公开(公告)号：CN119662791A

公开(公告)日：2025-03-21

申请号：CN202510012940.0

申请日：2025-01-06

Applicant: 海南大学

Inventor： 骆彦池 ,  宋凤阁 ,  陈会友 ,  万逸

IPC: C12Q1/686 ,  C12Q1/689 ,  C12N15/11 ,  C12R1/445

Abstract: 本发明公开了一种基于aPCR‑Cas12快速鉴别金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的方法，属于基因检测技术领域。本发明以nuc为目标基因，利用aPCR扩增出单链ssDNA，根据序列合成互补链PC‑ssDNA，并修饰PClinker基团。二者杂交后紫外处理，切断修饰位点形成立足点双链，联合CRISPR‑Cas12系统提高SNP检测能力，通过读取荧光信号，显著性分析P值实现金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的区分检测。该体系无需PAM位点，能够检测到低至9CUF/mL的目标基因，对混合基因中SNP突变率检测的灵敏度达到0.01％。本发明提供的方法对病原菌监控与防治方面都有重要意义。

公开(公告)号：CN118421765A

公开(公告)日：2024-08-02

申请号：CN202410632776.9

申请日：2024-05-21

Applicant: 海南大学

Inventor： 宋凤阁 ,  骆彦池 ,  陈会友 ,  鲁琳 ,  邵宝凯 ,  林志赟 ,  万逸

IPC: C12Q1/6858

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas12系统光激活检测SNP的方法。该方法中，根据待检测(miRNA作为RNA)靶核酸单链信息，设计、合成其PClinker基团修饰的互补ssDNA链，二者杂交后紫外光照射形成立足点，联合CRISPR‑Cas12系统将检测信号转变成荧光信号来实现核酸检测，并且区分单碱基突变。本发明所述方法材料设计简单、成本低、操作方便，并且可以在40min内直接通过荧光信号检测SNP，区分野生型与突变型，对于癌症的个性化生物标记物诊断和基因治疗方面都有重要意义。

公开(公告)号：CN117467800A

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202210869600.6

申请日：2022-07-23

Applicant: 海南大学

Inventor： 宋凤阁 ,  王庆伟 ,  孟天 ,  陈会友 ,  张幸悦 ,  黄心怡

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/6806 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 一种基于CRISPR/Cas14a系统的核酸可视化检测方法与应用本发明涉及一种CRISPR/Cas14a基因编辑系统和纳米金信号探针进行核酸可视化检测的方法及其在非洲猪瘟病毒（ASFV）的检测应用，靶标核酸加入含修饰ssDNA的纳米金及CRISPR/Cas14可视化检测体系中，不仅可通过酶标仪检测荧光信号的变化判断结果，也能通过肉眼观察纳米金团聚状态进行结果判读。核酸快提剂和羟基二氧化硅提取ASFV全血核酸，经过环介导等温扩增进行快速放大后加入可视化检测体系，成功实现ASFV的可视化检测。该方法核酸提取扩增无需大型仪器，可视化结果观察，可适用于微生物等的快速现场检测。