公开(公告)号：CN103642776A

公开(公告)日：2014-03-19

申请号：CN201310666411.X

申请日：2013-12-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 庞庆丰 ,  刘晓彤 ,  殷欣 ,  姚瑶 ,  李剑芳 ,  邬敏辰

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/81 ,  C12R1/69

CPC classification number: C12N9/2482 ,  C12N15/815 ,  C12Y302/01008

Abstract: 本发明的目的是提供一种常温的木聚糖酶热稳定性改造、突变木聚糖酶工程菌构建以及突变木聚糖酶的高效表达的方法。根据来源于A.oryzae CICC40186木聚糖酶Aoxyn11A的空间结构设计突变S108C和N152C，得到突变木聚糖酶：Aoxyn11AELJ，其成熟肽基因序列为SEQ ID NO：1，108C和152C可以形成一个跨二级结构的二硫键。实验结果表明突变后该酶热稳定性有了明显的提高，作为一种耐热型的酶制剂，该木聚糖酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。

公开(公告)号：CN102492674A

公开(公告)日：2012-06-13

申请号：CN201110410610.5

申请日：2011-12-12

Applicant: 江南大学

Inventor： 邬敏辰 ,  韦敬土 ,  龚燕燕 ,  罗秋玲 ,  刘晓彤

IPC: C12N9/36 ,  C12N15/62 ,  C12N15/10 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明提出了一种人溶菌酶与人碱性成纤维细胞生长因子融合基因的构建方法，中间引入凝血酶切位点核苷酸序列，并公开了融合蛋白工程菌的构建和高效表达的方法。人溶菌酶与人碱性成纤维细胞生长因子融合蛋白高效表达的发酵条件是：pH 6.5、2％甲醇添加量、26℃诱导108h。该发明具有较大的工业化生产潜力和药物研究价值。

公开(公告)号：CN102703481A

公开(公告)日：2012-10-03

申请号：CN201210181374.9

申请日：2012-06-05

Applicant: 江南大学

Inventor： 邬敏辰 ,  刘晓彤 ,  李剑芳

IPC: C12N15/56 ,  C12N9/42 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/69 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明的目的是提供一种常温的木聚糖酶热稳定性改造、突变木聚糖酶工程菌构建以及突变木聚糖酶的高效表达的方法。根据来源于A.oryzae CICC 40186木聚糖酶AoXyn11A的空间结构设计突变S55R和N155D，得到突变木聚糖酶：AoXyn11AYQ，其成熟肽基因序列为SEQ ID NO：1，S55R和N155D可以形成一个跨二级结构的盐桥。实验结果表明突变后该酶热稳定性有了明显的提高，作为一种耐热型的酶制剂，该木聚糖酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。

公开(公告)号：CN102492707A

公开(公告)日：2012-06-13

申请号：CN201110410397.8

申请日：2011-12-12

Applicant: 江南大学

Inventor： 邬敏辰 ,  殷欣 ,  李剑芳 ,  刘晓彤 ,  罗秋玲

IPC: C12N15/56 ,  C12N9/42 ,  C12N15/10 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明提出了一种源自米曲霉(Aspergillus oryzae)CICC 40186的新型10家族木聚糖酶催化域基因cDNA序列的克隆及分析、质粒构建及表达方法，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1。生物信息学分析表明该木聚糖酶催化域属于糖苷水解酶第10家族，命名为Aor Xyn10BC，其氨基酸序列为SEQ ID NO：2，相应的基因命名为Aor xyn10BC。这为该基因的异源表达和工业化生产奠定了理论基础。本发明还公开了木聚糖酶工程菌的构建以及重组木聚糖酶的高效表达和纯化的方法。作为一种新型酶制剂，该木聚糖酶具有较大的工业化生产和应用潜力及经济价值，也为其它木聚糖酶的研究奠定了理论基础。