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公开(公告)号：CN116559338A
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202111446021.2
申请日：2021-11-29
Applicant: 广东省计量科学研究院(华南国家计量测试中心) , 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开一种人胰岛素纯度标准物质的制备方法，包括原料的选取、定性鉴定、标准物质均匀性、稳定性检验、定值、不确定度评定等步骤。本发明采用市售高纯人胰岛素为原料，经纯度分析、定性鉴定、均匀性检验和稳定性考察后，以同位素标记的Val、Leu和Phe为内标，采用液相色谱‑同位素稀释质谱法进行定值，从而可以有效排除可能存在的异亮氨酸取代亮氨酸的杂质、异构体杂质或其他同分子量蛋白杂质等杂质对定值结果的干扰和影响，使定值结果更为准确可靠。本发明制得的纯度标准物质可用于血清胰岛素标准物质量值溯源、体外诊断中胰岛素测量结果的质量控制、相关方法确认与评价，以及封闭型发光免疫分析仪重复性、线性、交叉污染率的评价。
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公开(公告)号：CN116102613A
公开(公告)日：2023-05-12
申请号：CN202310118074.4
申请日：2023-02-10
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: C07K1/16 , B01D15/10 , B01D15/08 , C07K14/62 , G01N33/577 , G01N33/68 , G01N33/74 , G01N21/33 , G01N21/552
Abstract: 本发明基于表面等离子共振免疫亲和活性蛋白纯化装置包括：第一六路选择阀、第二六路选择阀、第一四元比例阀、第一泵、分离柱、阻尼器、紫外检测器、第二四元比例阀、表面等离子共振光谱检测器、第二泵、第三泵、二路选择阀、收集器、废液瓶、六通阀、控制器和柱温箱，第一六路选择阀和第二六路选择阀出液孔分别与第一四元比例阀中一个进液孔相连，第一四元比例阀出液孔通过第一泵与六通阀第一孔相连，六通阀第一孔依次与第二孔和分离柱进液口相连，分离柱第一路依次与紫外检测器和二路选择阀相连，二路选择阀两个出液孔分别与收集器和废液瓶相连，分离柱第二路依次与阻尼器、第二四元比例阀中一个进液孔和表面等离子共振光谱检测器进样端相连。
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公开(公告)号：CN111289425A
公开(公告)日：2020-06-16
申请号：CN202010170831.9
申请日：2020-03-12
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明基于荧光标记流式单分子计数蛋白质含量绝对测量方法包括：将待测蛋白质纯品用稀释液配制成或分步稀释至0.1mg/g-1mg/g，稀释倍数记录D1；对稀释后蛋白质分子进行荧光标记，使荧光染料与每个蛋白质分子结合；将溶液中标记好荧光标记蛋白质与过量荧光染料进行分离；用稀释液对纯化好的荧光标记蛋白质继续稀释至100-1000分子/μL浓度水平，稀释倍数为D2，测量溶液质量流速f，用单分子分析仪对荧光标记蛋白质溶液直接进行流式计数,得到单分子计数结果w；根据由单分子分析仪照射出来激光斑点和毛细管几何尺寸算出检测概率p；根据单分子计数结果w、质量流速f、稀释倍数D和检测概率p，计算蛋白质溶液质量浓度。
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公开(公告)号：CN104569134B
公开(公告)日：2017-12-29
申请号：CN201510006125.X
申请日：2015-01-06
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N27/62
Abstract: 本发明公开了一种基体中蛋白质酶切效率的准确测定方法，包括如下步骤：(1)对目标蛋白进行特异性肽段筛选、酶切，确定特异性酶切肽段；(2)合成特异性肽段；(3)配制标准蛋白母液；(4)初步测定目标蛋白浓度；(5)酶切，测定浓度；(6)添加稀释液，酶切和特异性肽段浓度的同位素稀释质谱测定；(7)根据特异性肽段的浓度计算蛋白浓度；(8)计算添加目标蛋白浓度为步骤(6)时的酶切效率；(9)重复(6)‑(8)的步骤，每次添加不同的蛋白量，得到一系列的酶切效率值；(10)以蛋白添加量和酶切效率作图，并外推到添加蛋白为0的酶切效率，得到蛋白质的准确酶切效率。本发明所述方法具有高准确度、可溯源的优点。
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公开(公告)号：CN107267624A
公开(公告)日：2017-10-20
申请号：CN201710547153.1
申请日：2017-07-06
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: C12Q1/68 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/531
