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公开(公告)号:CN104569134B
公开(公告)日:2017-12-29
申请号:CN201510006125.X
申请日:2015-01-06
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N27/62
Abstract: 本发明公开了一种基体中蛋白质酶切效率的准确测定方法,包括如下步骤:(1)对目标蛋白进行特异性肽段筛选、酶切,确定特异性酶切肽段;(2)合成特异性肽段;(3)配制标准蛋白母液;(4)初步测定目标蛋白浓度;(5)酶切,测定浓度;(6)添加稀释液,酶切和特异性肽段浓度的同位素稀释质谱测定;(7)根据特异性肽段的浓度计算蛋白浓度;(8)计算添加目标蛋白浓度为步骤(6)时的酶切效率;(9)重复(6)‑(8)的步骤,每次添加不同的蛋白量,得到一系列的酶切效率值;(10)以蛋白添加量和酶切效率作图,并外推到添加蛋白为0的酶切效率,得到蛋白质的准确酶切效率。本发明所述方法具有高准确度、可溯源的优点。
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公开(公告)号:CN104569134A
公开(公告)日:2015-04-29
申请号:CN201510006125.X
申请日:2015-01-06
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N27/62
Abstract: 本发明公开了一种基体中蛋白质酶切效率的准确测定方法,包括如下步骤:(1)对目标蛋白进行特异性肽段筛选、酶切,确定特异性酶切肽段;(2)合成特异性肽段;(3)配制标准蛋白母液;(4)初步测定目标蛋白浓度;(5)酶切,测定浓度;(6)添加稀释液,酶切和特异性肽段浓度的同位素稀释质谱测定;(7)根据特异性肽段的浓度计算蛋白浓度;(8)计算添加目标蛋白浓度为步骤(6)时的酶切效率;(9)重复(6)-(8)的步骤,每次添加不同的蛋白量,得到一系列的酶切效率值;(10)以蛋白添加量和酶切效率作图,并外推到添加蛋白为0的酶切效率,得到蛋白质的准确酶切效率。本发明所述方法具有高准确度、可溯源的优点。
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公开(公告)号:CN104458890A
公开(公告)日:2015-03-25
申请号:CN201410787753.1
申请日:2014-12-17
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N27/62
Abstract: 本发明公开了一种同位素稀释质谱法测定胰岛素含量的方法,包括如下步骤:(1)合成同位素标记的胰岛素B链并配制成溶液作为内标;(2)制备胰岛素标准和胰岛素样品溶液;(3)取胰岛素标准溶液和样品溶液并分别加入同位素标记的胰岛素B链;(4)将所述预处理后的胰岛素标准溶液和胰岛素样品进行质谱分析;(5)计算所述胰岛素样品溶液中胰岛素含量。本发明同位素稀释质谱法测定胰岛素含量的方法具有准确度高,结果可靠的优点。
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公开(公告)号:CN104458890B
公开(公告)日:2017-03-22
申请号:CN201410787753.1
申请日:2014-12-17
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N27/62
Abstract: 本发明公开了一种同位素稀释质谱法测定胰岛素含量的方法,包括如下步骤:(1)合成同位素标记的胰岛素B链并配制成溶液作为内标;(2)制备胰岛素标准和胰岛素样品溶液;(3)取胰岛素标准溶液和样品溶液并分别加入同位素标记的胰岛素B链;(4)将所述预处理后的胰岛素标准溶液和胰岛素样品进行质谱分析;(5)计算所述胰岛素样品溶液中胰岛素含量。本发明同位素稀释质谱法测定胰岛素含量的方法具有准确度高,结果可靠的优点。
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