公开(公告)号：CN111944784A

公开(公告)日：2020-11-17

申请号：CN202010798479.3

申请日：2020-08-11

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  陈春

IPC: C12N9/26 ,  C12N15/56 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了热稳定性提高的麦芽寡糖基海藻水解酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明的麦芽寡糖基海藻糖水解酶突变体是通过将麦芽寡糖基海藻糖水解酶的两个氨基酸位点分别进行突变，得到了与亲本麦芽寡糖基海藻糖水解酶相比更高的热稳定性。本发明的麦芽寡糖基海藻糖水解酶两个突变体在60℃的半衰期半衰期比野生型增加5和8min，分别为是野生型的1.3和1.5倍，同时海藻糖转化率都比野生性提高。

公开(公告)号：CN108384741B

公开(公告)日：2020-10-09

申请号：CN201810145987.4

申请日：2018-02-12

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  李云菲

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/75 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种高产环糊精葡萄糖基转移酶的基因工程菌，属于基因工程技术领域。本发明构建pHYα/βCGTd4、pHYα/βCGTd4‑sp1和pHYα/βCGTd4‑sp1‑βN三种Bacillus stearothermophilus来源的环糊精葡萄糖基转移酶表达质粒，并转化表达宿主枯草芽孢杆菌WSH13，得到三种表达环糊精葡萄糖基转移酶的重组工程菌B.subtilis WSH13(pHYα/βCGTd4)、B.subtilis WSH13(pHYα/βCGTd4‑sp1)、B.subtilis WSH13(pHYα/βCGTd4‑sp1‑βN)，摇瓶酶活分别为7.99U/mL、11.99U/mL和12.65U/mL，3L罐酶活分别为110.4U/mL、150.3U/mL和225.9U/mL。

公开(公告)号：CN111718921A

公开(公告)日：2020-09-29

申请号：CN202010507573.9

申请日：2020-06-05

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  王蕾 ,  胡凡 ,  陈晟 ,  宿玲恰

IPC: C12N9/26 ,  C12N15/70 ,  C12P19/00 ,  C12P19/14

Abstract: 本发明公开了高特异性生产麦芽三糖的麦芽三糖淀粉酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。本发明对来源于Thermobifidafusca NTU22的TfAmyA进行改造，对TfAmyA进行了一项截短和，并在此基础上对47位的亮氨酸，101位的甘氨酸，103位的甘氨酸，153位的甘氨酸，进行定点突变。获得的突变体酶的主产物麦芽三糖的特异性增加，产率增加，更适用于麦芽三糖的生产。

公开(公告)号：CN111607626A

公开(公告)日：2020-09-01

申请号：CN202010592371.9

申请日：2020-06-24

Applicant: 江南大学

Inventor： 黄燕 ,  吴敬 ,  王蕾 ,  武权 ,  陈晟 ,  宿玲恰

IPC: C12P19/04 ,  C12P19/14 ,  C12N15/75 ,  C12N9/42 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种环糊精酶在制备麦芽七糖中的应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种重组枯草芽孢杆菌，该重组枯草芽孢杆菌以枯草芽孢杆菌为宿主，表达热球菌Thermococcus sp.Strain B1001来源的环糊精酶。本发明通过将热球菌来源的CDase在食品准入的枯草芽孢杆菌中进行了重组表达，酶活为5.9U/mL，应用该重组CDase生产麦芽七糖，底物浓度80g/Lβ-环糊精，转化率高达82.33％。本发明的CDase在高底物浓度下的转化率和产物纯度高，可有效降低高纯度麦芽七糖的生产加工成本，具有很好的应用价值和商业开发意义。

公开(公告)号：CN111560360A

公开(公告)日：2020-08-21

申请号：CN202010377685.7

申请日：2018-12-07

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  杜立

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/63

Abstract: 本发明公开了一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程领域。本发明通过对环糊精葡萄糖基转移酶进行突变，得到了环糊精葡萄糖基转移酶歧化活力更高的突变体。突变体V6D/S90G/T168A/T171A/T383A/G608A的摇瓶发酵酶歧化活力为野生酶的3.16倍。本发明对环糊精葡萄糖基转移酶工业化生产具有一定意义，并提高了该酶的在食品、医药、化工行业中的应用潜力。

