一种强化圆红冬孢酵母产α-亚麻酸的方法

    公开(公告)号:CN105368885B

    公开(公告)日:2019-05-14

    申请号:CN201510814342.1

    申请日:2015-11-22

    Abstract: 本发明提供了一种强化圆红冬孢酵母产α‑亚麻酸的方法,包括以下步骤:1)将活化的圆红冬孢酵母在YEPD培养基培养;2)收集步骤1)培养而得的圆红冬孢酵母菌体,接种至补料发酵培养基进行补料发酵,所述补料发酵培养基含有碳源、氮源和无机盐,所述碳源优选为含有葡萄糖和木糖的混合碳源,补料发酵过程中,总碳氮比始终维持在100:0.7~1.5。本发明的方法操作简单易控,α‑亚麻酸产量能够达到总油脂的5%以上。

    温度敏感型载体pBBR1MCS-2-Ts2及其应用

    公开(公告)号:CN104894154B

    公开(公告)日:2018-03-02

    申请号:CN201510340512.7

    申请日:2015-06-18

    Abstract: 本发明公开了温度敏感型载体pBBR1MCS‑2‑Ts2及其应用。本发明所提供的温度敏感型载体pBBR1MCS‑2‑Ts2,是将SEQ ID No.1的第1557‑2526位所示的DNA片段替换为目的基因表达盒,并保持SEQ ID No.1的其他核苷酸不变,得到的重组载体;目的基因表达盒编码的蛋白质为将SEQ ID No.2所示的蛋白质进行A2)的改造、保持SEQ ID No.2的其它氨基酸残基均不变得到的蛋白质:所述A2)为将SEQ ID No.2第130位的His突变为Gln。

    温度敏感型载体pBBR1MCS-2-Ts3及其应用

    公开(公告)号:CN104894155B

    公开(公告)日:2017-11-03

    申请号:CN201510340762.0

    申请日:2015-06-18

    Abstract: 本发明公开了温度敏感型载体pBBR1MCS‑2‑Ts3及其应用。本发明所提供的温度敏感型载体pBBR1MCS‑2‑Ts3,构建重组载体的方法,是将SEQ ID No.1的第1557‑2526位所示的DNA片段替换为目的基因表达盒,并保持SEQ ID No.1的其他核苷酸不变,得到的重组载体;目的基因表达盒编码的蛋白质为将SEQ ID No.2所示的蛋白质进行A3)的改造、保持SEQ ID No.2的其它氨基酸残基均不变得到的蛋白质:所述A3)为将SEQ ID No.2第86位的Arg突变为Cys。

    温度敏感型载体pBBR1MCS-2-Ts3及其应用

    公开(公告)号:CN104894155A

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201510340762.0

    申请日:2015-06-18

    Abstract: 本发明公开了温度敏感型载体pBBR1MCS-2-Ts3及其应用。本发明所提供的温度敏感型载体pBBR1MCS-2-Ts3,构建重组载体的方法,是将SEQ?ID?No.1的第1557-2526位所示的DNA片段替换为目的基因表达盒,并保持SEQ?ID?No.1的其他核苷酸不变,得到的重组载体;目的基因表达盒编码的蛋白质为将SEQ?ID?No.2所示的蛋白质进行A3)的改造、保持SEQ?ID?No.2的其它氨基酸残基均不变得到的蛋白质:所述A3)为将SEQ?ID?No.2第86位的Arg突变为Cys。

    利用秸秆水解液发酵生产二十二碳六烯酸的方法

    公开(公告)号:CN103614427A

    公开(公告)日:2014-03-05

    申请号:CN201310571413.0

    申请日:2013-11-13

    Abstract: 本发明公开了一种利用秸秆水解液发酵生产二十二碳六烯酸的方法。该方法包括如下步骤:(1)利用氨气爆破法预处理秸秆粉,得到预处理后的秸秆粉;(2)用纤维素酶、β-半乳糖苷酶和果胶酶酶解所述预处理后的秸秆粉,得到秸秆水解液;(3)向所述秸秆水解液中加入培养基,然后接入裂殖壶菌(Aurantiochytrium)进行发酵培养,获得裂殖壶菌发酵液;(4)用乙醇和正已烷的混合液提取所述裂殖壶菌发酵液,得到提取液;所述提取液经干燥即得二十二碳六烯酸。本发明制备的DHA产量稳定,在不添加外源葡萄糖情况下,采用本发明获得的菌体干重可达58~66g/L,油脂占细胞干重的40.8~53.3%,DHA占油脂干重的42.1~45.3%,DHA产量为10.3~15.4g/L。

    无载体固定化米根霉脂肪酶及其制备方法和生产生物柴油的应用

    公开(公告)号:CN104928279B

    公开(公告)日:2018-06-15

    申请号:CN201510270467.2

    申请日:2015-05-25

    Abstract: 本发明提供了一种无载体固定化米根霉脂肪酶及其制备方法和应用。本发明的制备方法包括以下步骤:1)将蛋白交联助剂加入含米根霉脂肪酶的缓冲液中以形成第一溶液,所述蛋白交联助剂为血清白蛋白;2)向第一溶液中加入乙二醇二甲醚以使米根霉脂肪酶进行沉淀,静置后得到含米根霉脂肪酶的第二溶液;3)向的第二溶液加入交联剂以形成混合溶液,然后将该混合溶液孵育,其中,所述交联剂选自乙酸酐、甲醛和戊二醛;4)将步骤3)孵育后的混合溶液进行沉淀以得到交联酶聚体。本发明的无载体固定化米根霉脂肪酶催化油脂转酯化反应较强,重复使用多次后仍保持较强活性。

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