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公开(公告)号：CN105664148A
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201610053070.2
申请日：2016-01-25
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: A61K39/02 , A61K2039/70 , A61K2300/00
Abstract: 本发明公开一种基因工程亚单位混合疫苗及其制备方法和应用，属于兽用疫苗研究领域。本发明运用基因工程的方法大量表达了3种重组蛋白rApxⅠA、rApxIIA和rOMPD，并且重组蛋白具有较好的抗原性。本发明的混合疫苗较三种蛋白单独免疫，rOMPD、rApxⅠA的抗体水平均高于单独免疫时的抗体水平，rApxⅡA的抗体水平和混合疫苗抗体水平显著高于对照组，说明重组亚单位混合疫苗诱导的体液免疫反应，rApxIA和rOMPD抗体在小鼠的交叉免疫保护中发挥极其重要作用。接种后对免疫动物安全无害，是一种具有广阔前景的新型疫苗，将对我国猪传染性胸膜肺炎的防控提供物质储备和技术支撑，具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN105664148B
公开(公告)日：2019-05-07
申请号：CN201610053070.2
申请日：2016-01-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种基因工程亚单位混合疫苗及其制备方法和应用，属于兽用疫苗研究领域。本发明运用基因工程的方法大量表达了3种重组蛋白rApxⅠA、rApxIIA和rOMPD，并且重组蛋白具有较好的抗原性。本发明的混合疫苗较三种蛋白单独免疫，rOMPD、rApxⅠA的抗体水平均高于单独免疫时的抗体水平，rApxⅡA的抗体水平和混合疫苗抗体水平显著高于对照组，说明重组亚单位混合疫苗诱导的体液免疫反应，rApxIA和rOMPD抗体在小鼠的交叉免疫保护中发挥极其重要作用。接种后对免疫动物安全无害，是一种具有广阔前景的新型疫苗，将对我国猪传染性胸膜肺炎的防控提供物质储备和技术支撑，具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN103627821B
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201310632188.7
申请日：2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明公开一种检测猪传染性胃肠炎病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下：首先配制RT-LAMP反应体系，包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA；恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读：阳性结果为出现两条红色条带，一条位于检测区内，另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，易于大范围推广应用。
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公开(公告)号：CN103602761A
公开(公告)日：2014-02-26
申请号：CN201310629121.8
申请日：2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开一种检测猪瘟病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下：首先配制RT-LAMP反应体系，包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、Probe杂交探针、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA；恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读：阳性结果为出现两条红色条带，一条位于检测区内，另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，易于大范围推广应用。
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公开(公告)号：CN103667334A
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201310542901.9
申请日：2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA及制备方法与应用。本发明以羊布鲁氏菌M5基因组为模板，PCR得到znuA基因的上、下游同源臂，并将其连接，得到片段ΔznuA；将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上，得到重组质粒pRE-ΔznuA；将该质粒导入羊布鲁氏菌M5-Δbp26细胞中，分别通过氯霉素和蔗糖选择培养基筛选，得到同源重组双交换子，为重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA。该菌株较M5亲本菌株，生长特性一致，遗传稳定使其不易返祖，毒力小且免疫效果保持良好，并因bp26基因缺失标记可应用于区分检测自然感染或人工免疫。因此，该菌株可作为一种效果更佳的标记疫苗应用于临床。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103602761B
公开(公告)日：2015-11-04
申请号：CN201310629121.8
申请日：2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测猪瘟病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下：首先配制RT-LAMP反应体系，包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、Probe杂交探针、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA；恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读：阳性结果为出现两条红色条带，一条位于检测区内，另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，易于大范围推广应用。
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公开(公告)号：CN103616509B
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201310627844.4
申请日：2013-11-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/09
Abstract: 本发明公开一种检测猪乙型脑炎病毒的EⅢ-间接ELISA抗体检测试剂盒及应用。本发明试剂盒包括如下组成：以纯化的JEV-EⅢ蛋白作为包被抗原的酶标板、洗涤液、血清稀释液、兔抗猪酶标二抗、底物显色液、终止液、JEV阳性血清、JEV阴性血清。本发明使用的包被抗原易于稳定、大量获得，纯化方法简单易于实现，重组蛋白的浓度易于测定和控制，有利于工业化大量生产。本发明试剂盒用于检测猪乙型脑炎病毒抗体，与现有技术中ELISA试剂盒的检测符合率为90%。本发明试剂盒便于操作，灵敏度高，特异性好，使用成本低，重复性好，适合推广应用，为临床上快速检测JEV抗体提供了可靠手段。
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公开(公告)号：CN103571867B
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201310542575.1
申请日：2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA及制备方法与应用。本发明通过以羊布鲁氏菌M5基因组DNA为模板，PCR扩增得到znuA基因的上、下游同源臂；将znuA基因的上、下游同源臂连接，得到片段ΔznuA；将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上，得到自杀性同源重组质粒pRE-ΔznuA；将该质粒导入羊布鲁氏菌M5细胞中，在氯霉素的选择压力下，得到同源重组单交换子，再将同源重组单交换子涂布于选择培养基上，得到羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA。该菌株较M5菌株，具有良好的生长特性和遗传稳定性，毒力小且免疫效果相当，因此，其有望成为新型疫苗进行应用。
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公开(公告)号：CN103616509A
公开(公告)日：2014-03-05
申请号：CN201310627844.4
申请日：2013-11-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/531
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N33/531 , G01N2333/185
Abstract: 本发明公开一种检测猪乙型脑炎病毒的EⅢ-间接ELISA抗体检测试剂盒及应用。本发明试剂盒包括如下组成：以纯化的JEV-EⅢ蛋白作为包被抗原的酶标板、洗涤液、血清稀释液、兔抗猪酶标二抗、底物显色液、终止液、JEV阳性血清、JEV阴性血清。本发明使用的包被抗原易于稳定、大量获得，纯化方法简单易于实现，重组蛋白的浓度易于测定和控制，有利于工业化大量生产。本发明试剂盒用于检测猪乙型脑炎病毒抗体，与现有技术中ELISA试剂盒的检测符合率为90%。本发明试剂盒便于操作，灵敏度高，特异性好，使用成本低，重复性好，适合推广应用，为临床上快速检测JEV抗体提供了可靠手段。
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公开(公告)号：CN103571867A
公开(公告)日：2014-02-12
申请号：CN201310542575.1
申请日：2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA及制备方法与应用。本发明通过以羊布鲁氏菌M5基因组DNA为模板，PCR扩增得到znuA基因的上、下游同源臂；将znuA基因的上、下游同源臂连接，得到片段ΔznuA；将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上，得到自杀性同源重组质粒pRE-ΔznuA；将该质粒导入羊布鲁氏菌M5细胞中，在氯霉素的选择压力下，得到同源重组单交换子，再将同源重组单交换子涂布于选择培养基上，得到羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA。该菌株较M5菌株，具有良好的生长特性和遗传稳定性，毒力小且免疫效果相当，因此，其有望成为新型疫苗进行应用。
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