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公开(公告)号：CN108148814B
公开(公告)日：2021-01-15
申请号：CN201711353547.X
申请日：2017-12-15
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种用于检测牛轮状病毒的双抗体夹心ELISA诊断试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有由菌种保藏编号为CGMCC NO.14726的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体4D10。此外，本发明以纯化的兔抗BRV多抗为捕获抗体，以4D10单抗为检测抗体，建立了BRV双抗体夹心ELISA方法。敏感性实验表明，该方法对BRV的最低检出量为9.884×104TCID50/mL；特异性实验结果表明，该方法具有良好的特异性，与PoRV、PEDV、BPV及TGEV均无交叉反应；批间和批内重复性实验结果显示，该方法具有良好的重复性。使用建立的双抗体夹心ELISA方法对95份临床样品进行检测，与RT‑PCR方法相比，符合率为100％。可见本发明建立的双抗体夹心ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性，可用于BRV的快速检测。
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公开(公告)号：CN107271667B
公开(公告)日：2019-01-22
申请号：CN201710415171.4
申请日：2017-06-05
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种蓝舌病病毒型特异性竞争ELISA检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括以下两组组分：组分I中包括包被蓝舌病病毒抗原I的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体I，所述的单克隆抗体I由杂交瘤细胞株8B3G11分泌产生；组分II中包括包被蓝舌病病毒抗原II的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体II，所述的单克隆抗体II由杂交瘤细胞株8B5D4分泌产生。本发明利用制备的两株8型BTV VP2单克隆抗体8B5D4以及8B3G11建立了蓝舌病病毒型特异性检测的联合竞争ELISA检测方法，该检测方法短时间内可以用于初步区分不同型蓝舌病感染的动物血清，实验条件要求低，适合于大规模的BTV血清抗体检查。
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公开(公告)号：CN111073859B
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN201911280787.0
申请日：2019-12-09
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种检测牛细小病毒的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用。本发明使用纯化后的兔抗BPV VP2蛋白多克隆抗体作为捕获抗体，使用由保藏号为:CGMCC No.18896的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体作为检测抗体，建立了双抗体夹心ELISA方法。特异性试验结果表明该方法特异性良好，与BRV、PRV、PEDV和TGEV均不发生反应。灵敏性试验表明该方法对病毒的最低检出量为3.125×102.8TCID50/mL。重复性试验表明该方法变异系数均小于10％，确定该方法具有良好的重复性。通过对临床样品的检测发现，双抗体夹心ELISA方法与PCR方法的检测结果一致，符合率为100％。本发明的提出可用于牛细小病毒的诊断，并为牛细小病毒感染的防控提供了一种快速检测方法和监测手段。
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公开(公告)号：CN107179408B
公开(公告)日：2019-01-22
申请号：CN201710318544.6
申请日：2017-05-08
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种用于蓝舌病病毒型特异性检测的竞争ELISA检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括以下两组组分：组分I中包括包被蓝舌病病毒抗原I的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体I，所述的单克隆抗体I由杂交瘤细胞株1B6分泌产生；组分II中包括包被蓝舌病病毒抗原II的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体II，所述的单克隆抗体II由杂交瘤细胞株4A‑1G7分泌产生。本发明利用制备的两株4型BTV VP2单克隆抗体4A‑1G7以及1B6建立了蓝舌病病毒型特异性检测的联合竞争ELISA检测方法，该检测方法短时间内可以用于初步区分不同型蓝舌病感染的动物血清，实验条件要求低，适合于大规模的BTV血清抗体检查。
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公开(公告)号：CN107271667A
公开(公告)日：2017-10-20
申请号：CN201710415171.4
申请日：2017-06-05
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/577
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N33/558 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种蓝舌病病毒型特异性竞争ELISA检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括以下两组组分：组分I中包括包被蓝舌病病毒抗原I的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体I，所述的单克隆抗体I由杂交瘤细胞株8B3G11分泌产生；组分II中包括包被蓝舌病病毒抗原II的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体II，所述的单克隆抗体II由杂交瘤细胞株8B5D4分泌产生。本发明利用制备的两株8型BTV VP2单克隆抗体8B5D4以及8B3G11建立了蓝舌病病毒型特异性检测的联合竞争ELISA检测方法，该检测方法短时间内可以用于初步区分不同型蓝舌病感染的动物血清，实验条件要求低，适合于大规模的BTV血清抗体检查。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107179408A
