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公开(公告)号：CN117737117A
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202311785358.5
申请日：2023-12-22
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了菠萝转录因子AcWRKY31基因的克隆方法、表达载体及其在调控植物干旱中的应用，先提取金菠萝(下称MD2)叶片的RNA，反转录获得cDNA；再以cDNA为模板，通过特异性引物AcWRKY31‑F，AcWRKY31‑R进行PCR扩增获得AcWRKY31的全长基因序列。将AcWRKY31基因连接到pENTR载体上并进行转化，连接成功并测序无误后，将已连接到GATEWAY入门载体pENTR上的目的载体与中间载体pGWB605进行LR重组反应。构建成功后，将目的载体转入农杆菌GV3101中，利用农杆菌介导的遗传转化方法将目的基因导入菠萝愈伤组织，通过潮霉素筛选，CTAB法提取DNA进行PCR鉴定，获得菠萝转基因AcWRKY31的阳性菠萝植株。转基因菠萝植株在干旱胁迫下，过表达AcWRKY31增强了转基因菠萝对干旱胁迫的敏感性。说明AcWRKY31基因具有增强菠萝对干旱敏感性的作用。
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公开(公告)号：CN118109501A
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202311775305.5
申请日：2023-12-22
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了菠萝转录因子AcWRKY38基因的克隆方法、表达载体构建及其在调控植物冷胁迫中的应用，首先提取菠萝叶片的RNA，反转录获得cDNA；再以菠萝cDNA为模版，根据目的基因的序列设计特异性引物，通过特异性引物AcWRKY38F，AcWRKY38R进行PCR扩增获得目的片段。AcWRKY38基因的目的片段连接到pENTR载体上并进行热激转化，连接成功进行PCR鉴定，测序无误后，提取质粒。然后将已连接上GATEWAY入门载体pENTR的目的载体与中间载体pGWB505进行LR重组反应。构建成功后，利用农杆菌介导的遗传转化技术将目的基因转入菠萝愈伤组织，通过潮霉素筛选，获得菠萝过表达阳性植株。将转基因菠萝植株通过冷胁迫处理，通过表型观察发现，过表达AcWRKY38转基因菠萝植株增强了菠萝耐冷和抗逆性，有利于培育高产、优质、高抗性的优良菠萝品种。
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公开(公告)号：CN117230111A
公开(公告)日：2023-12-15
申请号：CN202311088561.7
申请日：2023-08-28
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/83 , C12N15/53 , A01H6/00 , A01H5/00 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了百香果病毒介导的基因沉默体系的构建方法及其应用，构建方法是：(1)提取百香果嫩叶的RNA，反转录获得cDNA；(2)选择百香果PePDS基因为干扰片段；(3)设计PePDS扩增的特异性上、下游引物，并进行cDNA片段PCR扩增，纯化后获得PePDS基因干扰片段；(4)将纯化的PePDS基因干扰片段通过重组反应同步连接到植物病毒pTRV2载体上，构建得到百香果PePDS基因沉默体系(pTRV1，pTRV2‑PePDS)，命名为TRV‑PePDS。本发明构建的TRV‑PePDS可应用到农杆菌转化和百香果叶片浸染过程中，并表现出了明显的沉默效率。本发明能够快速高效获得转基因植株，稳定性强，操作简单。实现了快速降低目的基因表达水平的目的，达到敲除目的基因的效果，加快百香果功能基因组学的研究进程。
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公开(公告)号：CN119157025A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411316928.0
申请日：2024-09-20
Applicant: 广西壮族自治区农业科学院 , 福建农林大学 , 广西华农凤梨现代农业科技有限公司
Inventor： 王小媚 , 秦源 , 邓彪 , 王路路 , 郑平 , 柴改凤 , 刘开创 , 刘业强 , 冼通 , 陶慧 , 李奔 , 任惠 , 苏伟强 , 刘润泽 , 黄章保 , 方位宽 , 蔡昭艳 , 董龙 , 赵艳红
Abstract: 本发明公开一种阻断菠萝成熟果实水心病增加的方法，属于果树栽培技术领域。本发明方法包括：4～9月菠萝果实采收期，根据天气变化情况抽样采收达到不同成熟度的果实，先将果园划分多个区域，在每个区域随机抽样选取不同成熟度的果实，判断其出现水心病发生情况，进而确定该区域菠萝果实水心病的发生率，对于达到采收标准六成或七成熟的菠萝果实水心病发生率在20％以上的区域优先采收，将该区域的全部果实的果柄直接截断，可以有效的阻断了果实水心病的发生率，之后再对果园中余下的区域逐步分批采收。该方法解决了大面积菠萝生产果园短期内采收不及时出现的果实水心病发生加重的问题，既简单又安全高效，对于菠萝产业的可持续发展具有重要意义。
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