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公开(公告)号:CN119242722A
公开(公告)日:2025-01-03
申请号:CN202411451499.8
申请日:2024-10-17
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了一种制备莽草酸或提高莽草酸产量的方法,属于生物技术领域。前述方法包括将蛋白质和发酵产物进行反应以提高所述发酵产物中3‑脱氢莽草酸含量和/或增加所述发酵产物中的莽草酸含量;所述蛋白质为将SEQ ID No.1的第19位氨基酸由谷氨酸突变为丝氨酸且第102位氨基酸由苏氨酸突变为丝氨酸,且保持SEQ ID No.1的其他氨基酸残基不变得到的蛋白质。前述突变体能改变其对3‑脱氢莽草酸的底物结合特异性,从而加强对底物脱氢莽草酸的亲和力,减少对莽草酸的氧化反应,增加由3‑脱氢莽草酸生成莽草酸的还原反应,最终提高莽草酸产量。
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公开(公告)号:CN114814207B
公开(公告)日:2024-10-29
申请号:CN202210375088.X
申请日:2022-04-11
Applicant: 福建师范大学
IPC: C12N15/11 , G01N33/569 , G01N33/53 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种适用于链霉菌活细胞的功能核酸探针导入方法,本发明首先构建了四环素特异性分子信标核酸探针FAM‑Tc‑BHQ1,然后将FAM‑Tc‑BHQ1与穿膜肽KH9‑BP100于室温进行混合孵育,制备穿膜肽‑核酸适配体分子信标复合物,并且提供了一种适用于链霉菌活细胞的功能核酸探针导入方法。本发明以四环素类抗生素产生菌金色链霉菌为模型,开展了穿膜肽介导的四环素特异性分子信标的活细胞载运及靶标检测研究。本发明采用穿膜肽非共价偶联四环素特异性分子信标,实现了分子信标的金色链霉菌活细胞载运及胞内四环素的单细胞水平活细胞荧光检测。
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公开(公告)号:CN115948438B
公开(公告)日:2024-10-11
申请号:CN202210921164.2
申请日:2022-08-02
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了一种用于全细胞催化制备β‑烟酰胺单核苷酸的重组菌及其构建方法和应用;采用该方法将核糖‑1‑激酶、嘌呤核苷磷酸化酶、烟酰胺核糖激酶及聚磷酸激酶通过表达载体导入到大肠杆菌突变株K12△aphA△nadR△rihC中构建的重组菌KN‑01,通过弱化NMN的消耗途径和烟酰胺核糖的降解途径,以及NMN的合成逆反应,有效地提高了NMN的产量和底物NR的转化效率,KN01菌株组NMN的产量最高,烟酰胺核糖的转化率最高;以浓度为0.2M的核糖/烟酰胺为底物,KN01菌株的转化率均在95%以上,产量均大于65g/L,底物残留量低,便于下游结晶精制;采用本发明的方法构建的基因工程菌生产NMN,具有原料低廉,工艺简单,生产效率高等优点,具有良好的工业化应用前景。
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公开(公告)号:CN116814668A
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202310799275.5
申请日:2023-06-30
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明基于合成生物学的思路,具体公开一种N‑甲基血清素及N‑N‑二甲基血清素的生物合成方法,包括如下步骤:(1)构建含有色氨酸羟化酶基因片段DjTPH、大肠杆菌内源基因片段folE、folX、folM以及pTrc99a质粒片段的5‑羟基色氨酸的高效转化重组质粒;(2)构建含有多巴脱羧酶基因片段SsDDC、吲哚胺‑N‑甲基转移酶基因片段HsINMT以及pACYC184质粒片段的N‑甲基血清素、N‑N‑二甲基血清素合成重组质粒;(3)将上述重组质粒转化至大肠杆菌MG1655中,获得工程菌;(4)改造后的工程菌以色氨酸为底物,全细胞催化合成N‑甲基血清素和N‑N‑二甲基血清素;本发明提出了一种高效、低成本、可持续、生产条件温和的N‑甲基血清素和N‑N‑二甲基血清素生物合成方式,具备工业化生产潜力。
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公开(公告)号:CN111154707B
公开(公告)日:2022-08-30
申请号:CN202010057352.6
申请日:2020-01-19
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了一种基因工程化大肠杆菌及褪黑素的生产方法。本发明的基因工程化大肠杆菌包含N‑乙酰转移酶基因和O‑甲基转移酶基因,且所述N‑乙酰转移酶基因和O‑甲基转移酶基因能够在所述大肠杆菌的胞内表达,形成具有活性的N‑乙酰转移酶和O‑甲基转移酶。本发明利用基因工程化大肠杆菌生产褪黑素,反应条件温和。
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公开(公告)号:CN114438005A