公开(公告)日：2017-09-19
申请号：CN201710318544.6
申请日：2017-05-08
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/68
CPC classification number: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种用于蓝舌病病毒型特异性检测的竞争ELISA检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括以下两组组分：组分I中包括包被蓝舌病病毒抗原I的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体I，所述的单克隆抗体I由杂交瘤细胞株1B6分泌产生；组分II中包括包被蓝舌病病毒抗原II的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体II，所述的单克隆抗体II由杂交瘤细胞株4A‑1G7分泌产生。本发明利用制备的两株4型BTV VP2单克隆抗体4A‑1G7以及1B6建立了蓝舌病病毒型特异性检测的联合竞争ELISA检测方法，该检测方法短时间内可以用于初步区分不同型蓝舌病感染的动物血清，实验条件要求低，适合于大规模的BTV血清抗体检查。
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公开(公告)号：CN104593397A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201510016549.4
申请日：2015-01-12
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/62 , C07K19/00 , C12N1/21 , A61K39/116 , A61K39/108 , A61K48/00 , A61P31/04 , A61P1/12 , C12R1/19 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种优化的产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)多价抗原基因序列及其在预防断奶仔猪腹泻中的应用，属于生物技术领域。本发明根据乳酸乳球菌密码子使用偏好，大片段合成了包含引起断奶仔猪腹泻的常见ETEC优势血清型的F4+的主要结构蛋白FaeG、F18+的受体结合域RBD和毒素Stx2e、STa突变体、LT B亚单位、STb 6种抗原基因以及分别靶向M细胞、肠道细胞的分子肽CO1、YadA31基因的多价抗原基因序列，各基因间由GGGGS连接而成。该基因不但可以用于构建乳酸菌活载体疫苗，显著提高目的蛋白的分泌表达量，具有良好的免疫原性和保护效应，而且也适用于在大肠杆菌中高效表达，实验证明，其包涵体具有良好免疫活性，可作为预防断奶仔猪F4+、F18+ETEC感染的疫苗。
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公开(公告)号：CN103689247A
公开(公告)日：2014-04-02
申请号：CN201310594969.1
申请日：2013-11-22
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明涉及一种作为断乳仔猪饲料添加剂的表达乳铁蛋白重组乳酸菌组合物，其特征在于，所述组合物将戊糖乳杆菌（Lactobacillus pentosus KLDS1.0413）和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum KLDS1.0344）作为口服活载体，其中，戊糖乳杆菌和植物乳杆菌中均含有连接有PLF基因的穿梭表达载体pPG612.1。本发明可以替代抗生素，乳铁蛋白还能刺激肠道细胞的生长，增加肠道中有益菌群，如双歧杆菌和乳酸杆菌等的数量，减少大肠杆菌等有害菌群的繁殖，从而保障仔猪肠道健康发育，增强仔猪肠道对营养物质的消化、吸收能力，降低腹泻率，提高其生长性能，促进仔猪生长。
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公开(公告)号：CN109633173B
公开(公告)日：2022-02-22
申请号：CN201910008503.6
申请日：2019-01-04
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/531 , C12N15/66 , C12N15/81 , C07K14/08
Abstract: 本发明公开了一种用于检测IBDV抗体的免疫磁珠间接ELISA试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有偶联有IBDV VP3蛋白的免疫磁珠，其中，所述的IBDV VP3蛋白是通过毕赤酵母表达系统表达，纯化后获得。本发明利用毕赤酵母表达系统表达的重组VP3蛋白作为抗原，建立了一种新的检测IBDV血清抗体的免疫磁珠间接ELISA方法。与商品化IBDV血清抗体检测试剂盒相比较，操作过程比商品化IBDV血清抗体检测试剂盒节省了约1h，且显著节省了血清的用量。实验结果表明本发明以IBDV VP3重组蛋白作为抗原建立的检测鸡血清中IBDV抗体的免疫磁珠间接ELISA方法，具有良好的特异性和敏感性，重复性好，符合率高，能够缩短检测时间且操作简便。本发明的提出为抗鸡IBDV血清抗体的快速检测提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN110607282B
公开(公告)日：2021-05-25
申请号：CN201910788857.7
申请日：2019-08-26
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种牛细小病毒单克隆抗体及其在检测牛细小病毒感染中的应用。所述的单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.18301的杂交瘤细胞株分泌产生。此外本发明还提出了用于检测牛细小病毒感染的间接竞争ELISA试剂盒，并建立了相应的间接竞争ELISA检测方法。实验证明，本发明建立的间接竞争ELISA方法具有良好的敏感性、特异性和重复性，比间接ELISA方法和夹心ELISA方法的检测敏感度高出一个数量级。通过对临床样品检测，与PCR结果一致，表明该方法检测结果准确可靠。因此本发明可用于牛细小病毒感染的临床检测，尤其适用于检测早期感染和隐性感染时病毒含量低的病料，同时，也为牛细小病毒流行病学调查及疫情监控提供了一种可靠的方法。
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