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公开(公告)号：CN112457969B
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202011378175.8
申请日：2020-11-30
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种用于生物大分子的单分子计数系统，主要由压力泵、微流控芯片、引流导管、核酸存储池和鞘液存储池、流量调节装置、荧光检测装置以及数据处理装置组成。本发明还公开了基于所述系统的生物大分子单分子计数的计量方法，该方法包括：样本制备、上样、单分子荧光信号检测与计数等步骤，对单个生物大分子进行检测，无需PCR扩增，避免了可能因PCR污染造成定量结果偏高，或定性出现“假阳性”的情况；且减小实验测量偏差，测量结果可直接溯源到SI单位(摩尔)。同时也节省了检测时间，降低了试剂耗材成本。
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公开(公告)号：CN112457969A
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN202011378175.8
申请日：2020-11-30
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种用于生物大分子的单分子计数系统，主要由压力泵、微流控芯片、引流导管、核酸存储池和鞘液存储池、流量调节装置、荧光检测装置以及数据处理装置组成。本发明还公开了基于所述系统的生物大分子单分子计数的计量方法，该方法包括：样本制备、上样、单分子荧光信号检测与计数等步骤，对单个生物大分子进行检测，无需PCR扩增，避免了可能因PCR污染造成定量结果偏高，或定性出现“假阳性”的情况；且减小实验测量偏差，测量结果可直接溯源到SI单位(摩尔)。同时也节省了检测时间，降低了试剂耗材成本。
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公开(公告)号：CN111289425A
公开(公告)日：2020-06-16
申请号：CN202010170831.9
申请日：2020-03-12
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明基于荧光标记流式单分子计数蛋白质含量绝对测量方法包括：将待测蛋白质纯品用稀释液配制成或分步稀释至0.1mg/g-1mg/g，稀释倍数记录D1；对稀释后蛋白质分子进行荧光标记，使荧光染料与每个蛋白质分子结合；将溶液中标记好荧光标记蛋白质与过量荧光染料进行分离；用稀释液对纯化好的荧光标记蛋白质继续稀释至100-1000分子/μL浓度水平，稀释倍数为D2，测量溶液质量流速f，用单分子分析仪对荧光标记蛋白质溶液直接进行流式计数,得到单分子计数结果w；根据由单分子分析仪照射出来激光斑点和毛细管几何尺寸算出检测概率p；根据单分子计数结果w、质量流速f、稀释倍数D和检测概率p，计算蛋白质溶液质量浓度。
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公开(公告)号：CN112911105A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202110068800.7
申请日：2021-01-19
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明涉及核酸分析领域，本发明设计的数字PCR芯片，尤其是通过微透镜阵列与光电转换器件直接贴合，避免使用复杂的光路系统，体积小，便携，适合现场检测。同时将微透镜阵列与电感耦合成像技术或互补金属氧化物半导体成像器件相结合，通过面成像方式，对核酸扩增过程结束后的油包水微滴进行快速成像，可以大幅降低检测时间。本发明亦可用于微流控芯片、微阵列芯片的成像、分析。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117476100A
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311457621.8
申请日：2023-11-03
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G16B20/10
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，公开一种DNA拷贝数含量与质量浓度间量值转换方法，包括：选取所述样本DNA中的内标基因DNA，获取所述内标基因DNA的拷贝数浓度值C1；获取内标基因在样本单倍体基因组中的位点数r；获取所述样本基因组的碱基对数E；获取DNA碱基的平均分子量w；通过所述拷贝数浓度值C1、所述内标基因在样本单倍体基因组中的位点数r、所述碱基对数E和DNA碱基的平均分子量w对所述样本DNA的质量浓度C进行计算；本发明建立了DNA拷贝数含量(copies/μl)精确转换为质量分数(ng/μl)的方法，尤其对转换过引入的不确定度分量进行了有效准确的评估，使经过转换后的标准物质质量分数量值可溯源至国际单位制(g)，从而保证了标准物质量值转换后的计量溯源性。
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公开(公告)号：CN111289425B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202010170831.9
申请日：2020-03-12
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明基于荧光标记流式单分子计数蛋白质含量绝对测量方法包括：将待测蛋白质纯品用稀释液配制成或分步稀释至0.1mg/g‑1mg/g，稀释倍数记录D1；对稀释后蛋白质分子进行荧光标记，使荧光染料与每个蛋白质分子结合；将溶液中标记好荧光标记蛋白质与过量荧光染料进行分离；用稀释液对纯化好的荧光标记蛋白质继续稀释至100‑1000分子/μL浓度水平，稀释倍数为D2，测量溶液质量流速f，用单分子分析仪对荧光标记蛋白质溶液直接进行流式计数,得到单分子计数结果w；根据由单分子分析仪照射出来激光斑点和毛细管几何尺寸算出检测概率p；根据单分子计数结果w、质量流速f、稀释倍数D和检测概率p，计算蛋白质溶液质量浓度。
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公开(公告)号：CN119685454A
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202411919683.0
申请日：2024-12-24
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: C12Q1/6844
Abstract: 本发明提供了一种基于滚环扩增技术的流式核酸单分子计数方法，属于DNA检测技术领域。本发明所述的基于滚环扩增技术的流式核酸单分子计数方法包括以下步骤：DNA样本制备，得到待测DNA样本；基于所述DNA样本，设计引物探针，所述引物探针包括锁环探针、扩增引物和荧光探针；基于所述引物探针进行滚环扩增反应即RCA反应，得到滚环扩增产物：将所述滚环扩增产物导入流式单分子计数仪中进行流式计数，得到所述DNA样本的原始浓度。本发明巧妙地将滚环扩增即RCA等温扩增与单分子计数技术相结合，实现了对核酸单分子特定序列的高精度检测和定量，这一组合大大提升了核酸检测的敏感性、特异性和准确性。
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公开(公告)号：CN119438455A
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202411827453.1
申请日：2024-12-12
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明涉及生物检测技术领域，尤其为一种免消解的等离子体质谱片段DNA含量检测方法，包括以下步骤：S1，DNA样品纯化：使用截留分子量为3KDa的离心管，去除单核苷酸及少于10个碱基的小片段核酸；并对凝胶电泳纯化后的DNA样品进行截留处理，通过多次浓缩与补水实现纯化；S2，液相色谱与质谱条件设定：液相色谱流动相为10mM TRIS‑HCL，以及1mM EDTA，pH设定范围7‑7.5，使用氨水调节pH，最终优化条件为7.3；采用分子量截留法结合尺寸排阻色谱偶联电感耦合等离子体质谱的方法，获得纯度更高的DNA片段，用于候选标准物质DNA。经过纯化的高纯度DNA片段，使用无机磷元素标准曲线进行含量测定，获得片段质量浓度信息。
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公开(公告)号：CN116790584A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310817917.X
申请日：2023-07-05
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种等温聚合酶链反应分析仪校准试剂盒及其应用，属于基因工程技术领域。该试剂盒包括标准物质、扩增引物组、反应缓冲液、聚合酶、染料以及阴性对照；其中所述标准物质为质粒DNA，梯度浓度水平为100‑106copies/μL，所述扩增引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑6所示，所述聚合酶为BstDNA聚合酶，所述染料为LAMP荧光染料(激发：485nm,发射：498nm,检测通道为#imgabs0#GreenI或FAM通道)。本发明提供的等温PCR仪校准用试剂盒和校准技术满足了等温PCR仪的校准需求，填补了技术空白。
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