产D-苯乳酸的基因工程菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN107446871B

    公开(公告)日:2021-01-01

    申请号:CN201710623316.X

    申请日:2017-07-27

    Abstract: 本发明公开了产D‑苯乳酸的基因工程菌及其构建方法与应用。本发明所提供的包括如下步骤:将与D‑苯乳酸合成相关的基因导入宿主菌得到产D‑苯乳酸的重组菌;所述与D‑苯乳酸合成相关的基因为芳香族氨基酸氨基转移酶的编码基因、D型乳酸脱氢酶的编码基因和NADH依赖型的谷氨酸脱氢酶的编码基因。利用本发明所构建的产D‑苯乳酸的基因工程菌生产D‑苯乳酸,具有以下优点:构建了一个辅因子循环体系,增加还原力的供应;使用谷氨酸、α‑酮戊二酸等添加物提高了辅因子循环效率,进而进一步提高了D‑苯乳酸的合成量;全细胞催化方法简化了D‑苯乳酸生产过程,生产周期短,因而将在今后的D‑苯乳酸的生产中占据了重要的地位。

    生产吡咯喹啉醌的细菌及其应用

    公开(公告)号:CN106086052B

    公开(公告)日:2019-11-01

    申请号:CN201610512635.9

    申请日:2016-07-01

    Abstract: 本发明公开了生产吡咯喹啉醌的细菌及其应用。本发明所提供的细菌是将特异质粒导入出发菌得到的,所述特异质粒是在出发质粒中导入PqqA蛋白的编码基因、PqqB蛋白的编码基因、PqqC蛋白的编码基因、pqqD蛋白的编码基因和PqqE蛋白的编码基因得到的。所述PqqA蛋白为(Y1)或(Y2)或(Y3):(Y1)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白和PqqA3蛋白;(Y2)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白和PqqA3蛋白中的任意两个蛋白;(Y3)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白或PqqA3蛋白。实验证明,本发明所提供的细菌可有效提高PQQ的产量,具有原料低廉、工艺简单、生产效率高等优点,具有良好的工业化应用前景。

    一种甲基营养菌发酵液中吡咯喹啉醌的分离纯化方法及其应用

    公开(公告)号:CN107056782B

    公开(公告)日:2019-05-14

    申请号:CN201710441502.1

    申请日:2017-06-13

    Abstract: 本发明公开了一种甲基营养菌发酵液中吡咯喹啉醌的分离纯化方法及其应用。本发明的方法包括如下步骤:(1)将发酵液先经大孔树脂富集,再依次经过缓冲液和水进行洗脱,收集洗脱液,得到富含吡咯喹啉醌的富集液;(2)将所述富含吡咯喹啉醌的富集液经亲水性硅胶填料纯化,得到吡咯喹啉醌母液;(3)使所述吡咯喹啉醌母液中的吡咯喹啉醌结晶析出,得到吡咯喹啉醌粗晶体;(4)采用碱溶酸沉法将所述吡咯喹啉醌粗晶体进行重结晶,得到吡咯喹啉醌。通过实验证明:本发明的方法具有工艺操作简单、衔接度高,产品回收率和纯度高的特点,可用于大规模工业化生产制备吡咯喹啉醌。

    无载体固定化米根霉脂肪酶及其制备方法和生产生物柴油的应用

    公开(公告)号:CN104928279B

    公开(公告)日:2018-06-15

    申请号:CN201510270467.2

    申请日:2015-05-25

    Abstract: 本发明提供了一种无载体固定化米根霉脂肪酶及其制备方法和应用。本发明的制备方法包括以下步骤:1)将蛋白交联助剂加入含米根霉脂肪酶的缓冲液中以形成第一溶液,所述蛋白交联助剂为血清白蛋白;2)向第一溶液中加入乙二醇二甲醚以使米根霉脂肪酶进行沉淀,静置后得到含米根霉脂肪酶的第二溶液;3)向的第二溶液加入交联剂以形成混合溶液,然后将该混合溶液孵育,其中,所述交联剂选自乙酸酐、甲醛和戊二醛;4)将步骤3)孵育后的混合溶液进行沉淀以得到交联酶聚体。本发明的无载体固定化米根霉脂肪酶催化油脂转酯化反应较强,重复使用多次后仍保持较强活性。

    制备胞磷胆碱用重组菌、重组菌构建方法及应用

    公开(公告)号:CN118755647A

    公开(公告)日:2024-10-11

    申请号:CN202410648478.9

    申请日:2024-05-23

    Abstract: 本发明涉及合成生物学技术领域,具体公开制备胞磷胆碱用重组菌及其应用,所述重组菌包括能够表达胆碱激酶和磷酸胆碱胞苷转移酶编码基因的重组菌A,在ATP和CTP共底物条件下催化氯化胆碱形成胞磷胆碱;能够表达胞苷激酶、胞苷酸激酶和核苷二磷酸激酶编码基因的重组菌B,在ATP共底物条件下催化CR形成CTP以及能够表达多磷酸AMP磷酸转移酶、多聚磷酸激酶和焦磷酸水解酶编码基因的重组菌C,直接以六偏磷酸钠为底物催化AMP/ADP形成ATP,并降解焦磷酸为磷酸促进胞磷胆碱的合成。本发明提供的重组菌应用在产胞磷胆碱中,仅需添加与氯化胆碱浓度等摩尔比的胞苷和5%摩尔比的单磷酸腺苷作为共底物,就能获得高浓度的胞磷胆碱,实现胞磷胆碱的高产量以及氯化胆碱和CR的高转化率。

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