定向驯化选育高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌

    公开(公告)号:CN105624084B

    公开(公告)日:2019-04-16

    申请号:CN201610059296.3

    申请日:2016-01-28

    Abstract: 本发明公开了定向驯化选育高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌。本发明提供了一种定向驯化选育高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌突变株的方法,包括如下步骤:1)将初始甲基营养菌作为处理对象在含有甲醇的液体培养基中进行多次诱导培养,得到驯化后菌,所有驯化后菌组成驯化菌株库;2)发酵所述驯化菌株库中的驯化后菌,收集所有驯化后菌发酵液;3)检测所述所有驯化后菌发酵液中吡咯喹啉醌,选取发酵液中吡咯喹啉醌产量高于所述初始甲基营养菌的发酵液中吡咯喹啉醌的单菌株,为高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌突变株。本发明通过逐步提高培养基中的甲醇浓度对甲基营养菌进行应激驯化,提高了选育正突变率以及吡咯喹啉醌产量增加幅度。

    定向驯化选育高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌

    公开(公告)号:CN105624084A

    公开(公告)日:2016-06-01

    申请号:CN201610059296.3

    申请日:2016-01-28

    Abstract: 本发明公开了定向驯化选育高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌。本发明提供了一种定向驯化选育高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌突变株的方法,包括如下步骤:1)将初始甲基营养菌作为处理对象在含有甲醇的液体培养基中进行多次诱导培养,得到驯化后菌,所有驯化后菌组成驯化菌株库;2)发酵所述驯化菌株库中的驯化后菌,收集所有驯化后菌发酵液;3)检测所述所有驯化后菌发酵液中吡咯喹啉醌,选取发酵液中吡咯喹啉醌产量高于所述初始甲基营养菌的发酵液中吡咯喹啉醌的单菌株,为高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌突变株。本发明通过逐步提高培养基中的甲醇浓度对甲基营养菌进行应激驯化,提高了选育正突变率以及吡咯喹啉醌产量增加幅度。

    生产吡咯喹啉醌的细菌及其应用

    公开(公告)号:CN106086052B

    公开(公告)日:2019-11-01

    申请号:CN201610512635.9

    申请日:2016-07-01

    Abstract: 本发明公开了生产吡咯喹啉醌的细菌及其应用。本发明所提供的细菌是将特异质粒导入出发菌得到的,所述特异质粒是在出发质粒中导入PqqA蛋白的编码基因、PqqB蛋白的编码基因、PqqC蛋白的编码基因、pqqD蛋白的编码基因和PqqE蛋白的编码基因得到的。所述PqqA蛋白为(Y1)或(Y2)或(Y3):(Y1)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白和PqqA3蛋白;(Y2)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白和PqqA3蛋白中的任意两个蛋白;(Y3)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白或PqqA3蛋白。实验证明,本发明所提供的细菌可有效提高PQQ的产量,具有原料低廉、工艺简单、生产效率高等优点,具有良好的工业化应用前景。

    一种甲基营养菌发酵液中吡咯喹啉醌的分离纯化方法及其应用

    公开(公告)号:CN107056782B

    公开(公告)日:2019-05-14

    申请号:CN201710441502.1

    申请日:2017-06-13

    Abstract: 本发明公开了一种甲基营养菌发酵液中吡咯喹啉醌的分离纯化方法及其应用。本发明的方法包括如下步骤:(1)将发酵液先经大孔树脂富集,再依次经过缓冲液和水进行洗脱,收集洗脱液,得到富含吡咯喹啉醌的富集液;(2)将所述富含吡咯喹啉醌的富集液经亲水性硅胶填料纯化,得到吡咯喹啉醌母液;(3)使所述吡咯喹啉醌母液中的吡咯喹啉醌结晶析出,得到吡咯喹啉醌粗晶体;(4)采用碱溶酸沉法将所述吡咯喹啉醌粗晶体进行重结晶,得到吡咯喹啉醌。通过实验证明:本发明的方法具有工艺操作简单、衔接度高,产品回收率和纯度高的特点,可用于大规模工业化生产制备吡咯喹啉醌。

    生产吡咯喹啉醌的细菌及其应用

    公开(公告)号:CN106086052A

    公开(公告)日:2016-11-09

    申请号:CN201610512635.9

    申请日:2016-07-01

    Abstract: 本发明公开了生产吡咯喹啉醌的细菌及其应用。本发明所提供的细菌是将特异质粒导入出发菌得到的,所述特异质粒是在出发质粒中导入PqqA蛋白的编码基因、PqqB蛋白的编码基因、PqqC蛋白的编码基因、pqqD蛋白的编码基因和PqqE蛋白的编码基因得到的。所述PqqA蛋白为(Y1)或(Y2)或(Y3):(Y1)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白和PqqA3蛋白;(Y2)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白和PqqA3蛋白中的任意两个蛋白;(Y3)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白或PqqA3蛋白。实验证明,本发明所提供的细菌可有效提高PQQ的产量,具有原料低廉、工艺简单、生产效率高等优点,具有良好的工业化应用前景。

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