗盐蛋白激酶GsCBRLK及其编码基因与应用,它涉及一种抗盐蛋白激酶及其编码基因与应用。本发明解决了现有的蛋白激酶导入到植物细胞中,所获得转基因植株的高盐胁迫耐受能力弱的问题。野生大豆抗盐蛋白激酶GsCBRLK的氨基酸残基序为序列表中的SEQ ID No:1;野生大豆抗盐蛋白激酶GsCBRLK编码基因序列表中的SEQ ID No:2;野生大豆抗盐蛋白激酶基因GsCBRLK利用植物表达载体,将GsCBRLK的编码基因导入植物细胞,以获得对高盐胁迫耐受能力增强的转基因细胞系及转基因植株。本发明的野生大豆抗盐蛋白激酶导入到植物细胞中,所获得转基因植株的高盐胁迫耐受能力强。

    一种与植物抗逆性相关蛋白GsNAC019及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN106243209B

    公开(公告)日:2022-05-17

    申请号:CN201610817663.1

    申请日:2016-09-12

    Abstract: 本发明公开了一种与植物抗逆性相关蛋白GsNAC019及其编码基因与应用。本发明的提供的GsNAC019蛋白是如下a)或b)或c)的蛋白质:a)氨基酸序列是序列2所示的蛋白质;b)在序列2所示的蛋白质的N端和/或C端连接标签得到的融合蛋白质;c)将序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质。实验证明,将GsNAC019基因超表达于拟南芥中,得到的转基因拟南芥对碳酸盐胁迫的耐性明显高于野生型拟南芥,说明GsNAC019蛋白具有调控植物耐碱性的功能,可以为培育具有碳酸盐胁迫耐性的转基因植物的研究奠定基础。

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