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公开(公告)号:CN107056782A
公开(公告)日:2017-08-18
申请号:CN201710441502.1
申请日:2017-06-13
Applicant: 福建师范大学
IPC: C07D471/04 , C12P17/18 , C12N1/20 , C12R1/01
CPC classification number: C07D471/04 , C07B2200/13 , C12P17/182 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种甲基营养菌发酵液中吡咯喹啉醌的分离纯化方法及其应用。本发明的方法包括如下步骤:(1)将发酵液先经大孔树脂富集,再依次经过缓冲液和水进行洗脱,收集洗脱液,得到富含吡咯喹啉醌的富集液;(2)将所述富含吡咯喹啉醌的富集液经亲水性硅胶填料纯化,得到吡咯喹啉醌母液;(3)使所述吡咯喹啉醌母液中的吡咯喹啉醌结晶析出,得到吡咯喹啉醌粗晶体;(4)采用碱溶酸沉法将所述吡咯喹啉醌粗晶体进行重结晶,得到吡咯喹啉醌。通过实验证明:本发明的方法具有工艺操作简单、衔接度高,产品回收率和纯度高的特点,可用于大规模工业化生产制备吡咯喹啉醌。
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公开(公告)号:CN105624084B
公开(公告)日:2019-04-16
申请号:CN201610059296.3
申请日:2016-01-28
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了定向驯化选育高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌。本发明提供了一种定向驯化选育高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌突变株的方法,包括如下步骤:1)将初始甲基营养菌作为处理对象在含有甲醇的液体培养基中进行多次诱导培养,得到驯化后菌,所有驯化后菌组成驯化菌株库;2)发酵所述驯化菌株库中的驯化后菌,收集所有驯化后菌发酵液;3)检测所述所有驯化后菌发酵液中吡咯喹啉醌,选取发酵液中吡咯喹啉醌产量高于所述初始甲基营养菌的发酵液中吡咯喹啉醌的单菌株,为高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌突变株。本发明通过逐步提高培养基中的甲醇浓度对甲基营养菌进行应激驯化,提高了选育正突变率以及吡咯喹啉醌产量增加幅度。
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公开(公告)号:CN108342378A
公开(公告)日:2018-07-31
申请号:CN201810228327.2
申请日:2018-03-20
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶突变体及其编码基因与应用。本发明提供了一种蛋白质,是将来源于乳酸菌的谷氨酸脱羧酶b蛋白的第37位丙氨酸和/或第153位丙氨酸进行突变得到的。实验证明,采用本发明所提供的谷氨酸脱羧酶突变体,较野生型漆酶相比,具有比活力高且酸性依赖弱的特点,在γ-氨基丁酸(GABA)的制备中有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN105624084A
公开(公告)日:2016-06-01
申请号:CN201610059296.3
申请日:2016-01-28
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了定向驯化选育高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌。本发明提供了一种定向驯化选育高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌突变株的方法,包括如下步骤:1)将初始甲基营养菌作为处理对象在含有甲醇的液体培养基中进行多次诱导培养,得到驯化后菌,所有驯化后菌组成驯化菌株库;2)发酵所述驯化菌株库中的驯化后菌,收集所有驯化后菌发酵液;3)检测所述所有驯化后菌发酵液中吡咯喹啉醌,选取发酵液中吡咯喹啉醌产量高于所述初始甲基营养菌的发酵液中吡咯喹啉醌的单菌株,为高产吡咯喹啉醌的甲基营养菌突变株。本发明通过逐步提高培养基中的甲醇浓度对甲基营养菌进行应激驯化,提高了选育正突变率以及吡咯喹啉醌产量增加幅度。
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公开(公告)号:CN113699194A
公开(公告)日:2021-11-26
申请号:CN202110967604.3
申请日:2021-08-23
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开一种利用氧化还原电位调控甲基营养菌生产吡咯喹啉醌的方法,包括菌种活化、种子培养和发酵生产;在甲基营养菌发酵生产吡咯喹啉醌的体系中引入氧化还原电位电极,通过控制体系中通气量和搅拌转速来调节发酵生产阶段的氧化还原电位在高电位氧化阶段和低电位还原阶段变化,进而保证菌体生长和吡咯喹啉醌的积累,本发明的方法能够缩短发酵时间,同时提高吡咯喹啉醌的产量和产率及发酵体系的稳定性。