公开(公告)日:2022-05-06
申请号:CN202111576815.0
申请日:2021-12-22
Applicant: 福建师范大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/52 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12N9/00 , C12N9/12 , C12N9/88 , C12N9/80 , C12P17/16 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开一种用于合成靛蓝色素重组菌的构建方法及应用,将靛蓝合成酶,4’‑磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶以及谷氨酰胺合成酶的编码基因,通过重组载体导入突变型大肠杆菌中构建得到用于合成靛蓝色素的重组菌;利用重组菌能够弱化谷氨酸和谷氨酰胺的分支途径,有效地提高了靛蓝色素的产量和谷氨酸盐的转化效率。采用本发明的方法构建的重组菌生产靛蓝色素,具有原料低廉,生物转化方法反应条件温和,工艺简单,生产效率高等优点,具有良好的工业化应用前景。
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公开(公告)号:CN109022392B
公开(公告)日:2022-01-04
申请号:CN201810897088.X
申请日:2018-08-08
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明提供热稳定胆固醇酯酶突变体OPE‑A355E/T383E及其制备方法,所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用FoldX等软件,结合热稳定胆固醇酯酶突变体自由能的变化值,构建突变体电子文库;利用YASARA等软件分析淘汰结构不合理的突变体;对具有盐桥效应的突变体,利用生物信息学软件分析其相对溶剂表面积、形成盐桥的氨基酸残基之间的间隔距离等,筛选符合要求的突变体,组成微型突变电子文库。利用定点突变技术,实验评估、验证突变效应。利用上述方法构建热稳定性胆固醇酯酶突变体,阳性突变体频率高达52.4%,有效降低筛选工作量;获得的突变体的半衰期延长10.5倍。
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公开(公告)号:CN113699194A
公开(公告)日:2021-11-26
申请号:CN202110967604.3
申请日:2021-08-23
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开一种利用氧化还原电位调控甲基营养菌生产吡咯喹啉醌的方法,包括菌种活化、种子培养和发酵生产;在甲基营养菌发酵生产吡咯喹啉醌的体系中引入氧化还原电位电极,通过控制体系中通气量和搅拌转速来调节发酵生产阶段的氧化还原电位在高电位氧化阶段和低电位还原阶段变化,进而保证菌体生长和吡咯喹啉醌的积累,本发明的方法能够缩短发酵时间,同时提高吡咯喹啉醌的产量和产率及发酵体系的稳定性。
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公开(公告)号:CN108410744B
公开(公告)日:2021-06-18
申请号:CN201810234475.5
申请日:2018-03-21
Applicant: 福建师范大学 , 厦门元尊生物工程有限公司
Abstract: 本发明公开了一种产多糖、腺苷和虫草素的融合菌株。本发明公开的融合菌株为将蛹虫草菌与羊肚菌进行融合筛选得到融合菌株,得到的融合菌株具有以下特征:与蛹虫草菌和羊肚菌相比,融合菌株的生物量均增加,融合菌株的产物种类和产物产量也均增加;其中,产物种类体现在组成多糖的单糖种类、腺苷和虫草素上,该多糖的组成包括葡萄糖、甘露糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖。本发明得到的融合菌株,丰富了珍稀药食同源真菌的活性成分,实现了一菌多效以及蛹虫草资源和羊肚菌资源生物活性物质有效补充,从而生理活性成分多优并举,生理活性功能多效叠加的目的,具有极高的现实意义与应用价值。
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公开(公告)号:CN107446871B
公开(公告)日:2021-01-01
申请号:CN201710623316.X
申请日:2017-07-27
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了产D‑苯乳酸的基因工程菌及其构建方法与应用。本发明所提供的包括如下步骤:将与D‑苯乳酸合成相关的基因导入宿主菌得到产D‑苯乳酸的重组菌;所述与D‑苯乳酸合成相关的基因为芳香族氨基酸氨基转移酶的编码基因、D型乳酸脱氢酶的编码基因和NADH依赖型的谷氨酸脱氢酶的编码基因。利用本发明所构建的产D‑苯乳酸的基因工程菌生产D‑苯乳酸,具有以下优点:构建了一个辅因子循环体系,增加还原力的供应;使用谷氨酸、α‑酮戊二酸等添加物提高了辅因子循环效率,进而进一步提高了D‑苯乳酸的合成量;全细胞催化方法简化了D‑苯乳酸生产过程,生产周期短,因而将在今后的D‑苯乳酸的生产中占据了重要的地位。
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