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公开(公告)号:CN100372872C
公开(公告)日:2008-03-05
申请号:CN200610026662.1
申请日:2006-05-18
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种利血平分子印迹聚合物的制备方法,属于生物工程技术领域。具体为:首先将交联剂、功能单体、模板分子和引发剂溶解在致孔剂中,得到混合溶剂;将混合溶剂超声脱气;混合均匀后,通入氮气,氮气状态或抽真空状态下密封;进行聚合反应,分子印迹聚合物采用热引发;聚合反应结束后,将合成的分子印迹聚合物取出研磨、过筛后用有机溶剂除去模板分子,通过高效液相色谱-紫外检测,直到检测不到模板分子;将除去模板分子的聚合物,真空干燥,得到利血平特异的分子印迹聚合物。本发明制得的分子印迹聚合物能够简单、快速、高效分离纯化、富集生物样品中的利血平残留,可直接用于对利血平的特异选择性分离、高效富集。
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公开(公告)号:CN101063171A
公开(公告)日:2007-10-31
申请号:CN200710041121.0
申请日:2007-05-24
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种遗传改良大豆品系GTS40-3-2检测用标准质粒分子及其构建方法,所述标准质粒分子包含遗传改良大豆品系GTS40-3-2的品系特异性片段和大豆内标准基因Lectin特异性片段;通过对遗传改良大豆品系GTS40-3-2的外源插入载体旁邻基因序列分析,设计品系特异性PCR引物扩增获得遗传改良大豆品系GTS40-3-2的品系特异性片段,以及大豆内标准基因特异性序列;通过分子克隆的方法构建到一个质粒分子中而成的人工重组质粒分子pMD-RRS。本发明中构建的标准质粒分子完全可以代替遗传改良大豆品系GTS40-3-2阳性标准品,该标准质粒分子完全适用于对遗传改良大豆品系GTS40-3-2样品的品系特异性定量PCR分析和检测。
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公开(公告)号:CN1814805A
公开(公告)日:2006-08-09
申请号:CN200510110990.5
申请日:2005-12-01
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种H5、H7、H9亚型禽流感病毒的实时荧光定量PCR检测方法,属于生物工程技术领域。本发明包括如下步骤:标准分子的构建;病毒特异性定量PCR引物和探针设计;病毒样本RNA的提取;对提取的样本RNA进行反转录聚合酶链式反应得到样本cDNA;M基因定量PCR检测方法的优化和建立;禽流感病毒亚型特异性定量PCR检测方法的优化和建立。本发明检测灵敏度达到20个拷贝的病毒分子,对于单个样本检测时间为2个小时,操作简便,并且可以同时进行大批量的样本分析,较传统的利用鸡胚进行病毒分离培养的方法在灵敏度利检测时间方面有了极大的提高,对于禽流感病毒的监控、鉴定具有很大的帮助和很高的应用前景。
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公开(公告)号:CN1724689A
公开(公告)日:2006-01-25
申请号:CN200510027942.X
申请日:2005-07-21
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种遗传改良玉米品系MON863的品系特异性PCR检测方法,本发明适合于MON863玉米及其加工产品的品系特异性PCR检测,其中包括以玉米基因组和外源插入载体5’端的CaMV35S启动子的邻接区DNA序列为目的扩增片段的5’端品系特异性检测方法;以外源插入载体3’端的tahsp 17 3’终止子和玉米基因组的邻接区DNA序列为目的扩增片段的3’端品系特异性检测方法。通过①MON863玉米的外源插入载体旁邻基因序列分析;②品系特异性定性PCR引物和定量PCR引物和探针设计;③品系特异性定性、定量PCR体系的建立和优化;④品系特异性定性、定量PCR检测方法验证,来建立遗传改良玉米品系MON863的品系特异性PCR检测平台。
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公开(公告)号:CN112501310B
公开(公告)日:2022-08-12
申请号:CN202011435657.2
申请日:2020-12-10
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛源性成分的LAMP检测引物组及检测方法。该方法包括以下步骤:1)设计合成引物;所述引物由上游内部引物FIP、下游内部引物BIP、上游外部引物F3和下游外部引物B3组成,所述引物的碱基序列如SEQ ID No:1~4;2)制备牛属北美野牛、奶牛、牦牛、水牛的DNA稀释液;3)配制LAMP反应体系并设定反应条件;4)进行LAMP方法特异性检测;5)进行LAMP方法灵敏度检测;6)通过电泳是否有梯形条带来确定待检样品是否属于牛源性。本发明建立的方法具有快速、高效、灵敏、准确等优点,在动物源性成分食品监管和检验检疫工作中有实际应用价值,尤其适用于基层实验室和现场检测的推广和应用。
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公开(公告)号:CN112501310A
公开(公告)日:2021-03-16