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公开(公告)号:CN106086052B
公开(公告)日:2019-11-01
申请号:CN201610512635.9
申请日:2016-07-01
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了生产吡咯喹啉醌的细菌及其应用。本发明所提供的细菌是将特异质粒导入出发菌得到的,所述特异质粒是在出发质粒中导入PqqA蛋白的编码基因、PqqB蛋白的编码基因、PqqC蛋白的编码基因、pqqD蛋白的编码基因和PqqE蛋白的编码基因得到的。所述PqqA蛋白为(Y1)或(Y2)或(Y3):(Y1)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白和PqqA3蛋白;(Y2)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白和PqqA3蛋白中的任意两个蛋白;(Y3)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白或PqqA3蛋白。实验证明,本发明所提供的细菌可有效提高PQQ的产量,具有原料低廉、工艺简单、生产效率高等优点,具有良好的工业化应用前景。
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公开(公告)号:CN107056782B
公开(公告)日:2019-05-14
申请号:CN201710441502.1
申请日:2017-06-13
Applicant: 福建师范大学
IPC: C07D471/04 , C12P17/18 , C12N1/20 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种甲基营养菌发酵液中吡咯喹啉醌的分离纯化方法及其应用。本发明的方法包括如下步骤:(1)将发酵液先经大孔树脂富集,再依次经过缓冲液和水进行洗脱,收集洗脱液,得到富含吡咯喹啉醌的富集液;(2)将所述富含吡咯喹啉醌的富集液经亲水性硅胶填料纯化,得到吡咯喹啉醌母液;(3)使所述吡咯喹啉醌母液中的吡咯喹啉醌结晶析出,得到吡咯喹啉醌粗晶体;(4)采用碱溶酸沉法将所述吡咯喹啉醌粗晶体进行重结晶,得到吡咯喹啉醌。通过实验证明:本发明的方法具有工艺操作简单、衔接度高,产品回收率和纯度高的特点,可用于大规模工业化生产制备吡咯喹啉醌。
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公开(公告)号:CN108342378B
公开(公告)日:2021-05-11
申请号:CN201810228327.2
申请日:2018-03-20
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶突变体及其编码基因与应用。本发明提供了一种蛋白质,是将来源于乳酸菌的谷氨酸脱羧酶b蛋白的第37位丙氨酸和/或第153位丙氨酸进行突变得到的。实验证明,采用本发明所提供的谷氨酸脱羧酶突变体,较野生型漆酶相比,具有比活力高且酸性依赖弱的特点,在γ‑氨基丁酸(GABA)的制备中有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN106086052A
公开(公告)日:2016-11-09
申请号:CN201610512635.9
申请日:2016-07-01
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开了生产吡咯喹啉醌的细菌及其应用。本发明所提供的细菌是将特异质粒导入出发菌得到的,所述特异质粒是在出发质粒中导入PqqA蛋白的编码基因、PqqB蛋白的编码基因、PqqC蛋白的编码基因、pqqD蛋白的编码基因和PqqE蛋白的编码基因得到的。所述PqqA蛋白为(Y1)或(Y2)或(Y3):(Y1)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白和PqqA3蛋白;(Y2)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白和PqqA3蛋白中的任意两个蛋白;(Y3)PqqA1蛋白、PqqA2蛋白或PqqA3蛋白。实验证明,本发明所提供的细菌可有效提高PQQ的产量,具有原料低廉、工艺简单、生产效率高等优点,具有良好的工业化应用前景。
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公开(公告)号:CN113699194B
公开(公告)日:2024-05-14
申请号:CN202110967604.3
申请日:2021-08-23
Applicant: 福建师范大学
Abstract: 本发明公开一种利用氧化还原电位调控甲基营养菌生产吡咯喹啉醌的方法,包括菌种活化、种子培养和发酵生产;在甲基营养菌发酵生产吡咯喹啉醌的体系中引入氧化还原电位电极,通过控制体系中通气量和搅拌转速来调节发酵生产阶段的氧化还原电位在高电位氧化阶段和低电位还原阶段变化,进而保证菌体生长和吡咯喹啉醌的积累,本发明的方法能够缩短发酵时间,同时提高吡咯喹啉醌的产量和产率及发酵体系的稳定性。
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