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公开(公告)号：CN109468298A
公开(公告)日：2019-03-15
申请号：CN201811547298.2
申请日：2018-12-18
Applicant: 江南大学(如皋)食品生物技术研究所 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高松二糖产量的淀粉蔗糖酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。该淀粉蔗糖酶突变体D447V是通过将来源于Deinococcus Geothermalis的淀粉蔗糖酶第447位天冬氨酸突变为缬氨酸得到的。将淀粉蔗糖酶突变体D447V应用于松二糖的生产，在pH 7.0、35℃的反应条件下，松二糖的产量为57.01g/L，是野生酶产量的1.8倍。因此，本发明的淀粉蔗糖酶突变体能够应用于松二糖的制备中，提高松二糖的转化率。
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公开(公告)号：CN109468298B
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN201811547298.2
申请日：2018-12-18
Applicant: 江南大学(如皋)食品生物技术研究所 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高松二糖产量的淀粉蔗糖酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。该淀粉蔗糖酶突变体D447V是通过将来源于Deinococcus Geothermalis的淀粉蔗糖酶第447位天冬氨酸突变为缬氨酸得到的。将淀粉蔗糖酶突变体D447V应用于松二糖的生产，在pH 7.0、35℃的反应条件下，松二糖的产量为57.01g/L，是野生酶产量的1.8倍。因此，本发明的淀粉蔗糖酶突变体能够应用于松二糖的制备中，提高松二糖的转化率。
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公开(公告)号：CN109371006B
公开(公告)日：2021-12-14
申请号：CN201811517830.6
申请日：2018-12-12
Applicant: 江南大学(如皋)食品生物技术研究所 , 江南大学
IPC: C12N11/089 , C12N9/10 , C12P19/18 , C12P19/12
Abstract: 本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶的固定化方法，属于生物工程技术领域。本发明以重组枯草芽孢杆菌SPase/pBSMuL3作为生产菌株，LX‑1000EA固定化蔗糖磷酸化酶的酶活为7.75U/g，酶活回收率达到110.85％；LX‑1000EA固定化蔗糖磷酸化酶的酶活为9.54U/g，酶活回收率达到101.82％。在相同的转化时间内，以0.5M蔗糖和0.5M葡萄糖为底物连续操作11次，氨基化树脂LX‑1000EA固定化SPase保持39.15％的转化率，94％的残留酶活；氨基化树脂LX‑1000HA固定化SPase保持42.5％的转化率，91％的残留酶活。结果表明，该固定化方法操作简单，固定化酶酶活没有损失，且应用效果很好，具有很高的工业化应用潜力。
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公开(公告)号：CN109371006A
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201811517830.6
申请日：2018-12-12
Applicant: 江南大学(如皋)食品生物技术研究所 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶的固定化方法，属于生物工程技术领域。本发明以重组枯草芽孢杆菌SPase/pBSMuL3作为生产菌株，LX-1000EA固定化蔗糖磷酸化酶的酶活为7.75U/g，酶活回收率达到110.85％；LX-1000EA固定化蔗糖磷酸化酶的酶活为9.54U/g，酶活回收率达到101.82％。在相同的转化时间内，以0.5M蔗糖和0.5M葡萄糖为底物连续操作11次，氨基化树脂LX-1000EA固定化SPase保持39.15％的转化率，94％的残留酶活；氨基化树脂LX-1000HA固定化SPase保持42.5％的转化率，91％的残留酶活。结果表明，该固定化方法操作简单，固定化酶酶活没有损失，且应用效果很好，具有很高的工业化应用潜力。
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公开(公告)号：CN117305194B
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202310234577.8
