一种制备莽草酸或提高莽草酸产量的方法

    公开(公告)号:CN119242722A

    公开(公告)日:2025-01-03

    申请号:CN202411451499.8

    申请日:2024-10-17

    Abstract: 本发明公开了一种制备莽草酸或提高莽草酸产量的方法,属于生物技术领域。前述方法包括将蛋白质和发酵产物进行反应以提高所述发酵产物中3‑脱氢莽草酸含量和/或增加所述发酵产物中的莽草酸含量;所述蛋白质为将SEQ ID No.1的第19位氨基酸由谷氨酸突变为丝氨酸且第102位氨基酸由苏氨酸突变为丝氨酸,且保持SEQ ID No.1的其他氨基酸残基不变得到的蛋白质。前述突变体能改变其对3‑脱氢莽草酸的底物结合特异性,从而加强对底物脱氢莽草酸的亲和力,减少对莽草酸的氧化反应,增加由3‑脱氢莽草酸生成莽草酸的还原反应,最终提高莽草酸产量。

    一种适用于链霉菌活细胞的功能核酸探针导入方法及其应用

    公开(公告)号:CN114814207B

    公开(公告)日:2024-10-29

    申请号:CN202210375088.X

    申请日:2022-04-11

    Abstract: 本发明公开了一种适用于链霉菌活细胞的功能核酸探针导入方法,本发明首先构建了四环素特异性分子信标核酸探针FAM‑Tc‑BHQ1,然后将FAM‑Tc‑BHQ1与穿膜肽KH9‑BP100于室温进行混合孵育,制备穿膜肽‑核酸适配体分子信标复合物,并且提供了一种适用于链霉菌活细胞的功能核酸探针导入方法。本发明以四环素类抗生素产生菌金色链霉菌为模型,开展了穿膜肽介导的四环素特异性分子信标的活细胞载运及靶标检测研究。本发明采用穿膜肽非共价偶联四环素特异性分子信标,实现了分子信标的金色链霉菌活细胞载运及胞内四环素的单细胞水平活细胞荧光检测。

    一种N-甲基血清素及N-N-二甲基血清素的生物合成方法

    公开(公告)号:CN116814668A

    公开(公告)日:2023-09-29

    申请号:CN202310799275.5

    申请日:2023-06-30

    Abstract: 本发明基于合成生物学的思路,具体公开一种N‑甲基血清素及N‑N‑二甲基血清素的生物合成方法,包括如下步骤:(1)构建含有色氨酸羟化酶基因片段DjTPH、大肠杆菌内源基因片段folE、folX、folM以及pTrc99a质粒片段的5‑羟基色氨酸的高效转化重组质粒;(2)构建含有多巴脱羧酶基因片段SsDDC、吲哚胺‑N‑甲基转移酶基因片段HsINMT以及pACYC184质粒片段的N‑甲基血清素、N‑N‑二甲基血清素合成重组质粒;(3)将上述重组质粒转化至大肠杆菌MG1655中,获得工程菌;(4)改造后的工程菌以色氨酸为底物,全细胞催化合成N‑甲基血清素和N‑N‑二甲基血清素;本发明提出了一种高效、低成本、可持续、生产条件温和的N‑甲基血清素和N‑N‑二甲基血清素生物合成方式,具备工业化生产潜力。

    热稳定胆固醇酯酶突变体OPE-A355E/T383E及其制备方法

    公开(公告)号:CN109022392B

    公开(公告)日:2022-01-04

    申请号:CN201810897088.X

    申请日:2018-08-08

    Abstract: 本发明提供热稳定胆固醇酯酶突变体OPE‑A355E/T383E及其制备方法,所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用FoldX等软件,结合热稳定胆固醇酯酶突变体自由能的变化值,构建突变体电子文库;利用YASARA等软件分析淘汰结构不合理的突变体;对具有盐桥效应的突变体,利用生物信息学软件分析其相对溶剂表面积、形成盐桥的氨基酸残基之间的间隔距离等,筛选符合要求的突变体,组成微型突变电子文库。利用定点突变技术,实验评估、验证突变效应。利用上述方法构建热稳定性胆固醇酯酶突变体,阳性突变体频率高达52.4%,有效降低筛选工作量;获得的突变体的半衰期延长10.5倍。

    一种产多糖、腺苷和虫草素的融合菌株

    公开(公告)号:CN108410744B

    公开(公告)日:2021-06-18

    申请号:CN201810234475.5

    申请日:2018-03-21

    Abstract: 本发明公开了一种产多糖、腺苷和虫草素的融合菌株。本发明公开的融合菌株为将蛹虫草菌与羊肚菌进行融合筛选得到融合菌株,得到的融合菌株具有以下特征:与蛹虫草菌和羊肚菌相比,融合菌株的生物量均增加,融合菌株的产物种类和产物产量也均增加;其中,产物种类体现在组成多糖的单糖种类、腺苷和虫草素上,该多糖的组成包括葡萄糖、甘露糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖。本发明得到的融合菌株,丰富了珍稀药食同源真菌的活性成分,实现了一菌多效以及蛹虫草资源和羊肚菌资源生物活性物质有效补充,从而生理活性成分多优并举,生理活性功能多效叠加的目的,具有极高的现实意义与应用价值。

    产D-苯乳酸的基因工程菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN107446871B

    公开(公告)日:2021-01-01

    申请号:CN201710623316.X

    申请日:2017-07-27

    Abstract: 本发明公开了产D‑苯乳酸的基因工程菌及其构建方法与应用。本发明所提供的包括如下步骤:将与D‑苯乳酸合成相关的基因导入宿主菌得到产D‑苯乳酸的重组菌;所述与D‑苯乳酸合成相关的基因为芳香族氨基酸氨基转移酶的编码基因、D型乳酸脱氢酶的编码基因和NADH依赖型的谷氨酸脱氢酶的编码基因。利用本发明所构建的产D‑苯乳酸的基因工程菌生产D‑苯乳酸,具有以下优点:构建了一个辅因子循环体系,增加还原力的供应;使用谷氨酸、α‑酮戊二酸等添加物提高了辅因子循环效率,进而进一步提高了D‑苯乳酸的合成量;全细胞催化方法简化了D‑苯乳酸生产过程,生产周期短,因而将在今后的D‑苯乳酸的生产中占据了重要的地位。

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