公开(公告)号：CN100378230C

公开(公告)日：2008-04-02

申请号：CN200510110990.5

申请日：2005-12-01

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 张大兵 ,  杨立桃 ,  熊静静 ,  潘爱虎 ,  尹长松

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 一种H5、H7、H9亚型禽流感病毒的实时荧光定量PCR检测方法，属于生物工程技术领域。本发明包括如下步骤：标准分子的构建；病毒特异性定量PCR引物和探针设计；病毒样本RNA的提取；对提取的样本RNA进行反转录聚合酶链式反应得到样本cDNA；M基因定量PCR检测方法的优化和建立；禽流感病毒亚型特异性定量PCR检测方法的优化和建立。本发明检测灵敏度达到20个拷贝的病毒分子，对于单个样本检测时间为2个小时，操作简便，并且可以同时进行大批量的样本分析，较传统的利用鸡胚进行病毒分离培养的方法在灵敏度和检测时间方面有了极大的提高，对于禽流感病毒的监控、鉴定具有很大的帮助和很高的应用前景。

公开(公告)号：CN1814805A

公开(公告)日：2006-08-09

申请号：CN200510110990.5

申请日：2005-12-01

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 张大兵 ,  杨立桃 ,  熊静静 ,  潘爱虎 ,  尹长松

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 一种H5、H7、H9亚型禽流感病毒的实时荧光定量PCR检测方法，属于生物工程技术领域。本发明包括如下步骤：标准分子的构建；病毒特异性定量PCR引物和探针设计；病毒样本RNA的提取；对提取的样本RNA进行反转录聚合酶链式反应得到样本cDNA；M基因定量PCR检测方法的优化和建立；禽流感病毒亚型特异性定量PCR检测方法的优化和建立。本发明检测灵敏度达到20个拷贝的病毒分子，对于单个样本检测时间为2个小时，操作简便，并且可以同时进行大批量的样本分析，较传统的利用鸡胚进行病毒分离培养的方法在灵敏度利检测时间方面有了极大的提高，对于禽流感病毒的监控、鉴定具有很大的帮助和很高的应用前景。

公开(公告)号：CN1724689A

公开(公告)日：2006-01-25

申请号：CN200510027942.X

申请日：2005-07-21

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 张大兵 ,  杨立桃 ,  潘爱虎 ,  梁婉琪 ,  许诵辞 ,  尹长松 ,  章可为

IPC: C12Q1/68

Abstract: 一种遗传改良玉米品系MON863的品系特异性PCR检测方法，本发明适合于MON863玉米及其加工产品的品系特异性PCR检测，其中包括以玉米基因组和外源插入载体5’端的CaMV35S启动子的邻接区DNA序列为目的扩增片段的5’端品系特异性检测方法；以外源插入载体3’端的tahsp 17 3’终止子和玉米基因组的邻接区DNA序列为目的扩增片段的3’端品系特异性检测方法。通过①MON863玉米的外源插入载体旁邻基因序列分析；②品系特异性定性PCR引物和定量PCR引物和探针设计；③品系特异性定性、定量PCR体系的建立和优化；④品系特异性定性、定量PCR检测方法验证，来建立遗传改良玉米品系MON863的品系特异性PCR检测平台。

公开(公告)号：CN1740322A

公开(公告)日：2006-03-01

申请号：CN200510027952.3

申请日：2005-07-21

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 张大兵 ,  杨立桃 ,  潘爱虎 ,  梁婉琪 ,  尹长松 ,  许诵辞 ,  章可为 ,  武爱波

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/53 ,  C12N15/82 ,  C12Q1/68

Abstract: 一种玉米品系MON863的外源插入载体的旁邻基因序列，本发明的MON863玉米外源插入载体的旁邻基因序列，包括：编码玉米NADH脱氢酶亚单位1和2的部分的核苷酸序列，而且所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.1中从核苷酸第1－253位的核苷酸序列完全相同或SEQ ID NO.2中从核苷酸第138－411位的核苷酸序列完全相同；编码烟草花椰病毒的35S启动子的部分序列，其来源于外源插入载体PV－ZMIR13，而且所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.1中从核苷酸第254－456位的核苷酸序列完全相同；编码小麦tahsp 17 3’终止子的部分序列，其来源于外源插入载体PV－ZMIR13，而且所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.2中从核苷酸第1－137位的核苷酸序列完全相同。本发明可以进一步用于建立转基因品系特异性PCR检测方法。