申请日：2023-03-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种拟无枝酸菌突变株及其应用，属于基因工程技术领域。本发明利用CRISPR/Cas12a基因编辑系统成功对拟无枝酸菌CCTCC NO:M2011265中的香兰素脱氢酶基因(vdh)和4‑羟基‑3‑甲氧基苯甲酰基‑β‑羟基丙酰辅酶脱氢酶基因(phdB)进行无痕敲除，获得拟无枝酸菌ΔvdhΔphdB菌株在3L发酵罐中，发酵60小时产香兰素的达到20.4g/L，对底物阿魏酸摩尔转化率达90.5％表现出良好的工业应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117965514A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410147861.6
申请日：2024-02-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种芳香族氨基酸解氨酶突变体及其制备反式肉桂酸和对香豆酸的方法，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明以来源于Zea mays的苯丙氨酸解氨酶(ZmPAL2)为出发序列，对第258位、第459位、第484位中至少一个的氨基酸进行取代，所获得的突变体与野生型相比，催化L‑苯丙氨酸的酶活力和转化率显著提升；对第135位以及与以第135位突变为基础组合第258位、第459位、第484位中的至少一个氨基酸突变，所获得的突变体与野生型相比，催化L‑酪氨酸的酶活力和转化率显著提升。以上获得的催化L‑苯丙氨酸和L‑酪氨酸的高活力突变体可应用于反式肉桂酸和对香豆酸的高效生产。
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公开(公告)号：CN117737031A
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202311795604.5
申请日：2023-12-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种一步纯化固定化D‑泛解酸内酯水解酶的方法及其应用，本发明在构建热纤维梭菌来源的碳水化合物结合模块24与D‑泛解酸内酯水解酶融合蛋白，并在毕赤酵母表达系统中高密度发酵获得含有大量融合酶D‑泛解酸内酯水解酶‑碳水化合物结合模块的粗酶液，将粗酶液与微晶纤维素混合反应，利用微晶纤维素吸附融合蛋白，即可快速实现一步纯化固定化D‑泛解酸内酯水解酶的制备，不需要进行细胞破碎以及进一步的纯化步骤，且所得D‑泛解酸内酯水解酶在贮存30天后仍保持90％以上酶活性，在循环使用10次时仍保持60％以上酶活性，具有良好的稳定性和可重复利用性。
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公开(公告)号：CN117305194A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202310234577.8
申请日：2023-03-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种拟无枝酸菌突变株及其应用，属于基因工程技术领域。本发明利用CRISPR/Cas12a基因编辑系统成功对拟无枝酸菌CCTCC NO:M2011265中的香兰素脱氢酶基因(vdh)和4‑羟基‑3‑甲氧基苯甲酰基‑β‑羟基丙酰辅酶脱氢酶基因(phdB)进行无痕敲除，获得拟无枝酸菌ΔvdhΔphdB菌株在3L发酵罐中，发酵60小时产香兰素的达到20.4g/L，对底物阿魏酸摩尔转化率达90.5％表现出良好的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN112852842B
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202110086152.8
申请日：2021-01-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种交替糖蔗糖酶表达及其制备交替糖的方法，属于酶工程技术领域。构建的毕赤酵母工程菌(Pichia pastoris X33/pPICZa‑ASR)，经3L发酵罐高密度发酵，所产交替糖蔗糖酶酶活达到34.5U/mL以上，实现了交替糖蔗糖酶的高效表达。以蔗糖为供体，以其他小分子糖为受体，利用重组工程菌生产的交替糖蔗糖酶催化合成交替糖。本方法实现了交替糖蔗糖酶的高效表达，展现良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN115725485A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202210984262.0
申请日：2022-08-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生物催化合成对羟基亚苄基丙酮的方法，属于生物工程技术领域。本发明首先构建了一种过表达脱氧核糖醛缩酶的重组大肠杆菌，并利用该重组菌株的全细胞和固定化细胞，以丙酮为反应介质催化对羟基苯甲醛生成对羟基亚苄基丙酮。采用本发明提供的重组大肠杆菌全细胞催化制备对羟基亚苄基丙酮时，产量达到19g/L，对羟基苯甲醛的摩尔转化率达到99.8％。本发明提供的这种生物法制备对羟基亚苄基丙酮的方法，具有反应条件温和、工艺简单、易于控制等优点，同时有利于环境保护，易于推广应用。
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