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公开(公告)号：CN1724689A
公开(公告)日：2006-01-25
申请号：CN200510027942.X
申请日：2005-07-21
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种遗传改良玉米品系MON863的品系特异性PCR检测方法，本发明适合于MON863玉米及其加工产品的品系特异性PCR检测，其中包括以玉米基因组和外源插入载体5’端的CaMV35S启动子的邻接区DNA序列为目的扩增片段的5’端品系特异性检测方法；以外源插入载体3’端的tahsp 17 3’终止子和玉米基因组的邻接区DNA序列为目的扩增片段的3’端品系特异性检测方法。通过①MON863玉米的外源插入载体旁邻基因序列分析；②品系特异性定性PCR引物和定量PCR引物和探针设计；③品系特异性定性、定量PCR体系的建立和优化；④品系特异性定性、定量PCR检测方法验证，来建立遗传改良玉米品系MON863的品系特异性PCR检测平台。
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公开(公告)号：CN1888059A
公开(公告)日：2007-01-03
申请号：CN200610028885.1
申请日：2006-07-13
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种农药技术领域的重组乙酰胆碱酯酶及其制备方法和检测方法。重组乙酰胆碱酯酶是溶解磷酸钠缓冲液中，4℃下保存22天，具有75％的初始酶活，对敌敌畏、氧化乐果、对氧磷、甲基对氧磷、涕灭威、西维因、克百威、抗蚜威的抑制常数分别为4.4E6、2.2E4、1.1E6、4.2E5、4.8E4、5.9E5、5.1E6、2.3E5。通过选种、振荡培养、离心、过滤、沉淀、淋洗、搅拌、透析、冷冻干燥成粉，获得重组乙酰胆碱酯酶，在－20℃下保存。检测方法通过试剂准备、样品处理、样品检测，进一步测试空白，测试样本，最后结果计算：抑制率(％)＝[(ΔA0－ΔAt)/ΔA0]×100％。本发明重组乙酰胆碱酯酶对低浓度的有机磷及氨基甲酸酯农药具有显著的敏感性，可用于农产品中农药残留的检测。
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公开(公告)号：CN1727487A
公开(公告)日：2006-02-01
申请号：CN200510025947.9
申请日：2005-05-19
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及果蝇乙酰胆碱酯酶的基因，属于分子生物基因技术领域。编码具有乙酰胆碱酯酶活性的蛋白质，且所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.5相同。所述的编码，果蝇乙酰胆碱酯酶的信号肽与糖磷脂锚定信号的核苷酸被切除，且剩余的核苷酸序列与SEQ ID NO.6相同。该基因在甲醇酵母细胞中得到表达，产物具有乙酰胆碱酯酶活性且分泌于酵母培养基中。本发明对低浓度的有机磷及氨基甲酸酯农药具有显著的敏感性，该基因的表达产物可以用于农产品中农药残留的检测，并为研制农药生物学检测产品提供灵敏的蛋白酶材料，具有很大的应用价值。
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公开(公告)号：CN1740322A
公开(公告)日：2006-03-01
申请号：CN200510027952.3
申请日：2005-07-21
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种玉米品系MON863的外源插入载体的旁邻基因序列，本发明的MON863玉米外源插入载体的旁邻基因序列，包括：编码玉米NADH脱氢酶亚单位1和2的部分的核苷酸序列，而且所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.1中从核苷酸第1－253位的核苷酸序列完全相同或SEQ ID NO.2中从核苷酸第138－411位的核苷酸序列完全相同；编码烟草花椰病毒的35S启动子的部分序列，其来源于外源插入载体PV－ZMIR13，而且所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.1中从核苷酸第254－456位的核苷酸序列完全相同；编码小麦tahsp 17 3’终止子的部分序列，其来源于外源插入载体PV－ZMIR13，而且所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.2中从核苷酸第1－137位的核苷酸序列完全相同。本发明可以进一步用于建立转基因品系特异性PCR检测方法。
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