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公开(公告)号：CN114085864B
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202111071465.2
申请日：2021-09-14
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明的目的是为了开发一种大孢子母细胞外围细胞特异性诱导表达系统。以pWRKY28驱动人工转录因子VGE表达，构建细胞特异性诱导表达系统，并将报告基因Vennus构建到表达系统中，导入拟南芥植株中，观察它们在胚珠的不同时期，特别是MMC时期的表达情况，得到一个大孢子母细胞外围细胞特异性诱导表达系统。
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公开(公告)号：CN116515891A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310609338.6
申请日：2023-05-29
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了以开花后15‑20天油菜种子cDNA为模板，克隆BnKAS2基因和BnLACS9基因的cDNA序列，以油菜叶片DNA为模板克隆napin启动子序列，以PBI121质粒为模板克隆nos终止子序列，以PMDC83载体为骨架使用酶切连接的方法构建BnKAS2基因和BnLACS9共表达载体，本发明的优点：弥补了BnKAS2单独过表达对脂肪酸合成带来的负面影响，促进了脂肪酸的合成，同时在单独过表达BnKAS2的基础上进一步降低了C16:0饱和脂肪酸的比例，提升了品质；可以改良拟南芥、油菜或其他油料作物脂肪酸组分和提高含油量；可以提高拟南芥、油菜或其他油料作物的产量和品质。
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公开(公告)号：CN118109501A
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202311775305.5
申请日：2023-12-22
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了菠萝转录因子AcWRKY38基因的克隆方法、表达载体构建及其在调控植物冷胁迫中的应用，首先提取菠萝叶片的RNA，反转录获得cDNA；再以菠萝cDNA为模版，根据目的基因的序列设计特异性引物，通过特异性引物AcWRKY38F，AcWRKY38R进行PCR扩增获得目的片段。AcWRKY38基因的目的片段连接到pENTR载体上并进行热激转化，连接成功进行PCR鉴定，测序无误后，提取质粒。然后将已连接上GATEWAY入门载体pENTR的目的载体与中间载体pGWB505进行LR重组反应。构建成功后，利用农杆菌介导的遗传转化技术将目的基因转入菠萝愈伤组织，通过潮霉素筛选，获得菠萝过表达阳性植株。将转基因菠萝植株通过冷胁迫处理，通过表型观察发现，过表达AcWRKY38转基因菠萝植株增强了菠萝耐冷和抗逆性，有利于培育高产、优质、高抗性的优良菠萝品种。
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公开(公告)号：CN116076312A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202211580786.X
申请日：2022-12-09
Applicant: 福建农林大学 , 广西壮族自治区农业科学院
Abstract: 本发明提供一种百香果网室母本保存结合露天选种的快速筛选杂交后代的方法。本发明在网室内将抗茎腐病的品种作为砧木、杂交实生后代新梢为接穗进行嫁接，嫁接后的无病毒健康种苗保存于母本保存圃中，同时将杂交后代接穗高位嫁接于露天百香果植株的侧蔓，单株植株可实现多枝蔓嫁接，然后经过筛选鉴定，对于通过初选的接穗枝蔓，回到网室母本圃找出对应的单株，便可进行无病毒健康苗木嫁接扩繁。本发明方法不仅能够快速大量的进行露天杂交后代筛选，还能够充分利用网室大棚有限空间进行规模母本保存与扩繁，且避免了露天选种母本易感染病毒，难以获得健康无病毒杂交后代种苗，本方法达到了高效快速筛选杂交后代且繁育无病毒健康嫁接苗的目的。
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公开(公告)号：CN113834712A
公开(公告)日：2021-12-24
申请号：CN202111121672.4
申请日：2021-09-24
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明提供一种有效观察碱蓬胚珠形态和发育过程的方法，通过取材、固定、染色、脱水、透明、观察等步骤，利用Leica SP2激光扫描共聚焦显微镜下用543nm波长的激光激发荧光进行成熟胚囊整体分层扫描观察，并获取图像。相比现有的方法，本发明操作起来时间短，过程简单，同时效果好，能够清晰有效的观察碱蓬胚珠形态和发育过程。目前尚无碱蓬胚珠形态和发育过程观察的方法报道。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113684224A
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN202111058887.6
申请日：2021-09-10