申请号:CN202011435657.2
申请日:2020-12-10
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛源性成分的LAMP检测引物组及检测方法。该方法包括以下步骤:1)设计合成引物;所述引物由上游内部引物FIP、下游内部引物BIP、上游外部引物F3和下游外部引物B3组成,所述引物的碱基序列如SEQ ID No:1~4;2)制备牛属北美野牛、奶牛、牦牛、水牛的DNA稀释液;3)配制LAMP反应体系并设定反应条件;4)进行LAMP方法特异性检测;5)进行LAMP方法灵敏度检测;6)通过电泳是否有梯形条带来确定待检样品是否属于牛源性。本发明建立的方法具有快速、高效、灵敏、准确等优点,在动物源性成分食品监管和检验检疫工作中有实际应用价值,尤其适用于基层实验室和现场检测的推广和应用。
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公开(公告)号:CN106854674A
公开(公告)日:2017-06-16
申请号:CN201510901558.1
申请日:2015-12-08
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开一种生物医学技术领域的基于毛细管微阵列的核酸高通量快速检测方法;所述方法为利用毛细管组装、浇铸、机械加工等方式加工出微阵列,内含若干亲水性垂直微管道,阵列的外表面采用化学方法进行超疏水性修饰;将若干组核酸扩增引物分别加入若干微管道中并干燥固定,将微阵列置于反应管中;然后利用特殊加样装置通过虹吸方式将核酸扩增反应组分一次性引入各微管道中,放入温控装置中进行扩增反应;通过在反应中连续测量或反应后一次测量微管道内的荧光信号分别实现实时检测和终点检测;扩增产物也可回收用于后续其它用途。本发明可在一次反应中快速方便地实现对多个核酸靶标的检测。本发明将在核酸多重检测、现场检测等领域有广泛的应用。
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公开(公告)号:CN103667450B
公开(公告)日:2015-04-22
申请号:CN201310557335.9
申请日:2013-11-11
Applicant: 上海交通大学
CPC classification number: C12Q1/6895 , C12Q2600/13 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明公开了一种适用于转基因产品高通量检测的DNA芯片;所述DNA芯片的载体上固定可检测97个转基因靶标的特异性DNA探针,所述DNA探针的核酸序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.97所示。本发明的97种寡核苷酸探针是针对目前最为普遍存在的、涉及8种作物品种的转基因插入序列以及内源基因而设计的,具有高度特异性;利用高密度DNA芯片技术,可同步检测样品中多个转基因成分的靶标序列,具有高效,高准确性,高灵敏度的特点。本发明将在转基因产品检测和标识管理领域有广泛的应用。
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公开(公告)号:CN103525910A
公开(公告)日:2014-01-22
申请号:CN201310429846.2
申请日:2013-09-18
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2563/107 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明公开了一种转植酸酶基因玉米BVLA430101品系特异性定量PCR检测方法,包括以下步骤:合成引物及与引物配合使用的荧光探针,上游引物的核苷酸序列如SEQID NO:1所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示,荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示;步骤2,从转植酸酶基因玉米BVLA430101中提取出DNA并制备其稀释液;步骤3,配制PCR反应体系;步骤4,将DNA稀释液加入到PCR反应体系中,采用定量PCR仪对所述DNA稀释液进行PCR扩增反应并检测。本发明的方法具有高效、灵敏、准确等优点,适合转植酸酶基因玉米BVLA430101及其加工产品的定量检测。
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公开(公告)号:CN1884314A
公开(公告)日:2006-12-27
申请号:CN200610026662.1
申请日:2006-05-18
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种利血平分子印迹聚合物的制备方法,属于生物工程技术领域。具体为:首先将交联剂、功能单体、模板分子和引发剂溶解在致孔剂中,得到混合溶剂;将混合溶剂超声脱气;混合均匀后,通入氮气,氮气状态或抽真空状态下密封;进行聚合反应,分子印迹聚合物采用热引发;聚合反应结束后,将合成的分子印迹聚合物取出研磨、过筛后用有机溶剂除去模板分子,通过高效液相色谱-紫外检测,直到检测不到模板分子;将除去模板分子的聚合物,真空干燥,得到利血平特异的分子印迹聚合物。本发明制得的分子印迹聚合物能够简单、快速、高效分离纯化、富集生物样品中的利血平残留,可直接用于对利血平的特异选择性分离、高效富集。
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