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公开(公告)号:CN103642875A
公开(公告)日:2014-03-19
申请号:CN201310666360.0
申请日:2013-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种从魔芋粉中制备低聚甘露糖的方法。利用来源于本实验室的重组β-甘露聚糖酶(reAuMan5AN3C3)和重组β-内切葡聚糖酶(reAuCell2A)协同作用对魔芋粉进行酶解,得到低聚甘露糖。该方法所用的关键酶的催化效率较高、酶的生产和使用成本较低、周期短、无污染,有较大的工业化生产、应用潜力和经济价值。
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公开(公告)号:CN103642851A
公开(公告)日:2014-03-19
申请号:CN201310666358.3
申请日:2013-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种双酶法从小麦麸皮中制备阿魏酸的方法。利用来源于本实验室的重组阿魏酸酯酶(reAorFaeA)和重组木聚糖酶(reAoXynllA)协同作用对小麦麸皮进行酶解,释放阿魏酸,得到阿魏酸粗提液。采用HPD-300弱极性大孔树脂对阿魏酸粗提液进行纯化,将纯化得到的含有阿魏酸的馏分进行真空干燥得到阿魏酸产品。采用本发明提取制备阿魏酸原料廉价易得,产物纯度较高,制备工艺简单,操作简便易行,环境友好,适用于工业化放大生产。
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公开(公告)号:CN103642776A
公开(公告)日:2014-03-19
申请号:CN201310666411.X
申请日:2013-12-10
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/2482 , C12N15/815 , C12Y302/01008
Abstract: 本发明的目的是提供一种常温的木聚糖酶热稳定性改造、突变木聚糖酶工程菌构建以及突变木聚糖酶的高效表达的方法。根据来源于A.oryzae CICC40186木聚糖酶Aoxyn11A的空间结构设计突变S108C和N152C,得到突变木聚糖酶:Aoxyn11AELJ,其成熟肽基因序列为SEQ ID NO:1,108C和152C可以形成一个跨二级结构的二硫键。实验结果表明突变后该酶热稳定性有了明显的提高,作为一种耐热型的酶制剂,该木聚糖酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号:CN103060424A
公开(公告)日:2013-04-24
申请号:CN201210562634.7
申请日:2012-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种木聚糖酶耐热性与其N端二硫键相关性的分析方法,属于微生物基因工程技术领域。采用将酶蛋白的一级结构同源比对、同源建模及分子动力学模拟三种生物信息学方法相结合的方案,并结合定点突变实验手段,分析EvXyn11TS的耐热性机理,证明了N端二硫键是影响木聚糖酶耐热性的主要因素之一。该研究结果为其它与EvXyn11TS一级结构相似的、11家族常温高比活性木聚糖酶的耐热性改造奠定了基础。
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公开(公告)号:CN102994538A
公开(公告)日:2013-03-27
申请号:CN201210562490.5
申请日:2012-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: pUC19-TVG质粒的构建及使用方法。本发明的技术方案提供了一种新型的载体pUC19-TVG,其特征在于,所述载体是基于限制性内切酶酶切及连接原理由载体pUC19改造而来,载体中含有包括EcoRI、MluI、NotI、XhoI、HindIII在内的多克隆位点,不含Xho I、Mlu I、Sac I、Kpn I、Cla I、EcoRV、NcoI、Pst I、BglII、Sal I、Pst I、BamH I、Sca I、Xba I酶切位点,因此该载体能够实现多基因片段依赖酶切位点的融合及单一基因的分段和拼接,同时该载体还可以用于解决长片段基因克隆过程中极易出现的错配问题。
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公开(公告)号:CN102703403A
公开(公告)日:2012-10-03
申请号:CN201210181372.X
申请日:2012-06-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种源于Aspergillus usamii E001的新型A类阿魏酸酯酶基因成熟肽cDNA序列的克隆及表达的方法,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1,相应的氨基酸序列为SEQ ID NO:2,相应的基因命名为Aus Fae-A。本发明还公开了产阿魏酸酯酶工程菌的构建以及重组阿魏酸酯酶的高效表达的方法,具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号:CN102559525A
公开(公告)日:2012-07-11
申请号:CN201110410579.5
申请日:2011-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种新型的共表达内切葡聚糖酶基因和木聚糖酶基因的毕赤酵母工程菌GS115/Aus cel12A-Aor xyn11A的构建方法。通过双质粒表达体系实现了两种酶在同一工程菌中的混合表达,成功的制备了复合酶,降低了酶的生产成本。所表达的两种酶具有较好的酶学性质,具有较大的工业化应用潜力。
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公开(公告)号:CN102492716A
公开(公告)日:2012-06-13
申请号:CN201110410391.0
申请日:2011-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种便于实现目的蛋白天然N端表达的真核表达载体pPIC9KM及其构建和使用方法。所述表达载体是基于同尾酶原理由载体pPIC9K改造而来,并仅含有单一的Xho I酶切位点,pPIC9KM结构如图一所示。将目的基因经PCR、连接及双酶切过程连接至pPIC9KM质粒中Kex2酶切位点序列后,在分泌信号的引导下分泌至胞外,在此过程中经Kex2加工切除信号肽,即获得为天然N端目的蛋白质。
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公开(公告)号:CN102492709A
公开(公告)日:2012-06-13
申请号:CN201110410628.5
申请日:2011-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001菌株的新型内切壳聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆和分析方法,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2。生物信息学分析表明该内切壳聚糖酶是在A.usamii E001中发现的第二种壳聚糖酶,所以命名为Aus CsnB,其氨基酸序列为SEQ ID NO:3,相应的基因命名为Aus csnB。这为该基因的异源表达和工业化生产奠定了理论基础,有较大的工业化生产和应用潜力及经济价值,也为其它内切壳聚糖酶的研究奠定了理论基础。
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公开(公告)号:CN102492674A
公开(公告)日:2012-06-13
申请号:CN201110410610.5
申请日:2011-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种人溶菌酶与人碱性成纤维细胞生长因子融合基因的构建方法,中间引入凝血酶切位点核苷酸序列,并公开了融合蛋白工程菌的构建和高效表达的方法。人溶菌酶与人碱性成纤维细胞生长因子融合蛋白高效表达的发酵条件是:pH 6.5、2%甲醇添加量、26℃诱导108h。该发明具有较大的工业化生产潜力和药物研究价值。
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