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明提供一种拟南芥高效遗传转化的方法，通过构建质粒，转化农杆菌，然后收集菌体，浸泡拟南芥花序进行侵染后，将拟南芥植株放置黑暗处16‑24小时后，正常浇水培养，收获种子，再通过筛选标记直接筛选阳性种子，终止后得到阳性转基因植株。本发明不需要对农杆菌的单克隆进行检测，避免了农杆菌PCR的步骤；不需要液体培养农杆菌菌液，避免了液体培养过程和离心收集菌液的时间。本发明改进了拟南芥转化的步骤，节约了实验操作的时间，提高了拟南芥转化操作的工作效率，使得拟南芥转化操作可以规模化大批量进行。
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公开(公告)号：CN119192291A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411121975.X
申请日：2024-08-15
Applicant: 福建农林大学
IPC: C07K7/08 , C40B40/02 , C40B50/06 , C12N15/81 , C12N15/66 , C12N15/10 , C12N15/50 , A61K39/215 , A61K38/10 , A61K39/39 , A61P31/14 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种与SARS‑CoV‑2受体结构域结合的小肽的构建方法，包括以下步骤：SARS‑CoV‑2病毒SPIKE蛋白RBD domain序列的设计；SARS‑CoV‑2病毒SPIKE蛋白RBD domain克隆；酵母双杂交Bait株系的构建；酵母双杂交筛选；目标片段序列的解析。本发明的有益效果为：具有高度多样性；具有高灵敏度；具有高通量；具有可溶性表达；具有可改造性，增强其作为疫苗或药物的潜力；能够应用于抗病毒药物研发，具有高亲和力和特异性，可以与RBD结合并阻断病毒进入细胞；可以作为疫苗的辅助剂，用于增强疫苗的免疫原性和保护效果；可以用于病毒的诊断和检测，可以与RBD结合并形成特异性复合物，在病毒检测中作为识别和检测的工具。
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公开(公告)号：CN119162675A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411121973.0
申请日：2024-08-15
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了一种随机多肽AD酵母文库的构建方法，通过合成随机片段并进行PCR扩增，使用片段扩增引物，得到了双链序列；利用Gateway BP反应将PCR产物构建到入门载体中，形成了初级文库；通过Gateway LR反应将步骤二的质粒文库构建到目的载体中，生成了酵母双杂交AD质粒文库；将二次质粒文库转化到酵母菌株Y187中，形成了Y187AD标记的随机肽文库。本发明的优点：具有高度可操作性，具有易于操作和文库构建的特点；具有多样性和复杂性；具有高度可靠性和灵敏度：能够有效地筛选出具有高亲和力和特异性的多肽配体；具有快速筛选功能，提高筛选效率；可应用于多种研究领域。
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公开(公告)号：CN113881696B
公开(公告)日：2024-10-22
申请号：CN202111178767.X
申请日：2021-10-11
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明构建了一个大孢子母细胞特异性诱导表达的系统:ipKNU‑Venus，方法为：构建含有pKNU：：VGE‑5×GAL4 DNA：：Venus表达盒的载体，转化至拟南芥中，获得阳性苗。该系统只有在诱导剂（Methoxyfenozide）诱导作用之后才表达，为研究大孢子母细胞的起源与分化提供了一种新方法。
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公开(公告)号：CN117737117A
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202311785358.5
申请日：2023-12-22
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了菠萝转录因子AcWRKY31基因的克隆方法、表达载体及其在调控植物干旱中的应用，先提取金菠萝(下称MD2)叶片的RNA，反转录获得cDNA；再以cDNA为模板，通过特异性引物AcWRKY31‑F，AcWRKY31‑R进行PCR扩增获得AcWRKY31的全长基因序列。将AcWRKY31基因连接到pENTR载体上并进行转化，连接成功并测序无误后，将已连接到GATEWAY入门载体pENTR上的目的载体与中间载体pGWB605进行LR重组反应。构建成功后，将目的载体转入农杆菌GV3101中，利用农杆菌介导的遗传转化方法将目的基因导入菠萝愈伤组织，通过潮霉素筛选，CTAB法提取DNA进行PCR鉴定，获得菠萝转基因AcWRKY31的阳性菠萝植株。转基因菠萝植株在干旱胁迫下，过表达AcWRKY31增强了转基因菠萝对干旱胁迫的敏感性。说明AcWRKY31基因具有增强菠萝对干旱敏感性的作用。
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