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公开(公告)号：CN108384740B
公开(公告)日：2021-08-24
申请号：CN201810145577.X
申请日：2018-02-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种用于高密度发酵的枯草芽孢杆菌，属于生物工程技术领域。本发明采用CRISPR/Cas9基因编辑系统，敲除枯草芽孢杆菌WSH11和CICIM B0629的ppsE、sfp这两个基因，得到突变菌株WSH13和CICIM2。制备枯草芽孢杆菌WSH11、WSH13、CICIM和CICIM24种菌感受态，转化环糊精葡萄糖基转移酶表达质粒，得到4种环糊精葡萄糖基转移酶重组菌，经过摇瓶和3‑L罐上罐测定酶活和发酵过程中产泡沫的情况，结果表明以CICIM2为宿主时环糊精葡萄糖基转移酶的表达稍有下降，且发酵过程中，泡沫产量减少不显著。以WSH13为宿主时环糊精葡萄糖基转移酶的表达较好，且发酵过程中，泡沫产量明显减少。
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公开(公告)号：CN108384741B
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201810145987.4
申请日：2018-02-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产环糊精葡萄糖基转移酶的基因工程菌，属于基因工程技术领域。本发明构建pHYα/βCGTd4、pHYα/βCGTd4‑sp1和pHYα/βCGTd4‑sp1‑βN三种Bacillus stearothermophilus来源的环糊精葡萄糖基转移酶表达质粒，并转化表达宿主枯草芽孢杆菌WSH13，得到三种表达环糊精葡萄糖基转移酶的重组工程菌B.subtilis WSH13(pHYα/βCGTd4)、B.subtilis WSH13(pHYα/βCGTd4‑sp1)、B.subtilis WSH13(pHYα/βCGTd4‑sp1‑βN)，摇瓶酶活分别为7.99U/mL、11.99U/mL和12.65U/mL，3L罐酶活分别为110.4U/mL、150.3U/mL和225.9U/mL。
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公开(公告)号：CN108384741A
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201810145987.4
申请日：2018-02-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产环糊精葡萄糖基转移酶的基因工程菌，属于基因工程技术领域。本发明构建pHYα/βCGTd4、pHYα/βCGTd4-sp1和pHYα/βCGTd4-sp1-βN三种Bacillus stearothermophilus来源的环糊精葡萄糖基转移酶表达质粒，并转化表达宿主枯草芽孢杆菌WSH13，得到三种表达环糊精葡萄糖基转移酶的重组工程菌B.subtilis WSH13(pHYα/βCGTd4)、B.subtilis WSH13(pHYα/βCGTd4-sp1)、B.subtilis WSH13(pHYα/βCGTd4-sp1-βN)，摇瓶酶活分别为7.99U/mL、11.99U/mL和12.65U/mL，3L罐酶活分别为110.4U/mL、150.3U/mL和225.9U/mL。
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公开(公告)号：CN108384740A
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201810145577.X
申请日：2018-02-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种用于高密度发酵的枯草芽孢杆菌，属于生物工程技术领域。本发明采用CRISPR/Cas9基因编辑系统，敲除枯草芽孢杆菌WSH11和CICIM B0629的ppsE、sfp这两个基因，得到突变菌株WSH13和CICIM2。制备枯草芽孢杆菌WSH11、WSH13、CICIM和CICIM24种菌感受态，转化环糊精葡萄糖基转移酶表达质粒，得到4种环糊精葡萄糖基转移酶重组菌，经过摇瓶和3-L罐上罐测定酶活和发酵过程中产泡沫的情况，结果表明以CICIM2为宿主时环糊精葡萄糖基转移酶的表达稍有下降，且发酵过程中，泡沫产量减少不显著。以WSH13为宿主时环糊精葡萄糖基转移酶的表达较好，且发酵过程中，泡沫产量明显减少。
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