CPC classification number: C12Q1/686 , G01N33/531 , G01N33/577 , G01N33/68 , C12Q2563/159
Abstract: 本发明公开了一种基于数字PCR的蛋白质活性浓度测定基准方法，包括如下步骤(1)准备待测目标蛋白质的抗体；(2)将获得的抗体用生物素进行标记；(3)合成三段单链寡聚核苷酸；(4)分别将两段寡聚核苷酸的5’端和3’端用亲和素进行标记；(5)设计Taqman探针和对应的引物；(6)利用生物素-亲和素之间的放大亲和反应，用寡聚核苷酸标记抗体。(6)将待测目标蛋白用缓冲溶液稀释至5000分子/μL以下的浓度，并在其中加入寡聚核酸标记的两种抗体、第三条寡聚核酸片段及DNA连接酶，形成抗原-抗体复合物。然后进行数字PCR扩增反应，得到的拷贝数记为浓度c0；(7)再次进行数字PCR扩增反应，得到的拷贝数记为c1；(8)待测目标蛋白的浓度为c0-c1。
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Patent Agency Ranking
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公开(公告)号：CN103995077B
公开(公告)日：2016-01-27
申请号：CN201410216797.9
申请日：2014-05-21
IPC: G01N30/88
Abstract: 本发明公开了一种测定奶粉中β-乳球蛋白含量的方法，包括如下步骤：(1)选择TK-11为特异性肽段进行β-乳球蛋白定量；(2)合成上述肽段，同位素标记肽段；(3)采用同位素稀释质谱法对合成的标准肽段进行准确定量；(4)样品处理及酶切；(5)液质分析：酶切处理后的溶液滤膜过滤后，滤液采用质谱进行选择性离子扫描分析；(6)根据公式计算完成奶粉中β-乳球蛋白含量的测定。本发明所述方法测定结果准确、合理。
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公开(公告)号：CN104569134A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201510006125.X
申请日：2015-01-06
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N27/62
Abstract: 本发明公开了一种基体中蛋白质酶切效率的准确测定方法，包括如下步骤：(1)对目标蛋白进行特异性肽段筛选、酶切，确定特异性酶切肽段；(2)合成特异性肽段；(3)配制标准蛋白母液；(4)初步测定目标蛋白浓度；(5)酶切，测定浓度；(6)添加稀释液，酶切和特异性肽段浓度的同位素稀释质谱测定；(7)根据特异性肽段的浓度计算蛋白浓度；(8)计算添加目标蛋白浓度为步骤(6)时的酶切效率；(9)重复(6)-(8)的步骤，每次添加不同的蛋白量，得到一系列的酶切效率值；(10)以蛋白添加量和酶切效率作图，并外推到添加蛋白为0的酶切效率，得到蛋白质的准确酶切效率。本发明所述方法具有高准确度、可溯源的优点。
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公开(公告)号：CN102279227B
公开(公告)日：2013-08-21
申请号：CN201010194602.7
申请日：2010-06-08
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明公开了一种多肽或蛋白含量标准物质定值方法，该方法包括如下步骤：高效液相色谱分离待测样品中的主要成分和杂质；收集分离出的各个组分，将各个组分分别水解为氨基酸，得到各个组分的水解液；向所述各个组分的水解液中加入同位素标记的稳定氨基酸，通过高效液相色谱-同位素稀释质谱法，以国家氨基酸标准物质为标准，测定各个组分中氨基酸的质量分数，计算主要成分水解得到的氨基酸的比例系数；将待测样品水解为氨基酸，得到待测样品水解液，向所述待测样品水解液中加入同位素标记的稳定氨基酸，通过高效液相色谱-同位素稀释质谱法，以国家氨基酸标准物质为标准，测定待测样品水解液中氨基酸的质量分数；计算待测样品中多肽和蛋白的质量分数。本发明的多肽或蛋白含量含量标准物质定值方法准确性高，定值结果可最终溯源到SI单位。
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公开(公告)号：CN103234960A
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201310097254.5
申请日：2013-03-25
Applicant: 中国计量科学研究院 , 上海市计量测试技术研究院
IPC: G01N21/76
Abstract: 一种用于微孔板式化学发光分析仪的计量标准板，包括载荷板，载荷板上开设有均匀分布的承载孔，其中：还包括固定在承载孔中的标准光具，由光源部件和光具支架组成的标准光具的腔体中包括同轴向顺序安装的氚光源、光衰减片、干涉滤光片和中性透射比滤光片。可以灵活地为计量标准板更换各种类型的滤光片，实现各种参数的准确采集。使得检定校准的参数准确、标准，使得仪器的检测数据可靠，数据之间具有高度的可比性。还包括计量标准板的使用方法。
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