公开(公告)号：CN109576240B

公开(公告)日：2020-08-04

申请号：CN201811547297.8

申请日：2018-12-18

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  吴丹 ,  宿玲恰 ,  赵雅琪

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12

Abstract: 本发明公开了一种淀粉蔗糖酶突变体及其制备方法与应用，属于基因工程和酶工程领域。本发明将来源于Deinococcus Geothermalis的蔗糖淀粉酶第399位的甘氨酸突变为丝氨酸，所得淀粉蔗糖酶突变体应用于松二糖的生产。该淀粉蔗糖酶突变体在温度为35℃，初始pH为7.0的条件下得到了松二糖的产率达到32％，是野生酶生产松二糖转化率的2倍。因此，本发明的淀粉蔗糖酶突变体能够应用于松二糖的制备中，使松二糖的转化率得到进一步的提高。

公开(公告)号：CN109486793B

公开(公告)日：2020-08-04

申请号：CN201811425686.3

申请日：2018-11-27

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  郭志勇 ,  李玲玲 ,  姚锴琳

IPC: C12N9/24 ,  C12P19/14 ,  C12P19/04

Abstract: 本发明公开了一种蔗糖水解酶，属于基因工程和酶工程领域。本发明对来源于Xanthomonas axonopodis pv.glycines、Janthinobacterium agaricidamnosum NBRC 102515、Caulobacter crescentus NA1000 CB15的蔗糖水解酶进行改造，分别对其第271位或第279位或第281位的丝氨酸残基进行定点突变，获得的单突变体酶的转苷活性较野生型蔗糖水解酶升高。这一发明有助于对于糖苷水解酶转苷和水解机理的研究，亦可应用于糖苷水解酶工业生产多聚糖。

公开(公告)号：CN111394330A

公开(公告)日：2020-07-10

申请号：CN202010365351.8

申请日：2018-12-07

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  杜立

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54

Abstract: 本发明公开了环糊精葡萄糖基转移酶突变体T168A及其制备方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明通过对环糊精葡萄糖基转移酶进行突变，得到了环糊精葡萄糖基转移酶歧化活力更高的突变体。突变体T168A的摇瓶发酵酶歧化活力分别为野生酶的1.21倍。本发明对环糊精葡萄糖基转移酶工业化生产具有一定意义，并提高了该酶的在食品、医药、化工行业中的应用潜力。

公开(公告)号：CN110983849A

公开(公告)日：2020-04-10

申请号：CN201911322345.8

申请日：2019-12-20

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  李光耀

IPC: D21C11/00

Abstract: 本发明公开了一种多酶复配降解胶黏物的方法及其应用，属于酶工程技术领域。本发明通过将角质酶和脂肪酶两种酶复配，大大改善了胶黏物的降解效果；利用本发明的方法，将角质酶和脂肪酶分别以0.8U/g胶黏物和1.6U/g胶黏物添加量添加至含有胶黏物的造纸过程中产生的碎浆中进行反应，仅反应30min，就可使碎浆中胶黏物的总面积降低33.44％。

公开(公告)号：CN110791541A

公开(公告)日：2020-02-14

申请号：CN201911024332.2

申请日：2019-10-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  李玲玲 ,  李娜

IPC: C12P19/18 ,  C12P19/04

Abstract: 本发明公开了一种降低淀粉消化率的方法及其应用，属于酶工程技术领域。本发明提供了一种降低淀粉消化率的方法，此方法可用于制备抗性淀粉，且生产效率十分高；利用此方法将糖原分支酶ChlGBE加入淀粉溶液中改性6h，即可使淀粉溶液中抗性淀粉的含量高达35.06％，较未经改性的淀粉溶液提高9.75％；利用此方法将糖原分支酶HosGBE加入淀粉溶液中改性8h，即可使淀粉溶液中抗性淀粉的含量高达47.36％，较未经改性的淀粉溶液提高22.05％；利用此方法将糖原分支酶VvGBE加入淀粉溶液中改性10h，即可使淀粉溶液中抗性淀粉的含量高达51.4％，较未经改性的淀粉溶液提高26.09％。